細胞凍存液是如何保護細胞的:細胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,但是其結(jié)構(gòu)微小復雜,內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細胞懸浮在純水中,隨著溫度的降低,細胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰,所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡,這種因細胞內(nèi)部結(jié)冰而導致的細胞損傷稱為細胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,細胞外部的水分會首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長,細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞,細胞便發(fā)生滲漏,在復溫時,大量水分會因此進入細胞內(nèi),造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導致的細胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。無血清細胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。太原正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家
細胞凍存和復蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液.細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。太原正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家無血清細胞凍存液存儲條件:儲存于4℃以下,質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期兩年。
凍存方式:按照凍存保護液在凍結(jié)后是否形成冰晶來劃分,凍存方法可分為非玻璃化和玻璃化凍存兩種。非玻璃化凍存是利用各種溫級的冰箱分階段降溫至-70℃~-80℃,然后直接投入液氮進行保存;或者是利用電子計算機程控降溫儀以及利用液氮的氣、液,按一定的降溫速率從室溫降至-100℃以下,再直接投入液氮保存的方法。以該種方法凍結(jié)的細胞懸液或多或少都有冰晶的形成。玻璃化凍存則是指利用多種高濃度的冷凍保護劑聯(lián)合形成的玻璃化冷凍保護液保護懸浮細胞,直接投入液氮進行凍存的方法。以該中方法凍結(jié)的細胞懸液沒有冰晶的形成。但目前細胞凍存較常用的仍是前一種方法。
無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明確,不含動物來源性蛋白,Chemicalbook不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。細胞凍存是細胞實驗中的一個常規(guī)技術(shù),通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成,由于血清含有異源成分且生長過程中可能帶來的風險Chemicalbook,故傳統(tǒng)的細胞凍存配方并不適于體內(nèi)研究。本產(chǎn)品完全由化學成分組成,無動物來源,目前測試可以很好的凍存T細胞,NK細胞以及MSC等細胞。在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中,可使冰點降低,提高細胞膜對水的通透性。
無血清細胞凍存液的用途:用途:1.無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質(zhì)干細胞等干細胞的儲存。2.無血清細胞凍存液用于T淋巴細胞、NK細胞等免疫細胞的存儲。3.無血清細胞凍存液用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:1.不含牛血清,無動物源組分。傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO等組分組成。胎牛血清取自牛,因此,難以應用到需要避免接觸動物源的應用領域。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途,無動物源組分。2.2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。為了避免反復凍融,傳統(tǒng)的細胞凍存液,需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。無血清細胞凍存液,2-8℃保存即可,無需再進行分裝。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO等組分組成。青島無血清細胞凍存液供應商
細胞凍存管一定要保證完全密封,否則在復蘇過程中有可能會炸。太原正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家
細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液,4℃預冷(新鮮配制的凍存液會產(chǎn)生大量的熱);取對數(shù)生長期的細胞,用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來;懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中;離心1200rpm,6min;去除上清液,逐漸加入適量預冷的細胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml;將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標明細胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名;凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;到達-80℃時,則可迅速放入液氮中。太原正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家