寧波石家莊鼠尾膠原

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無(wú)菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜。5．從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無(wú)菌的，這時(shí)候可以在無(wú)菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細(xì)胞前用無(wú)菌的水漂洗。制備鼠尾膠原（兩個(gè)同學(xué)一組操作）。寧波石家莊鼠尾膠原

膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。膠原蛋白可分為20幾個(gè)亞型，但為常見的為I、II、III型膠原蛋白，即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。劃重點(diǎn)：任何動(dòng)物的膠原都有許多共性，I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良，鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白。于是，動(dòng)物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明：一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說(shuō)明書中給出了原因：“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型，之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取，但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì)，合肥鼠尾膠原廠家推薦鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿。

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面（懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外）才能完成生長(zhǎng)過程，而有一些細(xì)胞卻總是不太給力，自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難，這個(gè)時(shí)候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層（coating），給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后，細(xì)胞就能更好地貼附上去，除了培養(yǎng)皿，一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞，同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。耗子尾汁還能變得更加，一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來(lái)自大鼠的尾巴，制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提

膠原蛋白的提取方法：1.堿法提取：堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解，因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低。所以，若想保留膠原的三股螺旋結(jié)構(gòu)，此法不可取。2.鹽法提取：鹽法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下，當(dāng)鹽的濃度達(dá)到一定量時(shí)，膠原溶解。并且可采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理，可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用，但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建，對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的：探討鼠尾膠原對(duì)過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿（實(shí)驗(yàn)組）和普通培養(yǎng)皿（對(duì)照組）中，并且均用0，10，100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài)，應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率，TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài)，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率，黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平，Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá)。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無(wú)菌下制備，純度達(dá)到95%以上。珠海正規(guī)鼠尾膠原銷售廠家

4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀。寧波石家莊鼠尾膠原

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異。止血材料是常見的醫(yī)療器械產(chǎn)品。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn)；同時(shí)還存在著容易與傷口粘附不易去除，導(dǎo)致傷口潰爛，或者因?yàn)檎掣綄?dǎo)致傳染；再次就是止血材料多是通過吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血，很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來(lái)生產(chǎn)的?，F(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素、α-氰基丙烯酸酯類組織膠、醫(yī)用止血明膠等，但是都有各自的缺點(diǎn)。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高；α-氰基丙烯酸酯類組織膠降解過程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì)；醫(yī)用止血明膠黏附性較差，易脫落，因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等。寧波石家莊鼠尾膠原