如何知道細(xì)胞系是否發(fā)生交叉污染了?如果存在細(xì)胞系之間發(fā)生交叉污染,而且鑒定用的細(xì)胞可能有兩種以上的細(xì)胞系時(shí),那么在進(jìn)行STR位點(diǎn)檢測(cè)的時(shí)候,多個(gè)位點(diǎn)會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)以上的峰。峰高值表示該等位基因的信號(hào)強(qiáng)度,理論上峰值與樣本的DNA濃度有直接的關(guān)系。因此,存在交叉污染的混合細(xì)胞系中,其中一個(gè)位點(diǎn)中某些峰會(huì)明顯高于其他的峰,其中大峰是屬于混合細(xì)胞系中那個(gè)主要細(xì)胞系,而小峰則屬于那個(gè)次要細(xì)胞系。STR鑒定目前已被ICLAC、ATCC等機(jī)構(gòu)作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞鑒定,越來(lái)越多的雜志要求在投稿時(shí)提供細(xì)胞STR分型數(shù)據(jù)。一株細(xì)胞系的遺傳特征確立后,細(xì)胞系可以通過(guò)定期的檢測(cè),以防止出現(xiàn)細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染的情況。南京小鼠鑒定
本文購(gòu)自ATCC等機(jī)構(gòu)的細(xì)胞(如SW480,HCT116, FET細(xì)胞系等),均全部由上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司鑒定。其中,HCT116細(xì)胞系,雖源于一個(gè)男性個(gè)體,但其現(xiàn)存細(xì)胞系在世界上有兩種性別,翼和公司以自己的專業(yè)對(duì)其成功的進(jìn)行了鑒定。文章認(rèn)為,盡管ABHD5在結(jié)直腸的發(fā)展中起著腫liu抑制作用,但它通過(guò)促進(jìn)RNASET2介導(dǎo)的自噬,以Fu作為代謝的底物,虛弱了結(jié)直腸細(xì)胞對(duì)FU的敏感性。該研究表明ABHD5基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)、對(duì)基于FU輔助化療預(yù)后的有重要提示作用。浙江小鼠細(xì)胞STR鑒定哪里好公司深知Hela細(xì)胞極易污染別的細(xì)胞,這些經(jīng)驗(yàn)被應(yīng)用于身份驗(yàn)證中。
上海翼和公司為客戶提供基于qPCR技術(shù)的種系鑒定方案,選擇人、小鼠、大鼠和倉(cāng)鼠基因組中特異基因片段,設(shè)計(jì)引物和熒光探針,快速鑒定種系來(lái)源。該方案靈敏度和特異性高,可以檢測(cè)樣本中不同種系來(lái)源的細(xì)胞污染,當(dāng)污染細(xì)胞占比> 5% 時(shí),可被穩(wěn)定檢出。在PCR反應(yīng)中,除了正向引物和反向引物外,還引入了第三個(gè)寡核苷酸序列,這是一個(gè)重大的進(jìn)展。這個(gè)額外的序列,就是探針(Probe),它彌補(bǔ)了DNA結(jié)合染料的缺點(diǎn)。探針上有熒光修飾基團(tuán),可產(chǎn)生熒光信號(hào)。
上海翼和公司采用PCR擴(kuò)增和一代測(cè)序技術(shù)獲得線粒體COI基因區(qū)DNA序列信息,并與數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)鑒定動(dòng)物DNA樣本的種屬。不同種的動(dòng)物都具有各自特異的線粒體COI基因序列,因此利用COI基因序列進(jìn)行動(dòng)物種屬的鑒定成為一種標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)方案。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會(huì)理事單位,至今已有十六年歷史,專注于為國(guó)內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和質(zhì)控試劑盒.基于自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的多重PCR技術(shù),翼和生物研發(fā)和改良了適用于熒光定量PCR一代測(cè)序和二代高通量測(cè)序平臺(tái)的多種檢測(cè)技術(shù)和產(chǎn)品,逐步形成了在細(xì)胞組織和動(dòng)物模型質(zhì)控、大健康檢測(cè)和科學(xué)研究3大板塊產(chǎn)品布局。近年來(lái),翼和生物在首席科學(xué)家肖君華教授帶領(lǐng)下,研發(fā)推出了10多項(xiàng)創(chuàng)新技術(shù)和產(chǎn)品,并致力于建設(shè)符合國(guó)家和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。這給企業(yè)注入了新的生命力,促進(jìn)了翼和生物的高速發(fā)展。未來(lái),翼和生物必將發(fā)展成為該領(lǐng)域的專業(yè)供應(yīng)商。一般說(shuō)來(lái),匹配度≥80%即可認(rèn)為該細(xì)胞系正確,匹配度<80%則說(shuō)明該細(xì)胞系的來(lái)源需要被懷疑。
在一切由細(xì)胞身份開(kāi)始說(shuō)起一文中,小E已經(jīng)為大家羅列出目前已經(jīng)確定被Hela細(xì)胞污染的細(xì)胞系名稱。做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的伙伴們可以翻閱一下,以防自己的細(xì)胞也在其中!還不僅只如此,這些常見(jiàn)的細(xì)胞系除了發(fā)現(xiàn)種屬內(nèi)的交叉污染/錯(cuò)誤鑒定,還有部分細(xì)胞系被發(fā)現(xiàn)連種屬都被錯(cuò)誤鑒定了!被鑒定的278株細(xì)胞系中,有20株(20/278=7.2%)細(xì)胞系PCR擴(kuò)增失敗,證明其并非人源細(xì)胞。作者繼續(xù)追蹤實(shí)驗(yàn),通過(guò)種屬鑒定來(lái)確認(rèn)其真實(shí)來(lái)源,結(jié)果其中2株細(xì)胞系被證實(shí)分別來(lái)源于大鼠。收到細(xì)胞系鑒定結(jié)果以及STR信息,可以與參考數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)。浙江小鼠細(xì)胞STR鑒定哪里好
所謂細(xì)胞系鑒定即通過(guò)STR(短串聯(lián)重復(fù))圖譜所建立細(xì)胞系的遺傳特征。南京小鼠鑒定
細(xì)胞STR鑒定的特點(diǎn)如下:STR 圖譜鑒別通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的操作,采用自動(dòng)化的DNA分析儀對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行精確的分析,并以簡(jiǎn)單的數(shù)字描述STR序列重復(fù)次數(shù),不僅增加了結(jié)果的客觀性,而且所需細(xì)胞數(shù)量少(只需1×10^3個(gè)細(xì)胞),而細(xì)胞鑒定中常規(guī)采用的同工酶法通常需要5×10^6個(gè)細(xì)胞,結(jié)果還沒(méi)那么穩(wěn)定,特異性也不強(qiáng)??偟膩?lái)說(shuō),STR法分型快速、經(jīng)濟(jì)、易于自動(dòng)化,可重復(fù)性好,且數(shù)據(jù)格式適合建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)參考數(shù)據(jù)庫(kù)的特點(diǎn),所以應(yīng)用價(jià)值極大。南京小鼠鑒定
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司位于龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502,是一家專業(yè)的第三方檢測(cè)服務(wù);生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù);健康衰老評(píng)估;大健康檢測(cè);遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù);生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測(cè)技術(shù)技術(shù)服務(wù);小鼠遺傳品系鑒定;轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定;細(xì)胞點(diǎn)突變檢測(cè);細(xì)胞端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性檢測(cè)。公司。致力于創(chuàng)造高品質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù),以誠(chéng)信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨,以建Biowing產(chǎn)品為目標(biāo),努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司堅(jiān)持以客戶為中心、第三方檢測(cè)服務(wù);生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù);健康衰老評(píng)估;大健康檢測(cè);遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù);生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測(cè)技術(shù)技術(shù)服務(wù);小鼠遺傳品系鑒定;轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定;細(xì)胞點(diǎn)突變檢測(cè);細(xì)胞端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性檢測(cè)。市場(chǎng)為導(dǎo)向,重信譽(yù),保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。翼和生物始終以質(zhì)量為發(fā)展,把顧客的滿意作為公司發(fā)展的動(dòng)力,致力于為顧客帶來(lái)高品質(zhì)的細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)。