TaqMan熒光探針是一種寡核苷酸探針,熒光基團連接在探針的5’末端,而淬滅劑則在3’末端。在PCR反應(yīng)體系中加入2種不同熒光標(biāo)記的探針,它們可以分別與2個等位基因完全配對。正常情況下,由于探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團緊鄰在一起,熒光被淬滅。隨著PCR有效的進行,與模板完全配對的探針逐步被TaqDNA聚合酶5’——3’外切酶活性切割,致使探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團分離,淬滅效應(yīng)解除,報告熒光基團被,檢測到熒光信號,相反,如果模板不能完全配對的探針(另一種等位基因)不能被有效切割,因此檢測不到熒光信號,從而實現(xiàn)SNP位點的分型檢測。一次研究的SNP大概有十幾個到幾十個,這是比較早期的做法。浙江STR/SSR基因SNP分型準(zhǔn)確度高
隨著二代測序技術(shù)的普及,相比Sanger測序,二代測序雖然降低了測序讀長,但是極大增加的測序通量同時大幅降低測序成本。利用二代測序進行SNP分型,不僅測序讀長滿足分型需求,并且可以同時對數(shù)十?dāng)?shù)百個位點,上千樣本進行分型。二代測序結(jié)果判斷準(zhǔn)確直觀,相比RFLP,Taqman,LDR等方法都通過間接結(jié)果來進行分型結(jié)果的判定,直接測序或二代測序法分型能都直接看到位點具體序列情況,SNP位點判斷更加直觀。上海翼和專家團隊富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價比高、可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。浙江STR/SSR基因SNP分型準(zhǔn)確度高SNP是人類可遺傳的變異中比較常見的一種。占所有已知多態(tài)性的90%以上。
單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphism,SNP),主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。它是人類可遺傳的變異中,常見的一種。占所有已知多態(tài)性的90%以上。SNP在人類基因組中比較常見存在,平均每500~1000個堿基對中就有1個,估計其總數(shù)可達300萬個甚至更多。SNP所表現(xiàn)的多態(tài)性只涉及到單個堿基的變異,這種變異可由單個堿基的轉(zhuǎn)換(transition)或顛換(transversion)所引起,也可由堿基的插入或缺失所致。但通常所說的SNP并不包括后兩種情況。
我們利用多重PCR+二代測序技術(shù)為各專業(yè)用戶提供大規(guī)模的SNP分型,目標(biāo)區(qū)段的重測序,目標(biāo)區(qū)段甲基化測序。我們服務(wù)過的高質(zhì)量客戶包括:復(fù)旦大學(xué)金力院士團隊、上海交通大學(xué)賀林院士團隊和中科院韓斌院士團隊。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總公司(地址):上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號502上海翼和專家團隊富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。SNP本身是針對“群體”而言的(within a population)。
為了獲得更多糖原相關(guān)SNP位點,作者選擇了包括Cg_GD1基因在內(nèi)的5個基因,64個個體(32個高糖原個體和32個低糖原個體)進行重測序,,后得到732個高質(zhì)量SNP。其中32個位于Cg_GD2基因,256個位于Cg_GS基因,用于后續(xù)的關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果顯示有兩個SNP與糖原含量有關(guān)。分別是位于Cg_GD1基因第15個內(nèi)含子的SNP(Cg_SNP_3021(R(A/G))),和位于Cg_GD1基因的SNP(Cg_SNP_3021)。上海翼和專家團隊富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價比高、可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。SNPs是英文Single nucleotide polymorphisms的縮寫。河南微衛(wèi)星STRSNP分型送樣要求
做為一種新的遺傳標(biāo)記,SNP對于疾病的預(yù)測、診斷能夠提供更加可靠的科學(xué)依據(jù),因此對其研究具有重要意義。浙江STR/SSR基因SNP分型準(zhǔn)確度高
3.HRM法高分辨率熔解曲線分析(HRM)是近幾年興起的SNP研究工具,它通過實時監(jiān)測升溫過程中雙鏈DNA熒光染料與PCR擴增產(chǎn)物的結(jié)合情況,來判斷是否存在SNP,而且不同SNP位點、是否是雜合子等都會影響熔解曲線的峰形,因此HRM分析能夠有效區(qū)分不同SNP位點與不同基因型。這種檢測方法不受突變堿基位點與類型的局限,無需序列特異性探針,在PCR結(jié)束后直接運行高分辨率熔解,即可完成對樣品基因型的分析。該方法無需設(shè)計探針,操作簡便、快速,成本低,結(jié)果準(zhǔn)確,并且實現(xiàn)了真正的閉管操作。浙江STR/SSR基因SNP分型準(zhǔn)確度高
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司致力于醫(yī)藥健康,以科技創(chuàng)新實現(xiàn)高品質(zhì)管理的追求。公司自創(chuàng)立以來,投身于細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù),是醫(yī)藥健康的主力軍。翼和生物不斷開拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺,以應(yīng)用為重點,以服務(wù)為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價值,提供更優(yōu)服務(wù)。翼和生物始終關(guān)注醫(yī)藥健康市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。