值得注意的是,當(dāng)發(fā)生兩個(gè)或以上細(xì)胞混合的時(shí)候,檢測(cè)結(jié)果看起來(lái)非常像細(xì)胞系的“遺傳不穩(wěn)定”——當(dāng)一個(gè)細(xì)胞系存在亞群時(shí),尤其是一些*細(xì)胞系,由于遺傳不穩(wěn)定的存在,在一些位點(diǎn)的STR特性會(huì)不同。因此經(jīng)驗(yàn)豐富的分子專家是非常重要的,他能夠幫助分析復(fù)雜的電泳圖譜(STR峰圖),從而判斷是否由于發(fā)生細(xì)胞系交叉污染而導(dǎo)致多等位基因情況。上海翼和應(yīng)用生物,作為老牌的遺傳技術(shù)服務(wù)公司,十年以上基因分型經(jīng)驗(yàn),可以幫你解決你的疑惑。這有力地說(shuō)明了翼和細(xì)胞STR鑒定結(jié)果是得到國(guó)際前列期刊認(rèn)可的!南京小鼠細(xì)胞STR鑒定報(bào)告
細(xì)胞系錯(cuò)誤鑒定問(wèn)題已有50年歷史,基于國(guó)際細(xì)胞庫(kù)的分析數(shù)據(jù)顯示:1984年細(xì)胞錯(cuò)誤鑒定率為35%,1999年為18%,直到近幾年,應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的細(xì)胞系需要鑒定的問(wèn)題仍然很少有人關(guān)注。近年來(lái),大量研究表明 STR 基因分型 方法是進(jìn)行細(xì)胞交叉污染和性質(zhì)鑒定的比較有效和準(zhǔn)確的方法之一,STR基因分型應(yīng)用于細(xì)胞鑒定已被ATCC等機(jī)構(gòu)強(qiáng)烈推薦。美國(guó)的ATCC 細(xì)胞庫(kù)、德國(guó)的DSMZ細(xì)胞庫(kù)以及日本的JCRB細(xì)胞庫(kù)等為STR 分型提供了各細(xì)胞株的數(shù)據(jù)供比對(duì)。成都小鼠鑒定ATCC一般說(shuō)來(lái),匹配度≥80%即可認(rèn)為該細(xì)胞系正確,匹配度<80%則說(shuō)明該細(xì)胞系的來(lái)源需要被懷疑。
STR基因位點(diǎn)由長(zhǎng)度為3~7個(gè)堿基對(duì)的短串連重復(fù)序列組成,這些重復(fù)序列普遍存在于人類基因組中,可作為高度多態(tài)性標(biāo)記,被稱為細(xì)胞的DNA指紋,其可通過(guò)PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))來(lái)檢測(cè)。STR基因座位上的等位基因可通過(guò)擴(kuò)增區(qū)域內(nèi)重復(fù)序列的拷貝數(shù)的不同來(lái)區(qū)分,在毛細(xì)管電泳分離之后可通過(guò)熒光檢測(cè)來(lái)識(shí)別。隨后通過(guò)一定的計(jì)算方法,即可根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與專業(yè)的細(xì)胞STR數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)從而推算出樣品所屬的細(xì)胞系或可能的交叉污染的細(xì)胞系名稱。
細(xì)胞STR鑒定的特點(diǎn)如下:STR 圖譜鑒別通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的操作,采用自動(dòng)化的DNA分析儀對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行精確的分析,并以簡(jiǎn)單的數(shù)字描述STR序列重復(fù)次數(shù),不僅增加了結(jié)果的客觀性,而且所需細(xì)胞數(shù)量少(只需1×10^3個(gè)細(xì)胞),而細(xì)胞鑒定中常規(guī)采用的同工酶法通常需要5×10^6個(gè)細(xì)胞,結(jié)果還沒(méi)那么穩(wěn)定,特異性也不強(qiáng)??偟膩?lái)說(shuō),STR法分型快速、經(jīng)濟(jì)、易于自動(dòng)化,可重復(fù)性好,且數(shù)據(jù)格式適合建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)參考數(shù)據(jù)庫(kù)的特點(diǎn),所以應(yīng)用價(jià)值極大。細(xì)胞系鑒定目前主要基于國(guó)際身份認(rèn)證委員會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)。
翼和公司的近交系小鼠檢測(cè)方案1.0與2.0版本(1)基于PCR-LDR的近交系小鼠檢測(cè)方案1.0版本:該版本基于經(jīng)典的PCR-LDR方案,由東華大學(xué)、中科院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心、上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心多位專家聯(lián)合開(kāi)發(fā),并發(fā)表于《中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)》。上海翼和進(jìn)行二次開(kāi)發(fā)后,推出市場(chǎng),檢測(cè)位點(diǎn)48個(gè),分布于所有染色體上,能滿足小鼠遺傳背景基本需求。(2)基于多重PCR與二代測(cè)序的近交系小鼠檢測(cè)方案2.0版本:2017年,上海翼和公司在多重PCR技術(shù)開(kāi)發(fā)成熟的基礎(chǔ)上,針對(duì)近交系小鼠,設(shè)計(jì)了100多個(gè)位點(diǎn)的二代測(cè)序方案,并在Ion Proton與IlluminaX-10上分別對(duì)數(shù)百只小鼠成功鑒定。如何提供細(xì)胞系鑒定樣本?江蘇小鼠鑒定
本文購(gòu)自ATCC等機(jī)構(gòu)的細(xì)胞(如SW480,HCT116, FET細(xì)胞系等),均全部由上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司鑒定。南京小鼠細(xì)胞STR鑒定報(bào)告
這是一個(gè)比較悲慘、充滿黑色幽默的故事,其教訓(xùn)也是深刻的。在2001年,科學(xué)家在一篇論文里報(bào)道了一株新建立的大鼠(rat)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的細(xì)胞系(留個(gè)印象是大鼠來(lái)源的),命名為RGC-5。在隨后的十幾年時(shí)間里,至少230篇論文的研究與假設(shè)是建立在這株細(xì)胞系上。這株細(xì)胞系有很多好的地方,它是視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的細(xì)胞系,對(duì)于眼科學(xué)的研究有一株大鼠的永生細(xì)胞很重要。一批有名的科學(xué)家在此基礎(chǔ)上做出很多重大發(fā)現(xiàn),論文發(fā)表在諸如PNAS之類的雜志上,特別是與青光眼有關(guān)的領(lǐng)域(你如果是這個(gè)領(lǐng)域的,要當(dāng)心了)。南京小鼠細(xì)胞STR鑒定報(bào)告
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總部位于龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502,是一家第三方檢測(cè)服務(wù);生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù);健康衰老評(píng)估;大健康檢測(cè);遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù);生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測(cè)技術(shù)技術(shù)服務(wù);小鼠遺傳品系鑒定;轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定;細(xì)胞點(diǎn)突變檢測(cè);細(xì)胞端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性檢測(cè)。的公司。翼和生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)?,為客戶提供高品質(zhì)的細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)。翼和生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。翼和生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時(shí)代,對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翼和生物在行業(yè)的從容而自信。