高分辨率熔解(High-resolutionmelting,簡(jiǎn)稱HRM)分析是一門新興的技術(shù)。它通過(guò)PCR之后的熔解曲線分析,就能檢測(cè)PCR片段的微小序列差異,從而應(yīng)用在突變掃描、序列配對(duì)和基因分型等多個(gè)方面。憑借其速度和簡(jiǎn)便性,高分辨率熔解這種方法正在迅速普及。其實(shí)雙鏈DNA的熔解分析可追溯到上世紀(jì)六十年代,當(dāng)時(shí)是通過(guò)紫外吸收來(lái)監(jiān)測(cè)的。分析需要幾微克的DNA,而樣品以0.1-1.0°C/分鐘的速率緩慢加熱,常常要花上幾個(gè)小時(shí)才能完成。后來(lái),LightCycler定量PCR儀的出現(xiàn),讓熒光熔解分析變得流行。樣品量因毛細(xì)管而縮減至納克級(jí),且熔解速率更快,達(dá)0.1-1.0°C/秒,這樣熔解時(shí)間縮短至幾分鐘。當(dāng)時(shí)使用的染料是SYBR?GreenI。對(duì)于候選SNP的遴選,有很多種考慮,總的趨勢(shì)和出發(fā)點(diǎn)是能夠涵蓋的SNP越多越好。廣東STR/SSRSNP分型公司
我們利用多重PCR+二代測(cè)序技術(shù)為各專業(yè)用戶提供大規(guī)模的SNP分型,目標(biāo)區(qū)段的重測(cè)序,目標(biāo)區(qū)段甲基化測(cè)序。我們服務(wù)過(guò)的高質(zhì)量客戶包括:復(fù)旦大學(xué)金力院士團(tuán)隊(duì)、上海交通大學(xué)賀林院士團(tuán)隊(duì)和中科院韓斌院士團(tuán)隊(duì)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總公司(地址):上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502上海翼和專家團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價(jià)比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。南京微衛(wèi)星標(biāo)記strSNP分型送樣要求SNP應(yīng)該在群體中占一定的比例,比如至少是1%。
高通量二代測(cè)序法SNP基因分型——你有我有,你沒有我也有:上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司通過(guò)自主研發(fā)的高重PCR技術(shù),擴(kuò)增引物經(jīng)修飾及優(yōu)化,克服了傳統(tǒng)多重PCR擴(kuò)增效率不均一問題,95%以上擴(kuò)增子的測(cè)序深度在平均測(cè)序深度的0.2X范圍,保證測(cè)序通量的有效利用?;诔咧豍CR技術(shù)平臺(tái)的高通量二代SNP分型服務(wù),適用于多種遺傳學(xué)研究領(lǐng)域,如疾病與基因的關(guān)聯(lián)分析,臨床分子診斷研究,QTL定位及分子育種等大規(guī)模多位點(diǎn)大樣本的SNP分析。
LDR連接酶檢測(cè)法優(yōu)點(diǎn)是適用于任何多態(tài)性位點(diǎn),基于雜交反應(yīng)和連接反應(yīng),分型結(jié)果準(zhǔn)確,可進(jìn)行多重反應(yīng),性價(jià)比較高,且實(shí)驗(yàn)靈活。但是相比TaqMan和直接測(cè)序法的單一位點(diǎn)檢測(cè)而言,LDR法可以實(shí)現(xiàn)多位點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè),提高檢測(cè)通量,因此前期需要一定時(shí)間構(gòu)建多重分型方案。因此該方法非常適合相同分型方案,連續(xù)樣本的分型需求,提高實(shí)驗(yàn)通量的同時(shí)降低分型單價(jià)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總部在上海,2011年無(wú)錫成立分公司無(wú)錫翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司SNP等位基因頻率的容易估計(jì)。
隨著二代測(cè)序技術(shù)的普及,相比Sanger測(cè)序,二代測(cè)序雖然降低了測(cè)序讀長(zhǎng),但是極大增加的測(cè)序通量同時(shí)大幅降低測(cè)序成本。利用二代測(cè)序進(jìn)行SNP分型,不僅測(cè)序讀長(zhǎng)滿足分型需求,并且可以同時(shí)對(duì)數(shù)十?dāng)?shù)百個(gè)位點(diǎn),上千樣本進(jìn)行分型。二代測(cè)序結(jié)果判斷準(zhǔn)確直觀,相比RFLP,Taqman,LDR等方法都通過(guò)間接結(jié)果來(lái)進(jìn)行分型結(jié)果的判定,直接測(cè)序或二代測(cè)序法分型能都直接看到位點(diǎn)具體序列情況,SNP位點(diǎn)判斷更加直觀。上海翼和專家團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價(jià)比高、可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。對(duì)于PCR產(chǎn)物模板可通過(guò)多重PCR反應(yīng)體系來(lái)獲得。北京SSRSNP分型公司
傳統(tǒng)的RFLP只能檢測(cè)到SNP的一部分,測(cè)序技術(shù)既費(fèi)時(shí)費(fèi)力。廣東STR/SSRSNP分型公司
相比Taqman熒光探針法,KASP技術(shù)只要合成兩個(gè)通用熒光探針,兩個(gè)通用淬滅探針,通用熒光探針來(lái)代替針對(duì)位點(diǎn)的熒光探針,極大節(jié)約成本。同時(shí)配套SNPline基因分型儀器平臺(tái),可以進(jìn)行高通量的SNP分型規(guī)模。該方法利用多重PCR技術(shù),同時(shí)捕獲數(shù)十上百個(gè)SNP位點(diǎn),Barcode引物區(qū)分不同樣本,實(shí)現(xiàn)一次上機(jī)測(cè)序,完成多位點(diǎn),大樣本的高通量分型實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。多重PCR特性,也極大降低了對(duì)樣本量的需求。上海翼和專家團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價(jià)比高、可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。廣東STR/SSRSNP分型公司
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家服務(wù)型公司。公司業(yè)務(wù)分為細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造醫(yī)藥健康良好品牌。翼和生物憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來(lái)的聲譽(yù)和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。