小師弟：如何根據(jù)細(xì)胞STR鑒定結(jié)果判斷細(xì)胞系是否發(fā)生了交叉污染？如果存在細(xì)胞系之間發(fā)生交叉污染，而且鑒定用的細(xì)胞可能有兩種以上的細(xì)胞系時(shí)，那么在進(jìn)行STR位點(diǎn)檢測的時(shí)候，多個(gè)位點(diǎn)會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)以上的峰。峰高值表示該等位基因的信號(hào)強(qiáng)度，理論上峰值與樣本的DNA濃度有直接的關(guān)系。因此，存在交叉污染的混合細(xì)胞系中，其中一個(gè)位點(diǎn)中某些峰會(huì)明顯高于其他的峰，其中大峰是屬于混合細(xì)胞系中那個(gè)主要細(xì)胞系，而小峰則屬于那個(gè)次要細(xì)胞系。為什么要進(jìn)行細(xì)胞系鑒定？蘇州小鼠鑒定21位點(diǎn)
細(xì)胞系錯(cuò)誤鑒定問題已有50年歷史，基于國際細(xì)胞庫的分析數(shù)據(jù)顯示：1984年細(xì)胞錯(cuò)誤鑒定率為35%，1999年為18%，直到近幾年，應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的細(xì)胞系需要鑒定的問題仍然很少有人關(guān)注。近年來，大量研究表明 STR 基因分型 方法是進(jìn)行細(xì)胞交叉污染和性質(zhì)鑒定的比較有效和準(zhǔn)確的方法之一，STR基因分型應(yīng)用于細(xì)胞鑒定已被ATCC等機(jī)構(gòu)強(qiáng)烈推薦。美國的ATCC 細(xì)胞庫、德國的DSMZ細(xì)胞庫以及日本的JCRB細(xì)胞庫等為STR 分型提供了各細(xì)胞株的數(shù)據(jù)供比對。上海小鼠鑒定上海翼和生物幫助作者對多株細(xì)胞系進(jìn)行了STR鑒定。
上海翼和公司利用熒光PCR擴(kuò)增小鼠基因組中9個(gè)STR基因位點(diǎn)，PCR產(chǎn)物在毛細(xì)管電泳分離之后可通過熒光檢測進(jìn)行基因分型。根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與細(xì)胞STR數(shù)據(jù)庫（EXPASY）比對，從而鑒定樣品所屬的小鼠細(xì)胞系。2017年4月，翼和客戶山東泰山醫(yī)學(xué)院免疫所發(fā)表了EBioMedicine上的一篇論文，該文中編輯要求對突變小鼠的遺傳背景進(jìn)行鑒定，翼和公司應(yīng)用基于多重PCR與二代測序的近交系小鼠檢測方案2.0版本方案，成功的對基因編輯小鼠進(jìn)行了測試，并對小鼠遺傳背景進(jìn)行了STR鑒定，雜志編輯成功接受。
熱烈祝賀上海翼和生物客戶第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院內(nèi)分泌科發(fā)表文章“NRF2 activation by antioxidant antidiabetic agents accelerates tumor metastasis ”于Science Translational Medicine雜志，影響因子16.3，其中上海翼和生物為研究中所涉及到的細(xì)胞系提供了細(xì)胞STR鑒定服務(wù)。恭賀上海翼和生物客戶趙永良研究員課題組在Cancer Research雜志（IF=8.5）發(fā)表研究論文。熱烈祝賀上海翼和生物客戶中科院北京基因組研究所趙永良研究員課題組默董亮博士發(fā)表文章“Human helicase RECQL4 drives cisplatin resistance in gastric cancer by activating an AKT-YB1-MDR1 signaling pathway”于Cancer Research雜志，影響因子8.556，其中上海翼和生物為研究中所涉及到的多株細(xì)胞系提供了細(xì)胞STR鑒定服務(wù)。無論是小鼠、大鼠、人我們都能區(qū)分。關(guān)鍵價(jià)格超便宜，為您第1時(shí)間鑒定細(xì)胞來源。
細(xì)胞STR鑒定——給你的細(xì)胞一個(gè)“明明白白的”身份，正如人類個(gè)體有指紋識(shí)別一樣，每種細(xì)胞系也有它獨(dú)特的“指紋”:STR。STR，全稱Short tandem repeat ,中文名“短串聯(lián)重復(fù)序列”，是一類普遍存在于真核生物基因組中的DNA串聯(lián)重復(fù)序列。由于不同個(gè)體來源的細(xì)胞在不同STR位點(diǎn)具有特異性的重復(fù)次數(shù)，因而使得不同細(xì)胞具有其特征性的圖譜，根據(jù)圖譜的數(shù)據(jù)可以判定細(xì)胞是否為單一細(xì)胞。近年來，大量研究表明STR基因分型方法是進(jìn)行細(xì)胞交叉污染和性質(zhì)鑒定的有效和準(zhǔn)確的方法之一，目前，此方法已被ICLAC、ATCC等機(jī)構(gòu)作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞鑒定。什么是細(xì)胞系STR鑒定？鄭州STR鑒定21位點(diǎn)
上海翼和生物是ATCC標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)成員，在國內(nèi)率先推出了細(xì)胞STRS分析服務(wù)并與多家細(xì)胞中心建立長期合作關(guān)系。蘇州小鼠鑒定21位點(diǎn)
翼和采用PCR 檢測法，含有化學(xué)修飾熱啟動(dòng)酶的 2×PCR mix，配以 dUTP 和UDG 酶，可很大程度降低非特異擴(kuò)增和引物二聚體的形成，有效防止 PCR 產(chǎn)物的交叉污染。對細(xì)胞培養(yǎng)樣本內(nèi)支原體16S rRNA 基因高度保守區(qū)域特異性片段進(jìn)行擴(kuò)增檢測，與含有支原體的陽性標(biāo)準(zhǔn)品和不含有支原體的陰性標(biāo)準(zhǔn)品比對，鑒定支原體污染的現(xiàn)象，能夠檢測包含M.fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M.pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae,M. pirum, M. capricolum, Acholeplasma, Spiroplasma等60多種支原體。蘇州小鼠鑒定21位點(diǎn)
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司擁有第三方檢測服務(wù)；生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)；健康衰老評估；大健康檢測；遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)；生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測技術(shù)技術(shù)服務(wù)；小鼠遺傳品系鑒定；轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定；細(xì)胞點(diǎn)突變檢測；細(xì)胞端粒長度和端粒酶活性檢測。等多項(xiàng)業(yè)務(wù)，主營業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測，生物技術(shù)服務(wù)。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ)，是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力。公司以誠信為本，業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測，生物技術(shù)服務(wù)，我們本著對客戶負(fù)責(zé)，對員工負(fù)責(zé)，更是對公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度，爭取做到讓每位客戶滿意。一直以來公司堅(jiān)持以客戶為中心、細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測，生物技術(shù)服務(wù)市場為導(dǎo)向，重信譽(yù)，保質(zhì)量，想客戶之所想，急用戶之所急，全力以赴滿足客戶的一切需要。