小師弟:如何根據(jù)STR數(shù)據(jù)判斷細(xì)胞系的身份?收到細(xì)胞系鑒定結(jié)果以及STR信息,可以與參考數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對。如果細(xì)胞樣本的每個STR位點和參考細(xì)胞STR位點都能重合匹配,即說明該細(xì)胞系正確,反之則說明你的細(xì)胞系可能被錯誤標(biāo)記,交叉污染或發(fā)生遺傳不穩(wěn)定。一般說來,匹配度≥80%即可認(rèn)為該細(xì)胞系正確,匹配度<80%則說明該細(xì)胞系的來源需要被懷疑。如果細(xì)胞系被鑒定出發(fā)生交叉污染或錯誤標(biāo)記,則需要拿更早代數(shù)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定,從而找到問題的起源或者直接從可靠的機(jī)構(gòu)購買一株新的細(xì)胞系。翼和生物人源細(xì)胞鑒定包含哪些結(jié)果?浙江小鼠STR鑒定分析
上海翼和公司為客戶提供基于qPCR技術(shù)的種系鑒定方案,選擇人、小鼠、大鼠和倉鼠基因組中特異基因片段,設(shè)計引物和熒光探針,快速鑒定種系來源。該方案靈敏度和特異性高,可以檢測樣本中不同種系來源的細(xì)胞污染,當(dāng)污染細(xì)胞占比> 5% 時,可被穩(wěn)定檢出。在PCR反應(yīng)中,除了正向引物和反向引物外,還引入了第三個寡核苷酸序列,這是一個重大的進(jìn)展。這個額外的序列,就是探針(Probe),它彌補了DNA結(jié)合染料的缺點。探針上有熒光修飾基團(tuán),可產(chǎn)生熒光信號。江蘇細(xì)胞鑒定標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系用錯的概率有多大?
值得注意的是,當(dāng)發(fā)生兩個或以上細(xì)胞混合的時候,檢測結(jié)果看起來非常像細(xì)胞系的“遺傳不穩(wěn)定”——當(dāng)一個細(xì)胞系存在亞群時,尤其是一些*細(xì)胞系,由于遺傳不穩(wěn)定的存在,在一些位點的STR特性會不同。因此經(jīng)驗豐富的分子專家是非常重要的,他能夠幫助分析復(fù)雜的電泳圖譜(STR峰圖),從而判斷是否由于發(fā)生細(xì)胞系交叉污染而導(dǎo)致多等位基因情況。上海翼和應(yīng)用生物,作為老牌的遺傳技術(shù)服務(wù)公司,十年以上基因分型經(jīng)驗,可以幫你解決你的疑惑。
翼和送樣要求有以下幾點: 1.細(xì)胞上清:在無抗生su及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng)3天,取1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至2ml離心管中,請加冰袋運輸。2.細(xì)胞沉淀:在無抗生su及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng)3天,取1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至2ml 離心管中。將上清液移入無菌離心管以15,000-20,000g 速度離心10 分鐘,移除上清液,保留離心沉淀物(若貼壁細(xì)胞,使用細(xì)胞刮刮取細(xì)胞,吸取轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管,12000rpm離心沉淀細(xì)胞),請加冰袋運輸。翼和生物細(xì)胞鑒定搭檔好禮,送!送!送!
什么時候需細(xì)胞系鑒定?(1)當(dāng)建立或獲得一個新的細(xì)胞系時(2)一個涉及到細(xì)胞試驗項目開始/結(jié)束時(3)在細(xì)胞凍存之前,或細(xì)胞已連續(xù)培養(yǎng)2~3個月時(4)發(fā)表文章或申請課題經(jīng)費前(5)細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大時(6)當(dāng)實驗室使用超過一種細(xì)胞系時,所有細(xì)胞系比較好先鑒定以排除交叉污染的可能。如何提供鑒定樣本?每種細(xì)胞需單獨收集在1.5ml離心管中,細(xì)胞數(shù)目不少于 106個。細(xì)胞需要離心沉淀,并且以PBS清洗盡可能去除上清培養(yǎng)基,沉淀沉淀進(jìn)行冰凍保存與寄送。上海翼和生物是上海市遺傳學(xué)會理事單位、翼和專家是ATCC國際細(xì)胞系認(rèn)證委員會成員。上海細(xì)胞鑒定周期
翼和資質(zhì):上海市遺傳學(xué)會理事單位、國際細(xì)胞系認(rèn)證委員會成員。浙江小鼠STR鑒定分析
STR(Short Tandem Repeat,短串聯(lián)重復(fù)序列)基因位點由長度為3~7個堿基對的短串連重復(fù)序列組成,這些重復(fù)序列普遍存在于人類基因組中,可作為高度多態(tài)性標(biāo)記,被稱為細(xì)胞的DNA指紋。STR已被普遍應(yīng)用于親子鑒定、個體識別、司法鑒定、交通事故鑒定、(造血干細(xì)胞)移植醫(yī)治后嵌合情況監(jiān)測等領(lǐng)域。STR基因座位上的等位基因可通過PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴(kuò)增區(qū)域內(nèi)重復(fù)序列的拷貝數(shù)的不同來區(qū)分,在毛細(xì)管電泳分離之后可通過熒光檢測來識別,隨后通過一定的計算方法,即可根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與專業(yè)的細(xì)胞STR數(shù)據(jù)庫比對從而推算出樣品所屬的細(xì)胞系或可能的交叉污染的細(xì)胞系名稱。浙江小鼠STR鑒定分析
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司擁有第三方檢測服務(wù);生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù);健康衰老評估;大健康檢測;遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù);生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測技術(shù)技術(shù)服務(wù);小鼠遺傳品系鑒定;轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定;細(xì)胞點突變檢測;細(xì)胞端粒長度和端粒酶活性檢測。等多項業(yè)務(wù),主營業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊,是實現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。公司以誠信為本,業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù),我們本著對客戶負(fù)責(zé),對員工負(fù)責(zé),更是對公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度,爭取做到讓每位客戶滿意。一直以來公司堅持以客戶為中心、細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)市場為導(dǎo)向,重信譽,保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。