翼和采用PCR 檢測法,含有化學(xué)修飾熱啟動酶的 2×PCR mix,配以 dUTP 和UDG 酶,可很大程度降低非特異擴增和引物二聚體的形成,有效防止 PCR 產(chǎn)物的交叉污染。對細胞培養(yǎng)樣本內(nèi)支原體16S rRNA 基因高度保守區(qū)域特異性片段進行擴增檢測,與含有支原體的陽性標準品和不含有支原體的陰性標準品比對,鑒定支原體污染的現(xiàn)象,能夠檢測包含M.fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M.pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae,M. pirum, M. capricolum, Acholeplasma, Spiroplasma等60多種支原體。這有力地說明了翼和細胞STR鑒定結(jié)果是得到國際前列期刊認可的!廣州小鼠鑒定位點
什么是細胞系鑒定?所謂細胞系鑒定即通過STR(短串聯(lián)重復(fù))圖譜所建立細胞系的遺傳特征。一株細胞系的遺傳特征確立后,細胞系可以通過定期的檢測,以防止出現(xiàn)細胞系被誤認或交叉污染的情況。為什么要進行細胞系鑒定?由于細胞系發(fā)生交叉污染或身份誤認,將導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)的無效或數(shù)據(jù)誤導(dǎo)。NIH已發(fā)出公告,討論細胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來越多的的期刊要求文章發(fā)表前、需提供細胞鑒定數(shù)據(jù)。細胞系用錯的概率有多大?據(jù)ATCC估計,1977年錯誤使用細胞的概率是16%,1999年是18%。根據(jù)我們的經(jīng)驗,國內(nèi)細胞系用錯的概率不低于20%。即如果一個研究所有二十個課題組,按概率估計,有4個課題組用的細胞是錯的。廣州小鼠鑒定位點上海翼和生物是ATCC標準委員會成員,在國內(nèi)率先推出了細胞STRS分析服務(wù)并與多家細胞中心建立長期合作關(guān)系。
細胞STR鑒定的特點如下:STR 圖譜鑒別通過標準化的操作,采用自動化的DNA分析儀對PCR產(chǎn)物進行精確的分析,并以簡單的數(shù)字描述STR序列重復(fù)次數(shù),不僅增加了結(jié)果的客觀性,而且所需細胞數(shù)量少(只需1×10^3個細胞),而細胞鑒定中常規(guī)采用的同工酶法通常需要5×10^6個細胞,結(jié)果還沒那么穩(wěn)定,特異性也不強??偟膩碚f,STR法分型快速、經(jīng)濟、易于自動化,可重復(fù)性好,且數(shù)據(jù)格式適合建立一個標準參考數(shù)據(jù)庫的特點,所以應(yīng)用價值極大。
翼和為您普及小知識點:作者分別從國內(nèi)28個研究機構(gòu)搜集了278株常見人源腫liu細胞系,其中國內(nèi)建立的細胞系71株,國外建立的細胞系207株。經(jīng)STR鑒定后發(fā)現(xiàn),來自于22個研究機構(gòu)的128株細胞存在交叉污染/錯誤鑒定的情況,錯誤率高達46%。其中國內(nèi)建立的細胞系占52株,這表明了什么,國內(nèi)建立的細胞系交叉污染/錯誤鑒定率竟然高達73.2%,并且67.3%(35/52)國內(nèi)交叉污染/錯誤鑒定的細胞系結(jié)果被證實是Hela細胞或被Hela細胞部分污染的!由于細胞系發(fā)生交叉污染或身份誤認,將導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)的無效或數(shù)據(jù)誤導(dǎo)。
有名的Hela細胞,源自一名美國黑人婦女的子宮頸細胞。這位理應(yīng)在生物學(xué)史上占據(jù)一定地位的女性,名叫Henrietta Lacks,死于子宮頸*。自1951年至今,Hela細胞已被培養(yǎng)了60多年,分裂了近2萬次,仍然無停止跡象,是為不死的傳說,參見一本書《永生的海拉》。Hela為什么可以永生,據(jù)說其基因組插入了人類HPV18,成了HPV細胞,這些可惡的HPV細胞不僅在我們?nèi)梭w里不停的分裂繁殖,直到我們逝去,在分離細胞系里仍可以不斷的分裂,一般細胞分裂后端粒會老化變短,直至細胞系終結(jié)。Hella細胞似乎在每次分裂時,端粒酶活性很高,可以復(fù)制出新的端粒,以維持端粒長度,避開所謂的“海佛烈克極限”(Hayflick limit)(正常的細胞系,分裂極限在52次左右)。很專業(yè)的細胞STR鑒定哪里找?天津細胞STR鑒定送樣要求
如何進行細胞系鑒定?廣州小鼠鑒定位點
上海翼和公司利用熒光PCR擴增小鼠基因組中9個STR基因位點,PCR產(chǎn)物在毛細管電泳分離之后可通過熒光檢測進行基因分型。根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與細胞STR數(shù)據(jù)庫(EXPASY)比對,從而鑒定樣品所屬的小鼠細胞系。2017年4月,翼和客戶山東泰山醫(yī)學(xué)院免疫所發(fā)表了EBioMedicine上的一篇論文,該文中編輯要求對突變小鼠的遺傳背景進行鑒定,翼和公司應(yīng)用基于多重PCR與二代測序的近交系小鼠檢測方案2.0版本方案,成功的對基因編輯小鼠進行了測試,并對小鼠遺傳背景進行了STR鑒定,雜志編輯成功接受。廣州小鼠鑒定位點
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司位于龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號502。翼和生物致力于為客戶提供良好的細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù),一切以用戶需求為中心,深受廣大客戶的歡迎。公司從事醫(yī)藥健康多年,有著創(chuàng)新的設(shè)計、強大的技術(shù),還有一批獨立的專業(yè)化的隊伍,確保為客戶提供良好的產(chǎn)品及服務(wù)。翼和生物憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來的聲譽和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。