高分辨率熔解（High-resolutionmelting，簡稱HRM）分析是一門新興的技術(shù)。它通過PCR之后的熔解曲線分析，就能檢測PCR片段的微小序列差異，從而應(yīng)用在突變掃描、序列配對和基因分型等多個(gè)方面。憑借其速度和簡便性，高分辨率熔解這種方法正在迅速普及。其實(shí)雙鏈DNA的熔解分析可追溯到上世紀(jì)六十年代，當(dāng)時(shí)是通過紫外吸收來監(jiān)測的。分析需要幾微克的DNA，而樣品以0.1-1.0°C/分鐘的速率緩慢加熱，常常要花上幾個(gè)小時(shí)才能完成。后來，LightCycler定量PCR儀的出現(xiàn)，讓熒光熔解分析變得流行。樣品量因毛細(xì)管而縮減至納克級，且熔解速率更快，達(dá)0.1-1.0°C/秒，這樣熔解時(shí)間縮短至幾分鐘。當(dāng)時(shí)使用的染料是SYBR?GreenI。SNP在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域發(fā)揮著巨大作用。安徽微衛(wèi)星SSRSNP分型準(zhǔn)確度高
3.HRM法高分辨率熔解曲線分析（HRM）是近幾年興起的SNP研究工具，它通過實(shí)時(shí)監(jiān)測升溫過程中雙鏈DNA熒光染料與PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的結(jié)合情況，來判斷是否存在SNP，而且不同SNP位點(diǎn)、是否是雜合子等都會影響熔解曲線的峰形，因此HRM分析能夠有效區(qū)分不同SNP位點(diǎn)與不同基因型。這種檢測方法不受突變堿基位點(diǎn)與類型的局限，無需序列特異性探針，在PCR結(jié)束后直接運(yùn)行高分辨率熔解，即可完成對樣品基因型的分析。該方法無需設(shè)計(jì)探針，操作簡便、快速，成本低，結(jié)果準(zhǔn)確，并且實(shí)現(xiàn)了真正的閉管操作。北京STR基因SNP分型外包服務(wù)對于SNP 研究，我個(gè)人的感覺是：曾經(jīng)非常的“熱”過，而現(xiàn)在，似乎有些降溫。
相信大家都聽過或已經(jīng)接觸過一些常用的分型方法，如片段長度多態(tài)性（限制性內(nèi)切酶）法，直接測序法，Taqman熒光探針法，LDR連接酶檢測反應(yīng)法，競爭性等位基因特異性PCR法（KASP），二代測序法等，小E就針對以上幾種常用分型方法為大家做一個(gè)介紹和總結(jié)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限上海翼和專家團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神，朝氣蓬勃，在肖君華博士的帶領(lǐng)下，秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神，為科研用戶提供性價(jià)比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。
我們利用多重PCR+二代測序技術(shù)為各專業(yè)用戶提供大規(guī)模的SNP分型，目標(biāo)區(qū)段的重測序，目標(biāo)區(qū)段甲基化測序。我們服務(wù)過的高質(zhì)量客戶包括：復(fù)旦大學(xué)金力院士團(tuán)隊(duì)、上海交通大學(xué)賀林院士團(tuán)隊(duì)和中科院韓斌院士團(tuán)隊(duì)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總公司（地址）：上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號502上海翼和專家團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神，朝氣蓬勃，在肖君華博士的帶領(lǐng)下，秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神，為科研用戶提供性價(jià)比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。對于候選SNP的遴選，有很多種考慮，總的趨勢和出發(fā)點(diǎn)是能夠涵蓋的SNP越多越好。
這種熔解分析只能區(qū)分在片段大小和GC含量上差別較比較明顯的DNA序列，比如檢查PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中是否存在引物二聚體及其他非特異性的擴(kuò)增。如果要區(qū)分SNP，分辨率還不夠。為什么呢？這里有必要先介紹一下飽和染料和非飽和染料。SYBRGreenI就屬于非飽和性染料，由于它對PCR的抑制作用，在實(shí)驗(yàn)中的使用濃度很低，遠(yuǎn)未將DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中的小溝飽和。這樣，DNA雙鏈高溫變性時(shí)，單鏈部分的熒光染料分子發(fā)生重排，熒光染料分子重新結(jié)合到雙鏈DNA的空置位點(diǎn)，造成熒光信號沒有變化，因此出現(xiàn)假陰性，特異性下降。由于SNP的二態(tài)性，非此即彼，在基因組篩選中SNPs往往只需+/-的分析這就利于發(fā)展自動化技術(shù)篩選或檢測SNPs.廣東微衛(wèi)星標(biāo)記SNP分型質(zhì)量好
只是偶是做tumour的，所以提Cancer Research提得比較多。安徽微衛(wèi)星SSRSNP分型準(zhǔn)確度高
《CandidateGenePolymorphismsandtheirAssociationwithGlycogenContentinthePacificOysterCrassostreagigas》本文作者在野生群體中進(jìn)行了候選基因關(guān)聯(lián)分析，選擇90個(gè)候選基因以及295個(gè)SNP位點(diǎn)，并且結(jié)合目標(biāo)基因捕獲測序分型732個(gè)SNP位點(diǎn)。發(fā)現(xiàn)Cg_GD1基因(glycogendebranchingenzyme)中的兩個(gè)SNP位點(diǎn)(Cg_SNP_TY202andCg_SNP_3021)inCg_GD1(glycogendebranchingenzyme)和Cg_GP1基因(glycogenphosphorylase)中的一個(gè)SNP位點(diǎn)(Cg_SNP_4)與糖原含量相關(guān)，基因表達(dá)量分析顯示這兩個(gè)基因在高糖原與低糖原中的表達(dá)量也有比較明顯差異。安徽微衛(wèi)星SSRSNP分型準(zhǔn)確度高
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè)，技術(shù)力量雄厚。翼和生物是一家私營有限責(zé)任公司企業(yè)，一直“以人為本，服務(wù)于社會”的經(jīng)營理念;“誠守信譽(yù)，持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測，生物技術(shù)服務(wù)，價(jià)格合理，品質(zhì)有保證，深受廣大客戶的歡迎。翼和生物將以真誠的服務(wù)、創(chuàng)新的理念、高品質(zhì)的產(chǎn)品，為彼此贏得全新的未來！