在過去的的幾十年間,在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,文章一直在發(fā)表,科研成果一直在公布,但是當(dāng)中哺乳動物細(xì)胞被錯誤鑒定,存在交叉污染的情況也同時存在著。2010年有雜志(IJC)統(tǒng)計出一列表,在346篇文章中,有 103篇存在細(xì)胞被Hela細(xì)胞污染的情況。當(dāng)然還有,在2001年,科學(xué)家在一篇論文里報道了一株新建立的大鼠(rat)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的細(xì)胞系(留個印象是大鼠來源的),命名為RGC-5。在隨后的十幾年時間里,至少230篇論文的研究與假設(shè)是建立在這株細(xì)胞系上。結(jié)果在2009年,序列測定結(jié)果表明,RGC-5是一株小鼠(mouse)細(xì)胞。隨著越來也多細(xì)胞被污染的問題出現(xiàn),大家也開始意識到細(xì)胞污染的嚴(yán)重性,2007年,NIH強烈建議在使用細(xì)胞時進(jìn)行鑒定。目前STR基因分型方法被認(rèn)為是檢測細(xì)胞交叉污染和性質(zhì)鑒定極為有效以及準(zhǔn)確的方法,多個細(xì)胞庫分別提供了各種細(xì)胞株的STR基因分析數(shù)據(jù)以供參考比對。細(xì)胞鑒定哪家強,上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司。本公司比較多可提供20余對STR引物,對細(xì)胞進(jìn)行鑒定。成都細(xì)胞鑒定21位點
什么時候需細(xì)胞系鑒定?(1)當(dāng)建立或獲得一個新的細(xì)胞系時(2)一個涉及到細(xì)胞試驗項目開始/結(jié)束時(3)在細(xì)胞凍存之前,或細(xì)胞已連續(xù)培養(yǎng)2~3個月時(4)發(fā)表文章或申請課題經(jīng)費前(5)細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大時(6)當(dāng)實驗室使用超過一種細(xì)胞系時,所有細(xì)胞系比較好先鑒定以排除交叉污染的可能。如何提供鑒定樣本?每種細(xì)胞需單獨收集在1.5ml離心管中,細(xì)胞數(shù)目不少于 106個。細(xì)胞需要離心沉淀,并且以PBS清洗盡可能去除上清培養(yǎng)基,沉淀沉淀進(jìn)行冰凍保存與寄送。天津鑒定分析翼和生物細(xì)胞鑒定技術(shù)又助力一篇高的分?jǐn)?shù)論文。
短串聯(lián)重復(fù)(Short tandem repeats, STR),又稱微衛(wèi)星DNA(Microsatellite DNA)或簡單重復(fù)序列(Simple repeat sequence, SRS或SSR),是普遍存在于原核生物和真核生物基因組中的核苷酸重復(fù)序列。有絲分裂過程中DNA鏈之間的錯配引起的復(fù)制滑動被認(rèn)為是導(dǎo)致STR產(chǎn)生的較為常見原因,并且依據(jù)不同復(fù)制單元大小的不同以及不同物種之間,復(fù)制滑動發(fā)生的概率也不相同。STR已被廣泛應(yīng)用于親子鑒定、個體識別、司法鑒定、交通事故鑒定、(造血干細(xì)胞)移植醫(yī)治后嵌合情況監(jiān)測等領(lǐng)域。
翼和公司的近交系小鼠檢測方案1.0與2.0版本(1)基于PCR-LDR的近交系小鼠檢測方案1.0版本:該版本基于經(jīng)典的PCR-LDR方案,由東華大學(xué)、中科院實驗動物中心、上海實驗動物研究中心多位**聯(lián)合開發(fā),并發(fā)表于《中國實驗動物學(xué)報》。上海翼和進(jìn)行二次開發(fā)后,推出市場,檢測位點48個,分布于所有染色體上,能滿足小鼠遺傳背景基本需求。(2)基于多重PCR與二代測序的近交系小鼠檢測方案2.0版本:2017年,上海翼和公司在多重PCR技術(shù)開發(fā)成熟的基礎(chǔ)上,針對近交系小鼠,設(shè)計了100多個位點的二代測序方案,并在Ion Proton與IlluminaX-10上分別對數(shù)百只小鼠成功鑒定。中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫檢查出錯誤鑒定和交叉污染的細(xì)胞結(jié)果。
翼和采用PCR 檢測法,含有化學(xué)修飾熱啟動酶的 2×PCR mix,配以 dUTP 和UDG 酶,可很大程度降低非特異擴增和引物二聚體的形成,有效防止 PCR 產(chǎn)物的交叉污染。對細(xì)胞培養(yǎng)樣本內(nèi)支原體16S rRNA 基因高度保守區(qū)域特異性片段進(jìn)行擴增檢測,與含有支原體的陽性標(biāo)準(zhǔn)品和不含有支原體的陰性標(biāo)準(zhǔn)品比對,鑒定支原體污染的現(xiàn)象,能夠檢測包含M.fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M.pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae,M. pirum, M. capricolum, Acholeplasma, Spiroplasma等60多種支原體。很專業(yè)的細(xì)胞STR鑒定哪里找?南京細(xì)胞STR鑒定標(biāo)準(zhǔn)
收到細(xì)胞系鑒定結(jié)果以及STR信息,可以與參考數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對。成都細(xì)胞鑒定21位點
翼和為您普及小知識點:作者分別從國內(nèi)28個研究機構(gòu)搜集了278株常見人源**細(xì)胞系,其中國內(nèi)建立的細(xì)胞系71株,國外建立的細(xì)胞系207株。經(jīng)STR鑒定后發(fā)現(xiàn),來自于22個研究機構(gòu)的128株細(xì)胞存在交叉污染/錯誤鑒定的情況,錯誤率高達(dá)46%。其中國內(nèi)建立的細(xì)胞系占52株,這表明了什么,國內(nèi)建立的細(xì)胞系交叉污染/錯誤鑒定率竟然高達(dá)73.2%,并且67.3%(35/52)國內(nèi)交叉污染/錯誤鑒定的細(xì)胞系結(jié)果被證實是Hela細(xì)胞或被Hela細(xì)胞部分污染的!成都細(xì)胞鑒定21位點
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司位于龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號502。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)等,價格合理,品質(zhì)有保證。公司將不斷增強企業(yè)重點競爭力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識,遵守行業(yè)規(guī)范,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。翼和生物秉承“客戶為尊、服務(wù)為榮、創(chuàng)意為先、技術(shù)為實”的經(jīng)營理念,全力打造公司的重點競爭力。