抗體稀釋參考一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL，二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL注意事項 1.為獲得比較好效果,在孵育步驟請使用搖床;  2.將Tween20(終濃度0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號;  3.不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑,疊氨鈉是HRP的***物;  4.避免手與膜直接接觸,實驗過程應戴手套或使用干凈的鑷子;  5.所有設備必須清潔且不沾染外來物質(zhì),金屬器械(如剪刀)不得具有可見的銹跡,銹跡可能導致斑點形成和高背景。CCK-8溶液可直接加入到細胞中，不需要與其它組分預混，操作方便，檢測準確。長沙cck8檢測細胞增殖凋亡
RIPA細胞裂解液
產(chǎn)品詳情：
RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一，其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS，該緩沖液能夠從細胞質(zhì)，膜和**白質(zhì)中提取蛋白質(zhì)，并且與許 多應用相容，包括蛋白質(zhì)分析，和蛋白質(zhì)純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶，如果需要，可將酶添加到試劑中以防止蛋白質(zhì)水解并維持蛋白質(zhì) 的磷酸化狀態(tài)。一些蛋白激酶和其他酶可能對RIPA緩沖液的組分敏感，導致其活性降低。 在這種情況下，準備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。
注意事項：
1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
2.裂解得到的蛋白樣品，含有較高濃度的去垢劑，不建議用Bradford 法測定蛋白濃度，可以選用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。
3.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗；如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如NFKB、p53等時，通常不必進行超聲處理，就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。 北京成纖維細胞增殖檢測CCK-8的英文全稱是Cell Counting Kit-8，也就是進行細胞計數(shù)的一個盒子。
1.產(chǎn)品簡介
微管蛋白是有絲分裂器、纖毛、鞭毛和細胞骨架的組成部分，主要由2種可溶性蛋白組成，α-tubulin和β-tubulin，分子量均約為55 kDa。β-tubulin抗體可作為Western Blot中的內(nèi)參對照。但要注意的是，β-tubulin在某些細胞中的表達可能也不穩(wěn)定。例如在脂肪組織中β-tubulin的表達量非常低，因此對于這些組織就不能用β-tubulin作為內(nèi)參對照。
2.產(chǎn)品特點
?性價比高，多種稀釋比例推薦：
WB： 1：1000 - 1：10000
IF： 1：200 - 1：1000
IHC： 1：200 - 1：1000
?常備現(xiàn)貨
3.結(jié)果示例
β-tubulin小鼠單抗(3G7)經(jīng)1：5000(泳道1)、1：10000(泳道2)、1：20000(泳道3)
和1：40000 (泳道4)梯度稀釋，對Hela細胞裂解物進行Western Blot分析。
β-tubulin小鼠單抗(3G7)對人宮頸*(左)和前列腺病(右)患者的扁平細胞病變進行免疫組化染色。
Cell Counting Kit-8(cck8)細胞增值與毒性檢測試劑盒是一種基于水溶性四唑鹽的細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒。它在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為可溶性的橙黃色甲臜(formazan)。甲臜的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。細胞增殖越快、細胞毒性越小、細胞數(shù)量越多，則顏色越深，顏色的深淺與細胞數(shù)量呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。該產(chǎn)品細胞毒性小，對后續(xù)實驗沒有影響，與MTT，XTT，MTS和WST-1相比，此法檢測靈敏度更高，線性范圍更寬，適用于***篩選，細胞增殖測定，細胞毒性測定和**藥敏實驗。 CCK-8是非放射性的，允許敏感的比色分析來測定細胞增殖和細胞毒性分析中的活細胞數(shù)量。
比MTT、MTS或WST-1更敏感對細胞無毒性簡單步驟(無需解凍) ，操作更安全。 細胞增殖是生命的重要特征，細胞以分裂的方式進行增殖。
t細胞增殖試驗又稱T細胞轉(zhuǎn)化試驗。T細胞在體外經(jīng)某種物質(zhì)刺激，細胞代謝和形態(tài)相繼變化，在24~48h細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的合成增加，產(chǎn)生一系列增殖的變化，如細胞變化、細胞漿擴大、出現(xiàn)空泡、核仁明顯、核染色質(zhì)疏松等，由淋巴細胞轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨湍讣毎Ｒ虼?，這種淋巴細胞增殖又叫淋巴細胞轉(zhuǎn)化。據(jù)此可判斷出淋巴細胞對有關(guān)刺激的反應性與功能狀態(tài)。 (1) 非抗原性刺激物：如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陸(PWM)、脂多糖(LPS)，通稱促有絲分裂原。其中LPS刺激B細胞，PWM可刺激T和B細胞，PHA和ConA刺激T細胞增殖。 (2) 抗原性刺激物：如結(jié)核菌素、葡萄球菌*、破傷風類、鏈球菌激酶、抗原、同種異型抗原等。CCK法的檢測靈敏度很高，甚至可以測定較低細胞密度.廣州tnk細胞增殖凋亡
CCK-8不能用于細胞染色。長沙cck8檢測細胞增殖凋亡
并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉***影響。當然***影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。三、CCK8檢測細胞增殖/毒性的注意事項當使用標準96孔板時，貼壁細胞的**小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基)。酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染，以免影響結(jié)果。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個月，在-20℃下避光可以保存1年。當在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時，培養(yǎng)板**外一圈的孔**容易干燥揮發(fā)，由于體積不準確而增加誤差。一般情況下，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用。在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度作為空白對照。金屬對CCK-8顯色有影響：當終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、***銅會***5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降級。長沙cck8檢測細胞增殖凋亡
上海儒安生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè)，技術(shù)力量雄厚。是一家有限責任公司企業(yè)，隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求，與多家企業(yè)合作研究，在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進，追求新型，在強化內(nèi)部管理，完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時，良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務，在業(yè)界受到寬泛好評。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團隊，具有細胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內(nèi)參抗體等多項業(yè)務。上海儒安生物科技自成立以來，一直堅持走正規(guī)化、專業(yè)化路線，得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持。