使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請進行一次系統(tǒng)的點印跡分析;
工作液在室溫下8小時內(nèi)可以保持穩(wěn)定,但是應該避免暴露在陽光下或任何其他強光環(huán)境,然而短期實驗室照明強度不會破壞工作液的穩(wěn)定性;
封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應,導致出現(xiàn)非特異性信號。封閉緩沖液同時也會影響系統(tǒng)的靈敏性,當從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時,有時會出現(xiàn)信號衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測系統(tǒng);
使用親和素/生物素檢測系統(tǒng)時,避免使用牛奶作為封閉試劑,因為牛奶中含有不定量的內(nèi)源性生物素,會導致高背景信號;
保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個實驗過程中印跡膜完全被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號; 檢測細胞增殖的種類以及方法。上海b細胞增殖教學視頻
上海儒安生物科技有限公司轉(zhuǎn)膜液
產(chǎn)品簡介:
我們生產(chǎn)的Western轉(zhuǎn)膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western時濕法電轉(zhuǎn)膜,是一種快速效率高的特有配方轉(zhuǎn)膜液,效果較好。
1、轉(zhuǎn)印快速——室溫轉(zhuǎn)膜,20-30 分鐘內(nèi)將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜上。
2、轉(zhuǎn)印效率高——產(chǎn)生熱量非常小,減少蛋白損失。
配置靈活——配置1*轉(zhuǎn)膜液時加入無水甲醇、無水乙醇均可,效果沒有明顯差異,兼容性好。
使用方法:
1* 快速轉(zhuǎn)膜液的配制(1000 ml):
取100ml 此產(chǎn)品+800 ml 去離子水+100ml甲醇。
電轉(zhuǎn)儀的設置:
一個轉(zhuǎn)印槽:電壓:110V, 電流:400mA;
二個轉(zhuǎn)印槽:電壓:140V,電流:700mA;
100kD 以下蛋白,膠濃度<10%的,轉(zhuǎn)印時間20分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。
100kD 以上蛋白,膠濃度≥10%的,轉(zhuǎn)印時間30分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。 長沙小鼠心臟內(nèi)皮細胞增殖教學視頻CCK法的檢測靈敏度很高,甚至可以測定較低細胞密度。
標簽抗體
Anti MBP-Tag Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡介
麥芽糖結(jié)合蛋白(Maltose binding protein, MBP)是非常有用的親和標簽,可提高MBP標簽融合蛋白的表達量和可溶性。它能促進融合蛋白的正確折疊,也能阻止不溶性蛋白(包涵體)的形成。本抗體可用于MBP標簽融合蛋白的檢測。
2.產(chǎn)品特點
?用于WB實驗,性價比高,推薦稀釋比例為1:1000 - 1:10000
?常備現(xiàn)貨
3.結(jié)果示例
MBP標簽小鼠單抗(6D3)經(jīng)1:2000 (泳道1)和1:5000 (泳道2)
稀釋后對MBP標簽融合蛋白進行Western Blot分析。
內(nèi)參抗體
β-actin HRP Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡介
β-actin是6種肌動蛋白之一,存在于許多物種的細胞中,其免疫學和生理功能非常相似。因此,β-actin可用于Western Blot的內(nèi)參對照。需要注意的是,在某些細胞中β-actin的表達并不穩(wěn)定。例如在脂肪組織中,β-actin的表達非常低,因而不能作為這些組織的內(nèi)參對照。
2.產(chǎn)品特點
?用于WB實驗,性價比高,推薦稀釋比例為:1:1000 - 1:10000
?常備現(xiàn)貨β-actin Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡介
β-actin是6種肌動蛋白之一,存在于許多物種的細胞中,其免疫學和生理功能非常相似。因此,β-actin可用于Western Blot的內(nèi)參對照。需要注意的是,在某些細胞中β-actin的表達并不穩(wěn)定。例如在脂肪組織中,β-actin的表達非常低,因而不能作為這些組織的內(nèi)參對照。
2.產(chǎn)品特點
?性價比高,多種稀釋比例推薦:
WB: 1:1000 - 1:10000
IHC: 1:200
?常備現(xiàn)貨 細胞增殖的技術難點。
RIPA細胞裂解液
RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一,其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,該緩沖液能夠從細胞質(zhì),膜和**白質(zhì)中提取蛋白質(zhì),并且與許 多應用相容,包括蛋白質(zhì)分析,和蛋白質(zhì)純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶,如果需要,可將酶添加到試劑中以防止蛋白質(zhì)水解并維持蛋白質(zhì) 的磷酸化狀態(tài)。一些蛋白激酶和其他酶可能對RIPA緩沖液的組分敏感,導致其活性降低。 在這種情況下,準備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。
注意事項:
1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
2.裂解得到的蛋白樣品,含有較高濃度的去垢劑,不建議用Bradford 法測定蛋白濃度,可以選用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。
3.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗;如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如NFKB、p53等時,通常不必進行超聲處理,就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。 研究對控制細胞周期進程的主要檢驗點相關的周期蛋白與依賴于周期蛋白的激酶的調(diào)控機理。南京cck8細胞增殖檢測服務
細胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。上海b細胞增殖教學視頻
細胞增殖周期細胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎上還要不斷增殖,產(chǎn)生新細胞,以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細胞,這是機體新陳代謝的表現(xiàn),也是機體不斷生長發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎。細胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎上還要不斷增殖,產(chǎn)生新細胞,以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細胞,這是機體新陳代謝的表現(xiàn),也是機體不斷生長發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎。細胞以分裂的方式進行增殖,每次分裂后所產(chǎn)生的新細胞必須經(jīng)過生長增大,才能再分裂?,F(xiàn)在把細胞增殖必須經(jīng)過生長到分裂的過程稱為細胞周期。換句話說,細胞增殖周期(或細胞周期)是指細胞從一次分裂結(jié)束開始生長,到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程。細胞增殖周期可分為兩個時期,即間期和分裂期。上海b細胞增殖教學視頻
上海儒安生物科技有限公司是一家生產(chǎn)型類企業(yè),積極探索行業(yè)發(fā)展,努力實現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。上海儒安生物科技是一家有限責任公司企業(yè),一直“以人為本,服務于社會”的經(jīng)營理念;“誠守信譽,持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。以滿足顧客要求為己任;以顧客永遠滿意為標準;以保持行業(yè)優(yōu)先為目標,提供***的細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體。上海儒安生物科技自成立以來,一直堅持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持。