使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測(cè)所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請(qǐng)進(jìn)行一次系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析;
工作液在室溫下8小時(shí)內(nèi)可以保持穩(wěn)定,但是應(yīng)該避免暴露在陽光下或任何其他強(qiáng)光環(huán)境,然而短期實(shí)驗(yàn)室照明強(qiáng)度不會(huì)破壞工作液的穩(wěn)定性;
封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號(hào)。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì)影響系統(tǒng)的靈敏性,當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時(shí),有時(shí)會(huì)出現(xiàn)信號(hào)衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測(cè)系統(tǒng);
使用親和素/生物素檢測(cè)系統(tǒng)時(shí),避免使用牛奶作為封閉試劑,因?yàn)榕Ｄ讨泻胁欢康膬?nèi)源性生物素,會(huì)導(dǎo)致高背景信號(hào);
保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中印跡膜完全被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號(hào); 檢測(cè)細(xì)胞增殖的種類以及方法。上海b細(xì)胞增殖教學(xué)視頻
上海儒安生物科技有限公司轉(zhuǎn)膜液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
我們生產(chǎn)的Western轉(zhuǎn)膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western時(shí)濕法電轉(zhuǎn)膜，是一種快速效率高的特有配方轉(zhuǎn)膜液，效果較好。
1、轉(zhuǎn)印快速——室溫轉(zhuǎn)膜，20-30 分鐘內(nèi)將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜上。
2、轉(zhuǎn)印效率高——產(chǎn)生熱量非常小，減少蛋白損失。
配置靈活——配置1*轉(zhuǎn)膜液時(shí)加入無水甲醇、無水乙醇均可，效果沒有明顯差異，兼容性好。
使用方法：
1* 快速轉(zhuǎn)膜液的配制(1000 ml)：
取100ml 此產(chǎn)品+800 ml 去離子水+100ml甲醇。
電轉(zhuǎn)儀的設(shè)置：
一個(gè)轉(zhuǎn)印槽：電壓：110V, 電流：400mA；
二個(gè)轉(zhuǎn)印槽：電壓：140V，電流：700mA；
100kD 以下蛋白，膠濃度＜10%的，轉(zhuǎn)印時(shí)間20分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。
100kD 以上蛋白，膠濃度≥10%的，轉(zhuǎn)印時(shí)間30分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。 長(zhǎng)沙小鼠心臟內(nèi)皮細(xì)胞增殖教學(xué)視頻CCK法的檢測(cè)靈敏度很高，甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度。
標(biāo)簽抗體
Anti MBP-Tag Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
麥芽糖結(jié)合蛋白(Maltose binding protein, MBP)是非常有用的親和標(biāo)簽，可提高M(jìn)BP標(biāo)簽融合蛋白的表達(dá)量和可溶性。它能促進(jìn)融合蛋白的正確折疊，也能阻止不溶性蛋白(包涵體)的形成。本抗體可用于MBP標(biāo)簽融合蛋白的檢測(cè)。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?用于WB實(shí)驗(yàn)，性價(jià)比高，推薦稀釋比例為1：1000 - 1：10000
?常備現(xiàn)貨
3.結(jié)果示例
MBP標(biāo)簽小鼠單抗(6D3)經(jīng)1：2000 (泳道1)和1：5000 (泳道2)
稀釋后對(duì)MBP標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行Western Blot分析。
內(nèi)參抗體
β-actin HRP Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
β-actin是6種肌動(dòng)蛋白之一，存在于許多物種的細(xì)胞中，其免疫學(xué)和生理功能非常相似。因此，β-actin可用于Western Blot的內(nèi)參對(duì)照。需要注意的是，在某些細(xì)胞中β-actin的表達(dá)并不穩(wěn)定。例如在脂肪組織中，β-actin的表達(dá)非常低，因而不能作為這些組織的內(nèi)參對(duì)照。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?用于WB實(shí)驗(yàn)，性價(jià)比高，推薦稀釋比例為：1：1000 - 1：10000
?常備現(xiàn)貨β-actin Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
β-actin是6種肌動(dòng)蛋白之一，存在于許多物種的細(xì)胞中，其免疫學(xué)和生理功能非常相似。因此，β-actin可用于Western Blot的內(nèi)參對(duì)照。需要注意的是，在某些細(xì)胞中β-actin的表達(dá)并不穩(wěn)定。例如在脂肪組織中，β-actin的表達(dá)非常低，因而不能作為這些組織的內(nèi)參對(duì)照。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?性價(jià)比高，多種稀釋比例推薦：
WB： 1：1000 - 1：10000
IHC： 1：200
?常備現(xiàn)貨 細(xì)胞增殖的技術(shù)難點(diǎn)。
RIPA細(xì)胞裂解液
RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一，其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS，該緩沖液能夠從細(xì)胞質(zhì)，膜和**白質(zhì)中提取蛋白質(zhì)，并且與許 多應(yīng)用相容，包括蛋白質(zhì)分析，和蛋白質(zhì)純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶，如果需要，可將酶添加到試劑中以防止蛋白質(zhì)水解并維持蛋白質(zhì) 的磷酸化狀態(tài)。一些蛋白激酶和其他酶可能對(duì)RIPA緩沖液的組分敏感，導(dǎo)致其活性降低。 在這種情況下，準(zhǔn)備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。
注意事項(xiàng)：
1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。
2.裂解得到的蛋白樣品，含有較高濃度的去垢劑，不建議用Bradford 法測(cè)定蛋白濃度，可以選用BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度。
3.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如NFKB、p53等時(shí)，通常不必進(jìn)行超聲處理，就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。 研究對(duì)控制細(xì)胞周期進(jìn)程的主要檢驗(yàn)點(diǎn)相關(guān)的周期蛋白與依賴于周期蛋白的激酶的調(diào)控機(jī)理。南京cck8細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)
細(xì)胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。上海b細(xì)胞增殖教學(xué)視頻
細(xì)胞增殖周期細(xì)胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎(chǔ)上還要不斷增殖，產(chǎn)生新細(xì)胞，以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細(xì)胞，這是機(jī)體新陳代謝的表現(xiàn)，也是機(jī)體不斷生長(zhǎng)發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎(chǔ)。細(xì)胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎(chǔ)上還要不斷增殖，產(chǎn)生新細(xì)胞，以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細(xì)胞，這是機(jī)體新陳代謝的表現(xiàn)，也是機(jī)體不斷生長(zhǎng)發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎(chǔ)。細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖，每次分裂后所產(chǎn)生的新細(xì)胞必須經(jīng)過生長(zhǎng)增大，才能再分裂。現(xiàn)在把細(xì)胞增殖必須經(jīng)過生長(zhǎng)到分裂的過程稱為細(xì)胞周期。換句話說，細(xì)胞增殖周期（或細(xì)胞周期）是指細(xì)胞從一次分裂結(jié)束開始生長(zhǎng)，到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程。細(xì)胞增殖周期可分為兩個(gè)時(shí)期，即間期和分裂期。上海b細(xì)胞增殖教學(xué)視頻
上海儒安生物科技有限公司是一家生產(chǎn)型類企業(yè)，積極探索行業(yè)發(fā)展，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。上海儒安生物科技是一家有限責(zé)任公司企業(yè)，一直“以人為本，服務(wù)于社會(huì)”的經(jīng)營理念;“誠守信譽(yù)，持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。以滿足顧客要求為己任；以顧客永遠(yuǎn)滿意為標(biāo)準(zhǔn)；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo)，提供***的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體。上海儒安生物科技自成立以來，一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線，得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。