凍存細(xì)胞類(lèi)型:臍血及臍帶組織、外周血、間充質(zhì)干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、組織樣本等
① 用于減輕冷凍和解凍復(fù)蘇期間由溫度引起的分子應(yīng)激反應(yīng)
② 分別以2%、5%或10%USP級(jí)的二甲基亞砜(DMSO)預(yù)先配制即用型細(xì)胞凍存液
凍存細(xì)胞類(lèi)型:臍血及臍帶組織、外周血和骨髓
① BloodStor®55-5以55%(重量/體積)的DMSO(USP)級(jí)、5%(重量/體積)的葡萄糖-40(USP)級(jí)和注射液(WFI)級(jí)別的水預(yù)先配制
② BloodStor®100含有**(重量/體積)的DMSO(USP級(jí))
細(xì)胞凍存液一般有兩種配置方法是什么?江蘇怎么配制細(xì)胞凍存液配制步驟
細(xì)胞復(fù)蘇
1. 從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管,打開(kāi)蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;
3. 離心, 1000rpm,5min;
4. 棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
5. 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。注意事項(xiàng)1.從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但比較好為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前***比較好換一次培養(yǎng)液;
2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作,以免***;
3.凍存和復(fù)蘇比較好用新配制的培養(yǎng)液。 成都加完細(xì)胞凍存液是什么顏色產(chǎn)品特色:即用型細(xì)胞凍存液.
預(yù)期用途:成分確定、無(wú)需程序降溫,所有原料均為注射級(jí),內(nèi)***水平低于0.06EU/mL。本產(chǎn)品為埃澤思(AppliedCell)推出一款即用型的無(wú)血清細(xì)胞凍存液,本款產(chǎn)品在常規(guī)凍存液基礎(chǔ)上做了大量?jī)?yōu)化,主要具有幾大特點(diǎn):凍存液無(wú)血清成分、無(wú)需配制直接使用、無(wú)需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細(xì)胞凍存液,且細(xì)胞復(fù)蘇率高,尤其對(duì)干細(xì)胞干性維持以及細(xì)胞表面蛋白保護(hù)有極好效果。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓等間充質(zhì)干細(xì)胞,免疫細(xì)胞以及大多數(shù)細(xì)胞系凍存。同時(shí)該款所有成分均使用藥用級(jí)原料配制而成,內(nèi)***水平<0.06EU/mL,適用不同應(yīng)用場(chǎng)景。
細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,內(nèi)部任何的物理?yè)p傷對(duì)于它都是致命的。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。細(xì)胞凍存液配方是什么?
冷凍保護(hù)劑甘油或二甲基亞砜(DMSO)分子量小、溶解度大、細(xì)胞膜通透性好,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。DMSO能夠快速穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,降低冰點(diǎn)、延緩凍存過(guò)程,同時(shí)提高細(xì)胞膜通透性,提高細(xì)胞內(nèi)離子濃度,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少細(xì)胞損傷達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。
諾為生物所提供的STEMCELL Technologies cGMP級(jí)別、無(wú)血清的細(xì)胞凍存液可使長(zhǎng)期儲(chǔ)存的細(xì)胞保持高存活率,可應(yīng)用于臨床細(xì)胞和特殊珍貴細(xì)胞的凍存。 細(xì)胞凍存液的原理是什么?杭州配制好的細(xì)胞凍存液配好放多少錢(qián)
細(xì)胞凍存液無(wú)動(dòng)物來(lái)源血清成分,化學(xué)成分明確。江蘇怎么配制細(xì)胞凍存液配制步驟
細(xì)胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);離心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜江蘇怎么配制細(xì)胞凍存液配制步驟
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