怎么配制轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

確定希望輸送的運載物

（如DNA、RNA或蛋白質(zhì)）

根據(jù)不同實驗類型，我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內(nèi)部，包括**常見的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。

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希望轉(zhuǎn)染的細胞類型

轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類，連續(xù)細胞系和原代細胞。

連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力，它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。 轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細胞中的過程，是細胞生物學(xué)、基因表達和基因***實驗中的關(guān)鍵步驟。怎么配制轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系），且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。湖北原代細胞轉(zhuǎn)染試劑原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.

siRNA，加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min，將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻，培養(yǎng)細胞直到適當(dāng)?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”，方便至極。當(dāng)然，習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的，只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉(zhuǎn)染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾，HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型：HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細胞類型，包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞，產(chǎn)品手冊中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細胞、角質(zhì)細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟，貼心

.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。

2.高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。

3.細胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。

4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標準實驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.

細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡介：

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2 μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。

優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。

2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。

3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。 采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細胞時，實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。廣東roche 轉(zhuǎn)染試劑

包括常見細胞類型、干細胞、原代細胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細胞類型）提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。怎么配制轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA，RNA等導(dǎo)入細胞內(nèi)的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細胞基因功能、實現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目，各有千秋，然而沒有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細胞種類、滿足所有實驗需求和目的，成分控認為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機理對轉(zhuǎn)染效果及細胞生理作用影響***，是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù)，選試劑時要留意成分哦。嚴格來講，轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學(xué)法、物理法（電穿孔、顯微注射等）以及***介導(dǎo)法，沒有一種方法是放之四海而皆準。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基于各類轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)法轉(zhuǎn)染。怎么配制轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

上海儒安生物科技有限公司擁有從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù)，軟件開發(fā)，電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù))，化工產(chǎn)品及原料(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實驗窒設(shè)備的銷售。等多項業(yè)務(wù)，主營業(yè)務(wù)涵蓋細胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內(nèi)參抗體。一批專業(yè)的技術(shù)團隊，是實現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標的基礎(chǔ)，是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。公司以誠信為本，業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋細胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內(nèi)參抗體，我們本著對客戶負責(zé)，對員工負責(zé)，更是對公司發(fā)展負責(zé)的態(tài)度，爭取做到讓每位客戶滿意。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德，樹立了良好的細胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內(nèi)參抗體形象，贏得了社會各界的信任和認可。