.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。高靈活應用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉染的基因沉默實驗。細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉染至4種細胞,通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。并更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提。上海Opti-MEM轉染試劑作用
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。DNA轉染試劑報價一般會同時設置對照,對RNAi結果進行比較。RNAi的成功取決于正確導入合適量的siRNA,達到比較大預期反應。
胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要??!當然也要保證細胞狀態(tài)特別好,沒有細微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達載體構建純化良好,質(zhì)粒間比例得當,并且對質(zhì)粒進行酶切驗證。
siRNA,加入HiperFect轉染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細胞直到適當?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉染”,方便至極。當然,習慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型:HiPerfect可高效轉染多種細胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞,產(chǎn)品手冊中列出了轉染原代HUVEC、成纖維細胞、角質(zhì)細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟,貼心該試劑可將RNA導入多種細胞系,包括原代細胞和懸浮細胞.
圖3.用于轉染的Invivofectamine3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。高效、靶向敲低在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果圖4.使用Invivofectamine3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine3.0試劑與靶向FactorVII(FVII)或PPIBmRNA的siRNA組成的復合物,以每千克小鼠體重1mg(mg/kg)的注射量進行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進行評估)。將20μL轉染復合物加入孔中的細胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,混合均勻;陽離子聚合物轉染試劑選購
臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉染試劑..上海Opti-MEM轉染試劑作用
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉染方法將GFP表達質(zhì)粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡).上海Opti-MEM轉染試劑作用
上海儒安生物科技有限公司是國內(nèi)一家多年來專注從事細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體的老牌企業(yè)。公司位于真南路4268號2幢J1718室,成立于2016-09-20。公司的產(chǎn)品營銷網(wǎng)絡遍布國內(nèi)各大市場。公司現(xiàn)在主要提供細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體等業(yè)務,從業(yè)人員均有細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體行內(nèi)多年經(jīng)驗。公司員工技術嫻熟、責任心強。公司秉承客戶是上帝的原則,急客戶所急,想客戶所想,熱情服務。公司秉承以人為本,科技創(chuàng)新,市場先導,和諧共贏的理念,建立一支由細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體**組成的顧問團隊,由經(jīng)驗豐富的技術人員組成的研發(fā)和應用團隊。上海儒安生物科技有限公司依托多年來完善的服務經(jīng)驗、良好的服務隊伍、完善的服務網(wǎng)絡和強大的合作伙伴,目前已經(jīng)得到醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)客戶認可和支持,并贏得長期合作伙伴的信賴。