.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。高靈活應(yīng)用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。并更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑作用
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：高轉(zhuǎn)染效率，適用于多種細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高，適用于多種細(xì)胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系，通過檢測(cè)GFP信號(hào)比較轉(zhuǎn)染效率。細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。DNA轉(zhuǎn)染試劑報(bào)價(jià)一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對(duì)照，對(duì)RNAi結(jié)果進(jìn)行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA，達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng)。
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要！！當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好，沒有細(xì)微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當(dāng)，并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證。
siRNA，加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min，將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻，培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r(shí)候檢測(cè)基因沉默效果。這個(gè)快速操作流程簡(jiǎn)便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”，方便至極。當(dāng)然，習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的，只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾，HiperFect真的是將實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)化到了***。適合多種細(xì)胞類型：HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型，包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對(duì)于原代細(xì)胞，產(chǎn)品手冊(cè)中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的操作步驟，貼心該試劑可將RNA導(dǎo)入多種細(xì)胞系，包括原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞.
圖3.用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得：只需簡(jiǎn)單地混合，并進(jìn)行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。高效、靶向敲低在實(shí)驗(yàn)靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果圖4.使用Invivofectamine3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine3.0試劑與靶向FactorVII(FVII)或PPIBmRNA的siRNA組成的復(fù)合物，以每千克小鼠體重1mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射，**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低（使用TaqMan分析對(duì)敲低進(jìn)行評(píng)估）。將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中，前后移動(dòng)培養(yǎng)皿，混合均勻；陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)
臨床級(jí)******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑作用
簡(jiǎn)介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢(shì)：1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑，無動(dòng)物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENEHP，導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)).上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑作用
上海儒安生物科技有限公司是國(guó)內(nèi)一家多年來專注從事細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體的老牌企業(yè)。公司位于真南路4268號(hào)2幢J1718室，成立于2016-09-20。公司的產(chǎn)品營(yíng)銷網(wǎng)絡(luò)遍布國(guó)內(nèi)各大市場(chǎng)。公司現(xiàn)在主要提供細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體等業(yè)務(wù)，從業(yè)人員均有細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體行內(nèi)多年經(jīng)驗(yàn)。公司員工技術(shù)嫻熟、責(zé)任心強(qiáng)。公司秉承客戶是上帝的原則，急客戶所急，想客戶所想，熱情服務(wù)。公司秉承以人為本，科技創(chuàng)新，市場(chǎng)先導(dǎo)，和諧共贏的理念，建立一支由細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體專家組成的顧問團(tuán)隊(duì)，由經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員組成的研發(fā)和應(yīng)用團(tuán)隊(duì)。上海儒安生物科技有限公司依托多年來完善的服務(wù)經(jīng)驗(yàn)、良好的服務(wù)隊(duì)伍、完善的服務(wù)網(wǎng)絡(luò)和強(qiáng)大的合作伙伴，目前已經(jīng)得到醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)客戶認(rèn)可和支持，并贏得長(zhǎng)期合作伙伴的信賴。