常用轉(zhuǎn)染試劑推薦

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-11-17

超級(jí)好用的siRNA和miRNA轉(zhuǎn)染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶:HiPerFect是小RNA轉(zhuǎn)染試劑,這種非脂質(zhì)體的脂質(zhì)分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉(zhuǎn)染(推薦濃度是1nM-5nM)。保持高效基因沉默的同時(shí)降低脫靶效應(yīng),正是這一產(chǎn)品的精髓所在。除了siRNA,HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉(zhuǎn)染,滿足miRNA功能分析的需要。操作簡(jiǎn)單,方便快速:HiperFect轉(zhuǎn)染試劑的方便程度也是***的,甚至***之內(nèi)可以完成再次接種、轉(zhuǎn)染到檢測(cè)結(jié)果!這對(duì)于高通量反應(yīng)簡(jiǎn)直是求之不得的福音:轉(zhuǎn)染前將細(xì)胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)基可以是含有***和血清的,在37度培養(yǎng)箱中保溫。研發(fā)合成的針對(duì)siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。常用轉(zhuǎn)染試劑推薦

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,其主要作用原理是與DNA通過(guò)沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物,粘附到細(xì)胞膜表面,借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時(shí)間,細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響,因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長(zhǎng),且重復(fù)性不佳?;谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物,從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,但具有一定的細(xì)胞毒性,可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑原理世界上低價(jià)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細(xì)的操作步驟!

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì):1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力

在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí),需考慮您希望輸送的運(yùn)載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。您可通過(guò)下表選擇各類陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細(xì)胞無(wú)毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,是因?yàn)楹怂岽嬖冢皇且驗(yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類型提供了快速、簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。無(wú)論有無(wú)血清、***存在均可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率。

簡(jiǎn)介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲(chóng)細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢(shì):1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑,無(wú)動(dòng)物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率,對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過(guò)X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENEHP,導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò))。轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成; 混勻后室溫下孵育15-20分鐘,直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑原理

用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.常用轉(zhuǎn)染試劑推薦

將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(3105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測(cè)siRNA***效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,與原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導(dǎo)的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上調(diào)。常用轉(zhuǎn)染試劑推薦

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