LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。轉染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。上海sirna轉染試劑報價
用 LipoD293? 體外 DNA 轉染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細胞中。轉染 24 小時后,細胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。
對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/
30 毫升的 293F 細胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導入細胞表達,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。 上海體內(nèi)轉染試劑推薦隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。
細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。
轉染 48 小時后,使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進行成像(左側四幅圖),A:LipoD293; B:293fectin;C:Xfect 和 D:Fugene 6. 帶有 6xHis 標記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術實現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進行 Coomassie 亮藍染色(右上圖 E),道 1 為 LipoD293293、道 2 為標準蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量(見右下圖 F)。產(chǎn)生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑(升級版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個 cDNAs 共轉染進 293T 細胞。一個 GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖)。 pei轉染試劑說明書是什么?
轉染是將外源核酸導入真核細胞的過程,是細胞和分子生物學研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領域的科研黨們繞不開的話題。然而常常聽到的抱怨是"轉染效率太低""轉染完細胞全漂了""轉染后忘記給細胞換液了",真所謂辛辛苦苦實驗N多回,一夜回到解放前……眾所周知,影響轉染成功的因素非常多,包括細胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉染試劑等。各種細胞使用的轉染條件都可能不同,現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準的方案。3.0試劑進行轉染的每個個體間所檢測的生物標志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。上海真核細胞轉染試劑供應商
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用于轉染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。
靶向敲低
在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果
使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進行評估)。 上海sirna轉染試劑報價
上海儒安生物科技有限公司一直專注于從事生物技術、物聯(lián)網(wǎng)技術、網(wǎng)絡技術領域內(nèi)的技術開發(fā)、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,軟件開發(fā),電子商務(不得從事增值電信、金融業(yè)務),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學品、監(jiān)控化學品、民用爆炸物品、易制毒化學品)、實驗窒設備的銷售。,是一家醫(yī)藥健康的企業(yè),擁有自己獨立的技術體系。公司目前擁有較多的高技術人才,以不斷增強企業(yè)重點競爭力,加快企業(yè)技術創(chuàng)新,實現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營。上海儒安生物科技有限公司主營業(yè)務涵蓋細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體,堅持“質(zhì)量保證、良好服務、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。公司深耕細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領域拓展。