常用轉染試劑配方

來源: 發(fā)布時間:2022-06-05

產(chǎn)生慢***的比較

通過 LipoD293? 試劑(升級版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個 cDNAs 共轉染進 293T 細胞。一個 GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖)。

5 天后,細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉導的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 國產(chǎn)轉染試劑制作原理是什么?常用轉染試劑配方

基于陽離子聚合物的轉染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過內吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,后者細胞毒性較小,但其轉染效率都高于脂質體轉染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉染試劑,不局限于單一成分,混合了不同 配方的脂類(非脂質體)、加上蛋白質組分、以及各種的 成分,兼具了轉染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,易于高通量。上海polviet轉染試劑購買轉染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞.

細胞轉染如果以上都沒有問題,那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質粒轉染293T細胞了,轉染效果直接影響著出毒效率,那么一款好的轉染試劑在此時就是至關重要了!在這里給大家推薦一款性價比超高的轉染試劑,美國Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也稱為游離堿PEI22K)是一種功能強大,值得信賴且經(jīng)濟高效的瞬時轉染試劑。在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中,能在96孔板至100L生物反應器范圍內提供始終如一高效的基因表達。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉染試劑,以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉染試劑,使用自行制備的PEI轉染試劑可以使總轉染成本降低高達40%左右。ThomasM,etal(2005)研究數(shù)據(jù)表明,去乙?;腜EI40000(PolyethylenimineMAX40000)體外質粒DNA轉染效率提高21倍,小鼠體內靶向效率達到10000倍,隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。

siRNA,加入HiperFect轉染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細胞直到適當?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉染”,方便至極。當然,習慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型:HiPerfect可高效轉染多種細胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞,產(chǎn)品手冊中列出了轉染原代HUVEC、成纖維細胞、角質細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟,貼心從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。

簡介:X-tremeGENE HP DNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優(yōu)勢:

1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。

2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。

3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好。

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡)。 轉染復合物制備完成; 混勻后室溫下孵育15-20分鐘,直接取10μL加入已鋪好細胞的孔中.上海質粒轉染試劑盒

試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。常用轉染試劑配方

圖3. 用于轉染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。



高效、靶向敲低

在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果



圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進行評估)。 常用轉染試劑配方

上海儒安生物科技有限公司發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大,現(xiàn)有一支專業(yè)技術團隊,各種專業(yè)設備齊全。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展上海儒安生物的品牌。公司堅持以客戶為中心、從事生物技術、物聯(lián)網(wǎng)技術、網(wǎng)絡技術領域內的技術開發(fā)、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,軟件開發(fā),電子商務(不得從事增值電信、金融業(yè)務),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學品、監(jiān)控化學品、民用物品、易制毒化學品)、實驗窒設備的銷售。市場為導向,重信譽,保質量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準則。公司致力于打造***的細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內參抗體。