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圖3. 用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。
高效、靶向敲低
在實(shí)驗靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果
圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復(fù)合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進(jìn)行評估)。 所見即所得——分享兩款超好用的轉(zhuǎn)染試劑,拯救你的細(xì)胞.上?;蜣D(zhuǎn)染試劑對照
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,在超過350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,尤其針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購吧~質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑盒驚艷登場!臨床級載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑。
簡介:X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢:
1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。
2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。
3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好。
圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENE HP,導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))。
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要!!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!
載體系統(tǒng)在實(shí)驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗證. 但相對于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑 LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點(diǎn):高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細(xì)胞系對細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基
1轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細(xì)胞系圖1. LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。
2細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。 riboFECT CP轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用案例,可轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞,靠譜!上海質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑原理
MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.上?;蜣D(zhuǎn)染試劑對照
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時費(fèi)力的優(yōu)化工作。上海基因轉(zhuǎn)染試劑對照