圖7.對注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進行血液化學分析。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi)。在注射后2、24及48小時收集血液樣品，并通過臨床化學檢測方法對數(shù)個生物標志物(Antech)進行評估。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000，Lipofectamine?3000和Neon?轉(zhuǎn)染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑作用
產(chǎn)生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑（升級版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細胞。一個 GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。
5 天后，細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化，分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 原代細胞轉(zhuǎn)染試劑購買賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品，適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染。
用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得：只需簡單地混合，并進行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。
靶向敲低
在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果
使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物，以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射，**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低（使用TaqMan分析對敲低進行評估）。
胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要?。‘斎灰惨ＷC細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當，并且對質(zhì)粒進行酶切驗證。包括**常見的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。
細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高，生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化轉(zhuǎn)染復合物制備完成； 混勻后室溫下孵育15-20分鐘，直接取10μL加入已鋪好細胞的孔中.原代細胞轉(zhuǎn)染試劑購買
一般會同時設置對照，對RNAi結(jié)果進行比較。RNAi的成功取決于正確導入合適量的siRNA，達到比較大預期反應。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑作用
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細胞毒性相對較大，后者細胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同 配方的脂類（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的 成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢，且操作更加簡單，易于高通量。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑作用