一直都像個新手，從未老道過。所有新手的迷茫與無奈我**能體會?？吹綀@子里有一些同學在問有關(guān)CCK8試驗的事情，當初我也和他們一樣，像個被蜘蛛絲纏住頭的迷茫蒼蠅一頭扎進園子里，期待能找到些解決謎團的只言片語。希望我寫的這些非專業(yè)文字能夠幫助那些在實驗室里沒有前行者指點迷津的筒子們。當然仁者見仁智者見智，我寫的只是個人實驗心得，就供參考。歡迎大家拍磚共同進步。實驗是簡單的，道路是曲折的，時間就是用來浪費的，科研就是自娛自樂使勁折騰。代謝率低了以后，細胞呼吸減弱，NAD+產(chǎn)生減少，測出的Formazan也會減少。浙江cck8材料
二、優(yōu)點：·使用方便，省去了洗滌細胞，不需要放射性同位素和有機溶劑；·CCK-8法能快速檢測；·CCK-8法的檢測靈敏度很高，甚至可以測定較低細胞密度；·CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法，MTT實驗生成的formazan不是水溶性的，需要使用DMSO等有機溶劑溶解；而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的，不但省去了溶解步驟，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差；·CCK-8法對細胞毒性小，可以多次測定選取比較好測定時間，與MTT方法相比線性范圍更寬，靈敏度更高；·CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液，毋需預(yù)制，即開即用。天津測完cck8的細胞能去染色嗎MTT與CCK8比色法的實驗細節(jié)和注意事項.
培養(yǎng)基對CCK8測定的影響：不同的培養(yǎng)基中含有氧化還原性物質(zhì)不同，（主要是氨基酸的成分及糖含量），會與CCK8發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生實驗誤差，因此所用培養(yǎng)基要一致，不要更換其他培養(yǎng)基。比如DMEM空白吸收為0.93；1640培養(yǎng)基在0.5左右。另外培養(yǎng)基中有酚紅存在的情況下，會增加空白吸收，但不影響測定，扣除空白吸收即可，可見空白孔非常重要，所以每次實驗均要設(shè)定空白對照。另外，血清不影響測定，所以我用CCK-8來測定病毒對細胞活性的影響或者某個***對病毒復(fù)制的影響時，我都小心翼翼的測很多個時間點，說實話，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅。
CCK-8（CellCountingKit-8）細胞活性和增殖檢測是醫(yī)學研究中常用的實驗技術(shù)，其原理是該試劑中含有WST-8，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazandye）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。以下是CCK-8檢測的具體步驟：細胞活性檢測1.在96孔板中接種細胞懸液(100ml/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)(在37℃，5%CO2的條件下)。CCK8雖好,這些情況下不建議用!
CKK-8原理
CellCountingKit，CCK-8試劑含有WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），是近年新開發(fā)的一種更新的水溶性四唑鹽檢測，原理與WST-1類似：在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原成具有高度水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物（Formazan）。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比，用酶聯(lián)免疫分析儀測定其光吸收值可間接反映活細胞數(shù)量，在一定細胞數(shù)量范圍內(nèi)甲臜形成的量與細胞數(shù)成正比。
換液的意思是將cck8加在培養(yǎng)基中以換液的形式加在孔板中避免氣泡產(chǎn)生。湖北cck8 mts
與MTT相比，CCK-8和XTT的價格比較貴。浙江cck8材料
CCK-8的用途1.細胞增殖測定：細胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到，比如**相關(guān)、損傷后修復(fù)等。
2.***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時，經(jīng)常會用到CCK-8。
3.細胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學物品對細胞的影響上。
4.**藥敏試驗：這個是用的比較廣的，我見過做**的團隊，買CCK-8都是一整箱，一整箱的買，比如果子老師所在的團隊，哈哈哈。
5.微生物對細胞的毒性或增殖的實驗。 浙江cck8材料