解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。新配方百白破混合制劑接種反應較低,血清學效果也較好.北京hyclone血清培養(yǎng)細胞
血清主要作用
●提供基本營養(yǎng)物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。
●提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(氫化可的松)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。
●提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。
●提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。
●對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝中起重要作用,如SeO3,硒等 蘇州山羊血清公司收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清液;
牛血清是細胞培養(yǎng)基的重要組成部分,其質量好壞對細胞狀態(tài)及數(shù)量增長速度影響很大。常用的有胎牛血清、新生牛血清及小牛血清。牛的采血年齡是這三種血清區(qū)分的明顯標志。小牛血清的采集對象是出生1年之內的小牛,新生牛血清是出生24小時至2周內的新生牛,胎牛血清則是6-10個月的胎牛。隨著采血年齡的增加,牛血清中的生長因子減少,抗體和補體等含量增加。因此,鑒別血清原料的采血年齡段,防止成牛血清的參入是血清品質檢測者所面臨的一個重要問題。
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避免產生沉淀物1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產生沉淀物。2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。目的檢測鼠疫患者血清抗體譜,為鼠疫的疫苗研究奠定基礎。蘇州capricorn血清培養(yǎng)
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細胞增殖間期
S期DNA合成期
從G1末期到S初期、細胞內迅速形成DNA聚合酶及四種脫氧核苷酸。S期主要特點是利用G1期準備的物質條件完成DNA復制,并合成一定數(shù)量的組蛋白,供DNA形成染色體初級結構。在S期末,細胞核DNA含量增加一倍,為細胞進行分裂作了準備。DNA復制一旦受到障礙或發(fā)生錯誤,就會阻擋細胞的分裂或引起變異,導致異常細胞或畸形的發(fā)生。S期持續(xù)時間大約7~8小時。G2期DNA合成后期
這一時期的主要特點是為細胞分裂準備物質條件。DNA合成終止,但RNA和蛋白質合成又復旺盛,主要是組蛋白、微管蛋白、膜蛋白等的合成,為紡錘體和新細胞膜等的形成備足原料。若阻斷這些合成,細胞便不能進入有絲分裂。G2期歷時較短而恒定,哺乳動物細胞一般為1~1.5小時。
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