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堿燒傷致角膜損傷大鼠模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2020堿燒傷致角膜損傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學(xué)性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體,將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜90s后移去,立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。裸鼠皮下成瘤:前肢近腋后皮下注射細(xì)胞懸液; 裸鼠原位瘤:胰腺成瘤;尾靜脈注射成瘤。西藏C57動物模型
所用儀器為bio-rad的化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)。結(jié)果見圖1中c和d,可以看出,通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標(biāo)動物,對本發(fā)明提供的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的構(gòu)建方法進行說明,gm20541基因敲除的路線如圖2所示,具體操作如下:基因敲除小鼠獲取步驟:1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列l(wèi)oxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子;2利用dna同源重組技術(shù)將gm20541基因中的第3個外顯子替換,得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細(xì)胞;3利用步驟2得到的胚胎干細(xì)胞制備得到含gm20541基因敲除細(xì)胞的嵌合體小鼠(圖2);4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定:實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結(jié)果,擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產(chǎn)物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結(jié)果見圖3中a。豚鼠動物模型實驗室可提供專業(yè)的大鼠小鼠動物疾病模型技術(shù),包含心血管系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、生殖、泌尿系統(tǒng)、成瘤系統(tǒng)等。
其也是可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發(fā)明的實施例而已,并不用于限制本發(fā)明,對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說,本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi),所作的任何修改、等同替換、改進等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。sequencelisting四川省人民醫(yī)院利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。
應(yīng)根據(jù)所檢測指標(biāo)的要求,需采取不同策略處理。在如今分子生物學(xué)當(dāng)?shù)赖默F(xiàn)實背景下,動物實驗除了對實驗動物的體征及生理指標(biāo)進行的監(jiān)控外,各種分子檢測甚至是組學(xué)檢測也開始大行其道,動物實驗結(jié)束之后的機制研究成為了實驗的重頭戲。一般來說,動物實驗檢測對象主要包括:(1)體液中各類因子定性及定量檢測由于此類檢測對象多為蛋白及各類小分子物質(zhì),因此在取樣過程中應(yīng)注意防止此類物質(zhì)降解,在獲取后,應(yīng)及時置于溫(≤-80℃)進行保存,在后續(xù)實驗過程中,也應(yīng)當(dāng)注意保存條件的穩(wěn)定性,避免反復(fù)凍融。常用的方法便是酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測方法的試劑盒(比色法、比濁法等)方法對各類生化指標(biāo)及因子進行定性及定量檢測。(2)組織病理、生理變化及免疫組化檢測常用的病理檢測多使用H&E染色對細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核進行染色標(biāo)記,以觀察細(xì)胞變化。除此之外,許多特殊染色也在病理生理變化中得到了應(yīng)用,如利用Masson染色檢測組織纖維化病變,Nissl染色檢測神經(jīng)元損傷,β-半乳糖甘酶染色檢測細(xì)胞衰老等。此外,還可以通過免疫組化技術(shù)對某些特異性標(biāo)記物進行免疫顯色檢測,達到原位定性或定量檢測的目的。。通過建立腦缺血-再灌注動物模型,模擬人類ICVD的病理過程。
可在設(shè)定的壓差標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)無極調(diào)控,以保障系統(tǒng)對海拔(3000m~7000m)的微負(fù)壓進行模擬。并且,進排風(fēng)風(fēng)管裝有高效空氣過濾器,使進入飼養(yǎng)倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進風(fēng)系統(tǒng)13連接,所述惰性氣源與進風(fēng)系統(tǒng)13之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉2內(nèi)的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態(tài)惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環(huán)境時,外接惰性氣體儲備罐連接進風(fēng)系統(tǒng)13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接,通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調(diào)節(jié)比例式氣閥,通過加惰性氣體來來實現(xiàn)降低氧氣濃度。當(dāng)倉體內(nèi)的氧氣濃度較高時,手動打開惰性氣體儲備罐與進風(fēng)系統(tǒng)之間的氣閥,調(diào)節(jié)惰性氣體進入量,使倉體內(nèi)氧氣濃度降低,觀察控制面板上的氧濃度顯示,調(diào)整氣閥開度大小,達到需求的氧濃度,以此調(diào)節(jié)實現(xiàn)高原缺氧環(huán)境的模擬。本技術(shù)方案采用的惰性氣體為對生命體無危害的惰性氣體。實施例4在實施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)。面神經(jīng)受損而致面部表情肌群的運動功能障礙,對患者的心理和日常生活造成很大的影響。湖南高脂高糖動物模型造模
通過高脂飲食誘導(dǎo)構(gòu)建非酒精性脂肪肝模型。西藏C57動物模型
飼養(yǎng)倉左右箱體上分別設(shè)置有小物件傳遞窗和大物件傳遞窗,所述代謝籠還包括設(shè)置在代謝籠上的投料斗、飲水瓶和設(shè)置在代謝籠下方的聚糞斗、尿液排出口、糞便排出口。進一步地,所述無極調(diào)控微負(fù)壓裝置包括進風(fēng)系統(tǒng)、排風(fēng)系統(tǒng)和霍尼威爾或西門子調(diào)控模塊,所述進風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置在功能設(shè)備集成底座內(nèi),所述排風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置在飼養(yǎng)倉頂部。進一步地,所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進風(fēng)系統(tǒng)連接,所述惰性氣源與進風(fēng)系統(tǒng)之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉內(nèi)的嵌入式氧測定儀。進一步地,所述高原光照環(huán)境模擬裝置包括可見暖光系統(tǒng)和照明亮度無極控制系統(tǒng),所述可見暖光系統(tǒng)設(shè)置飼養(yǎng)倉頂部。進一步地,所述高原溫度環(huán)境模擬裝置包括降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和溫度采集顯示系統(tǒng)。進一步地,所述高原濕度環(huán)境模擬裝置包括加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)和濕度采集顯示系統(tǒng)。進一步地,所述動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元包括coms高清圖像采集系統(tǒng)、數(shù)字視頻傳輸系統(tǒng)、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統(tǒng)。綜上所述,由于采用了上述技術(shù)方案,本實用新型的有益效果是:1、本實用新型非全自動控制系統(tǒng),需要人為觀察并手動調(diào)節(jié)隔離器內(nèi)部環(huán)境。西藏C57動物模型