上海兔原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

    本發(fā)明涉及細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體是涉及一體式原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)瓶。背景技術(shù)：原代細(xì)胞是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。原代細(xì)胞培養(yǎng)一般指的是第1代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞用途，不僅應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)等。原代細(xì)胞相較于細(xì)胞株(系)而言，有著不可替代的重要性。現(xiàn)有的原代細(xì)胞提取方法主要有消化分離法和組織塊貼壁法等?，F(xiàn)行的組織塊貼壁法缺乏一個(gè)整體性和封閉性更出色的培養(yǎng)瓶。傳統(tǒng)的培養(yǎng)瓶(皿)進(jìn)行原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)有許多不便和不足之處。其一是為了保證組織塊的與培養(yǎng)瓶(皿)底部的充分接觸以及良好制動，需要使用細(xì)胞爬片，而細(xì)胞爬片需要購買無菌包裝或自行高壓滅菌，由于爬片和培養(yǎng)瓶一體性不好，有造成污染的可能性，再者爬片在用鑷子拾取的過程不易，容易碎裂等。其二是在放置爬片的過程中，難以控制爬片與培養(yǎng)瓶(皿)的接觸程度，即接觸面太小，培養(yǎng)基會滲進(jìn)爬片與培養(yǎng)瓶(皿)之間，在浮力的作用下，爬片會漂浮，這樣就起不到爬片的作用，若爬片與培養(yǎng)瓶(皿)的間隙很小，就會影響培養(yǎng)基的滲入，對細(xì)胞的生長增殖不利。由于上述的局限性。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞，它能分化成許多種組織細(xì)胞。上海兔原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

    7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。(8)將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中（37℃，5%CO2，95%空氣）(9)放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。5、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，多久更換一次培養(yǎng)基？這取決于細(xì)胞生長的速度。一般而言2-3天更換一次培養(yǎng)基，許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。注意：凍存細(xì)胞復(fù)蘇后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細(xì)胞。6、我能擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存原代正常人類細(xì)胞嗎？這取決于細(xì)胞的類型。一些細(xì)胞類型像神經(jīng)細(xì)胞，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長緩慢的上皮細(xì)胞，不推薦擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。其它的細(xì)胞類型像成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等等，可以擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。然而，需要注意的是再次凍存的過程可能導(dǎo)致細(xì)胞生長性能的改變。7、培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基？我們推薦的用量為：T-25培養(yǎng)瓶5ml，T-75培養(yǎng)瓶15ml，T-150培養(yǎng)瓶30ml。吉林乳鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室臍帶是哺乳類連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。

    本實(shí)用新型涉及細(xì)胞培養(yǎng)箱領(lǐng)域，尤其涉及的是一種新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱。背景技術(shù)：現(xiàn)有技術(shù)中，原代培養(yǎng)，是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時(shí)間短，遺傳性狀和體內(nèi)細(xì)胞相似，適于做細(xì)胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。利用原代培養(yǎng)，可對細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行藥物的篩選，根據(jù)細(xì)胞對加入的化療藥物的敏感性來幫助選擇的化療方案，有可能起到增強(qiáng)療效、降低副作用的作用。而實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為得到更多的細(xì)胞進(jìn)行篩查，往往需要同時(shí)對大量的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，而市面上單層或雙層設(shè)計(jì)的細(xì)胞培養(yǎng)箱已難以滿足實(shí)驗(yàn)者的需求，另外市面上也有一些原代細(xì)胞培養(yǎng)箱，但其儲藏空間設(shè)計(jì)不合理，空間利用率低，在存放大量的細(xì)胞培養(yǎng)皿時(shí)，其占地面積也大，不方便實(shí)驗(yàn)者存放。同時(shí)，無毒和無菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件，培養(yǎng)皿作為用于細(xì)胞培養(yǎng)的主要實(shí)驗(yàn)室器皿，常存儲于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行貯藏培養(yǎng)，市場上的大型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱由于空間設(shè)計(jì)過大。

    下面是它所需要的特殊條件。⑴血清：動物細(xì)胞離體培養(yǎng)常常需要血清。常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。在這里，血清等于是動物細(xì)胞離體培養(yǎng)的天然營養(yǎng)液。⑵支持物：大多數(shù)動物細(xì)胞有貼壁生長的習(xí)慣。離體培養(yǎng)常用玻璃，塑料等作為支持物。⑶氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細(xì)胞培養(yǎng)過程中不斷進(jìn)行調(diào)節(jié)，不斷維持所需要的氣體條件。[2]植物細(xì)胞培養(yǎng)⑴光照：離體培養(yǎng)的植物細(xì)胞對光照條件不甚嚴(yán)格，因?yàn)榧?xì)胞生長所需要的物質(zhì)主要是靠培養(yǎng)基供給的。但光照不但與光合作用有關(guān)，而且與細(xì)胞分化有關(guān)，例如光周期可對性細(xì)胞分化和開花調(diào)控作用，所以以獲得植株為目的的早期植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，光照條件特別重要。以植物細(xì)胞離體培養(yǎng)方式獲得重要物質(zhì)，如藥物的過程，植物細(xì)胞大多是在反應(yīng)器中懸浮培養(yǎng)。⑵植物細(xì)胞的分裂和生長特別需要植物的調(diào)節(jié)，促進(jìn)生長的生長素和促進(jìn)細(xì)胞分裂的分裂素是基本的。植物細(xì)胞的分裂，生長，分化和個(gè)體生長周期都有相應(yīng)的參與調(diào)節(jié)。和動物細(xì)胞相比，植物細(xì)胞離體培養(yǎng)對要求的原理已經(jīng)了解，其應(yīng)用技術(shù)也已相當(dāng)成熟，已經(jīng)有一套能使用的培養(yǎng)液。本公司分離的SD大鼠心肌細(xì)胞（乳鼠）取自新鮮的組織材料。

    導(dǎo)語原代細(xì)胞培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，其步驟包括取材→分離→培養(yǎng)和維持，給大家?guī)碓?xì)胞培養(yǎng)的一些技巧，希望大家能有所收獲！原代細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1、為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件；3、服務(wù)于臨床實(shí)踐，用于藥物篩選等。原代細(xì)胞培養(yǎng)之取材取材作為原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中的部至關(guān)重要，以下幾種取材技術(shù)，你都用過哪些方法呢？兔髓核原代細(xì)胞培養(yǎng)之分離注意事項(xiàng)1、組織塊培養(yǎng)法1）組織塊接種后的天，在觀察和移動的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動和振動，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2）加入的培養(yǎng)液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3）當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細(xì)胞的生長。4）為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上。2、貼壁型原代細(xì)胞1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，它們之間會互相影響，在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)，使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞。云南兔原代細(xì)胞技術(shù)

使得體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細(xì)胞作為研究血管的模型細(xì)胞。上海兔原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

    導(dǎo)致集中消毒設(shè)計(jì)的紫外燈無法有效照射內(nèi)部空間，容易滋生細(xì)菌，影響細(xì)胞培養(yǎng)的存活率。因此，現(xiàn)有技術(shù)存在缺陷，需要改進(jìn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是：提供一種可存放大量細(xì)胞培養(yǎng)皿、空間利用率高、存放方便，具有殺菌消毒作用的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱。本實(shí)用新型的技術(shù)方案如下：一種新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱，包括若干個(gè)用于存放細(xì)胞培養(yǎng)皿的內(nèi)箱盒、及用于存放所述內(nèi)箱盒的外箱體，所述外箱體內(nèi)設(shè)有若干列中空的矩形槽，各所述矩形槽的兩側(cè)分別設(shè)有若干層對稱的滑槽，若干層所述滑槽由上至下等間距依次設(shè)置，每一層所述滑槽的正面及背面各存設(shè)有一內(nèi)箱盒，所述內(nèi)箱盒包括底盒、紫外燈及上蓋，所述紫外燈設(shè)于底盒內(nèi)，所述底盒與上蓋的一側(cè)通過合頁鉸接，所述底盒與上蓋的另一側(cè)通過鎖扣扣合連接，所述底盒上設(shè)有推拉把手，所述底盒的兩側(cè)分別設(shè)有與滑槽適配的滑輪，所述底盒兩側(cè)的頭部分別設(shè)有與滑槽適配的滑塊。采用上述技術(shù)方案，所述的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱中，所述滑槽的高度大于滑塊的高度，所述滑塊的高度大于滑輪的直徑。采用上述各個(gè)技術(shù)方案，所述的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱中，所述鎖扣包括鎖環(huán)及鎖塊，所述鎖環(huán)與上蓋活動連接，所述鎖塊設(shè)于底盒外部。上海兔原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室