北京豚鼠動物模型手術

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    根據gm20541的cdna序列設計引物：gm20541-cdna-f：5’-tcggtctcatcttcattccc-3'；gm20541-cdna-r：5’-ggaaggctctgttccggtat-3'；(g)以提取的cdna為模板，進行rt-pcr。擴增后進行電泳。結果見圖4中b，可以看出，通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網膜中表達量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照，sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠；gm20541rnalevel是指rna表達水平相對變化，以野生型表達水平為1。實施例3對4月齡的gm20541基因敲除純合子小鼠進行erg視力檢測：1暗適應動物應整夜暗適應，環(huán)境應做到沒有光線；2次日麻醉：稱重，腹腔內注射；宜深度麻醉；3動物固定及散瞳：麻醉完成后，在暗紅光照明下將小鼠用膠帶固定在動物試驗平臺的前方：需保證小鼠正"趴"，即相對于閃光刺激器的刺激口，雙眼高度一致，充分暴露，滴加散瞳劑。4電極安裝：將視網膜電圖儀(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)預熱后，在耳夾電極涂上導電膏，夾尾巴，插入放大器“地”接口；雙頭的針電極插入后頸皮(大約在兩耳中間)，同時接兩個通道的“負”接口；金環(huán)電極夾在動物實驗平臺的電極支架上，仔細調整其角度。寧夏哪里有動物模型實驗室通過博來霉素誘導的肺炎樣癥狀及肺纖維化癥狀模型為研究ALL的有效措施提供理想的動物模型。

    結果發(fā)現(xiàn)在這些組織中，gm20541均有表達，說明該基因可能在體內發(fā)揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達。方法：(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾，充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細胞后，在冰上裂解20min。(3)4℃，16000g離心10min后，取上清轉移至另一干凈離心管，加入50μl的蛋白上樣液，混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后，分別取20μl，160v電壓進行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結束后，根據需要，裁剪適當大小的硝酸纖維素膜，按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙，并趕去氣泡，轉膜槽放入冰水浴中，采用恒流，轉膜2h。(6)轉膜完畢后，純水沖洗硝酸纖維素膜一遍，晾干并標記。然后用8％的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后，加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗，4℃孵育過夜。(8)回收一抗，1×tbst緩沖液洗膜4次，每次10min，根據一抗來源，選擇合適二抗，用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標記的二抗，室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結束后，用1×tbst洗膜3次，每次10min，用thermo的elc發(fā)光試劑盒檢測蛋白。

    IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型，并觀察模型的生化及病理指標特點?！静牧稀?、酸化水：鹽酸調滅菌水；2、蓖麻油+CCl4：5:1配制；3、LPS：；4、血清白蛋白BSA：800mg/kg用量，滅菌水配制；【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次，配制160mg/ml，灌胃100ul/只，持續(xù)8周；2、同時皮下注射蓖麻油和CCl4（5:1），1次/周，持續(xù)8周；3、分別于第6、8周以（）尾靜脈注射LPS，1次/周；4、每兩周取24h尿液一次觀察尿蛋白及紅細胞；5、每日觀察精神、飲食、大小便，第9周處死，取血和腎、肝做相應檢查；6、取尿液后2000r/min離心10min，取上清用全自動生化儀檢測尿蛋白肌酐比值，鏡下觀察尿沉渣中有無紅細胞。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。

    代謝組學的研究對象大都是相對分子量在1000以內的小分子物質，因此常用的血液樣本在取樣后，應小心操作，防止溶血，盡快分離出血清，分置于溫環(huán)境下保存。由于用于病理實驗的動物組織采集相對其他樣品的采集，操作更繁瑣，在處理過程中許多細節(jié)容易忽略，造成數據不完美（甚至不能用）。因此接下來將重點介紹組織樣品采集的注意事項及其固定。組織樣品采集注意事項組織應新鮮，操作時間盡可能短，否則細胞發(fā)生死后變化、自融及現(xiàn)象。是動物心臟還在跳動時采集，樣本取出后在5分鐘以內置于固定液內，避免長時間暴露在空氣環(huán)境中。組織塊盡量小而薄。組織塊的厚度以不超過5mm為宜，較為理想的厚度為2mm左右，主要目的是使固定液迅速而均勻的滲入組織塊內部。勿使組織塊受擠壓。在采集過程中，應盡量選擇較為鋒利的手術器械，如手術刀片等，避免操作過程中擠壓挫傷標本。擠壓過的組織均不可用。固定液的量一般以組織塊大小的20倍為宜，組織能夠在容器內自由移動。盡量保持組織的原有形態(tài)。新鮮組織經固定后，或多或少產生收縮現(xiàn)象（如胃腸），為此可將組織展平，以盡可能維持原形。保持組織清潔。組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用生理鹽水沖洗。長期攝入酒精致慢性酒精性肝病，建立酒精肝大鼠模型。湖南高脂高糖動物模型技術

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    D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱：D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：成年鼠5、實驗動物體重：180g-220g6、實驗動物環(huán)境：SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2009D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型8周詢價1、實驗方法：D-半乳糖誘導（大鼠按）（注：每天1次，連續(xù)6-7周。）2、檢測標準：①SOD明顯下降、MDA明顯增加；②水迷宮試驗顯示學習記憶能力下降；③腦組織神經元數目減少。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明：1、如有特殊要求，請另詢價。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動實驗。北京豚鼠動物模型手術