云南腦定位動(dòng)物模型構(gòu)建

    17-高原濕度環(huán)境模擬裝置，18-動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元，19-功能控制面板。具體實(shí)施方式為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例用以解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型，即所描述的實(shí)施例是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實(shí)用新型實(shí)施例的組件可以以各種不同的配置來(lái)布置和設(shè)計(jì)。因此，以下對(duì)在附圖中提供的本實(shí)用新型的實(shí)施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本實(shí)用新型的范圍，而是表示本實(shí)用新型的選定實(shí)施例?；诒緦?shí)用新型的實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。需要說(shuō)明的是，術(shù)語(yǔ)“”和“第二”等之類的關(guān)系術(shù)語(yǔ)用來(lái)將一個(gè)實(shí)體或者操作與另一個(gè)實(shí)體或操作區(qū)分開(kāi)來(lái)，而不一定要求或者暗示這些實(shí)體或操作之間存在任何這種實(shí)際的關(guān)系或者順序。而且，術(shù)語(yǔ)“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備不包括那些要素，而且還包括沒(méi)有明確列出的其他要素。通過(guò)截?cái)啻笫竺娌可窠?jīng)致面癱模型的建立。云南腦定位動(dòng)物模型構(gòu)建

    缺點(diǎn)：該移植模型的原發(fā)出現(xiàn)與轉(zhuǎn)移發(fā)生之間時(shí)間間隔短，不利于藥物藥效研究;且細(xì)胞為鼠源，與人類有一定的差異。2異種移植模型異種移植模型是將人類的細(xì)胞或組織移植入免疫缺陷型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠，例如無(wú)胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般來(lái)說(shuō)，免疫缺陷程度越高，成瘤性越好。的相關(guān)研究中，人源細(xì)胞系異種移植(cell-line-derivedxenograft，CDX)模型和患者組織異種移植(patient-derivedxenograft，PDX)模型已得到廣泛應(yīng)用。CDX模型方法：將5×106的人A375黑色素瘤細(xì)胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹側(cè)的雙側(cè)，成功構(gòu)建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法：有研究者將93個(gè)新鮮的患者組織切成2×2×2mm3碎片的大小，皮下接種6周大的NOD/SCID雌性小鼠，建立PDX模型。優(yōu)點(diǎn)：保留了病人的組織學(xué)和遺傳學(xué)特征，可模擬潰瘍狀態(tài)對(duì)人類黑色素瘤預(yù)后的影響。缺點(diǎn)：此模型移植后的潛伏期長(zhǎng)，連續(xù)傳代后鼠基質(zhì)被人類基質(zhì)替代，移植率可變，免疫系統(tǒng)受損，有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫細(xì)胞功能的缺乏。三、轉(zhuǎn)基因小鼠模型可以通過(guò)異位表達(dá)基因，引入特定的致突變或滅活抑制基因來(lái)對(duì)小鼠進(jìn)行轉(zhuǎn)基因黑色素瘤模型的構(gòu)建。北京外包動(dòng)物模型培養(yǎng)人類疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。

    本實(shí)用新型屬于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)。背景技術(shù)：高原環(huán)境模擬系統(tǒng)可以在非高原地區(qū)“制造”出不同海拔高度和氣候條件，模擬各種高原缺氧環(huán)境，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在一定時(shí)間內(nèi)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求達(dá)到預(yù)期的高原反應(yīng)癥狀，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物表現(xiàn)出高原性疾病，為高原疾病研究人員提供高原疾病模型動(dòng)物，便于研究或預(yù)防高原性疾病的藥物?，F(xiàn)有的環(huán)境模擬系統(tǒng)可以模擬實(shí)現(xiàn)高原光照和低氧環(huán)境，但模型成功率較低、動(dòng)物死亡率較高、造模動(dòng)物種類單一。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本實(shí)用新型的目的在于：提供一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)，解決現(xiàn)有高原環(huán)境模擬系統(tǒng)中存在的模型成功率較低、動(dòng)物死亡率較高、造模動(dòng)物種類單一的問(wèn)題。本實(shí)用新型采用的技術(shù)方案如下：一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)，包括功能設(shè)備集成底座和設(shè)置在功能設(shè)備集成底座上的飼養(yǎng)倉(cāng)，所述飼養(yǎng)倉(cāng)具有無(wú)極調(diào)控微負(fù)壓裝置、高原低氧環(huán)境模擬裝置、高原光照環(huán)境模擬裝置、高原溫度環(huán)境模擬裝置、高原濕度環(huán)境模擬裝置、動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元，所述飼養(yǎng)倉(cāng)內(nèi)設(shè)置有若干代謝籠，飼養(yǎng)倉(cāng)前后箱體上設(shè)置有觀察窗和若干操作窗。

    結(jié)果發(fā)現(xiàn)在這些組織中，gm20541均有表達(dá)，說(shuō)明該基因可能在體內(nèi)發(fā)揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測(cè)gm20541基因在不同組織中的表達(dá)。方法：(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾，充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細(xì)胞后，在冰上裂解20min。(3)4℃，16000g離心10min后，取上清轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管，加入50μl的蛋白上樣液，混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后，分別取20μl，160v電壓進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結(jié)束后，根據(jù)需要，裁剪適當(dāng)大小的硝酸纖維素膜，按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙，并趕去氣泡，轉(zhuǎn)膜槽放入冰水浴中，采用恒流，轉(zhuǎn)膜2h。(6)轉(zhuǎn)膜完畢后，純水沖洗硝酸纖維素膜一遍，晾干并標(biāo)記。然后用8％的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后，加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說(shuō)明書(shū))稀釋于封閉液的一抗，4℃孵育過(guò)夜。(8)回收一抗，1×tbst緩沖液洗膜4次，每次10min，根據(jù)一抗來(lái)源，選擇合適二抗，用1×tbst稀釋辣根過(guò)氧化氫酶(hrp)標(biāo)記的二抗，室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結(jié)束后，用1×tbst洗膜3次，每次10min，用thermo的elc發(fā)光試劑盒檢測(cè)蛋白。SD大鼠腦缺血模型建立。

    動(dòng)物疾病模型在人類重大疾病研究和新藥創(chuàng)制等方面具有不可替代的重要作用和價(jià)值。與自發(fā)性疾病動(dòng)物模型和環(huán)境誘導(dǎo)、物理因素、藥物誘導(dǎo)的疾病動(dòng)物模型相比，手術(shù)模型操作復(fù)雜、技術(shù)門(mén)檻高，因此也存在相應(yīng)的一些問(wèn)題，如缺乏標(biāo)準(zhǔn)化流程、穩(wěn)定性差、實(shí)驗(yàn)室之間數(shù)據(jù)可比性較差。即便是同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，重復(fù)性也是一個(gè)很大的挑戰(zhàn)。所以實(shí)現(xiàn)手術(shù)疾病模型的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化和重復(fù)性仍然是該領(lǐng)域長(zhǎng)期的目標(biāo)。針對(duì)這一現(xiàn)狀，賽業(yè)生物利用多年積累的的堅(jiān)實(shí)經(jīng)驗(yàn)、高效的團(tuán)隊(duì)組建及管理經(jīng)驗(yàn)，歷經(jīng)兩年籌備，打造了一支技術(shù)過(guò)硬的小鼠手術(shù)模型服務(wù)團(tuán)隊(duì)，熟練掌握多種模型的制備，具備建立復(fù)雜及復(fù)合手術(shù)疾病模型的能力。我們以項(xiàng)目“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于客戶復(fù)雜的項(xiàng)目需求或文獻(xiàn)未見(jiàn)、少見(jiàn)的疾病模型，我們會(huì)與客戶緊密協(xié)作，認(rèn)真理解和把握需求，制定科學(xué)合理的手術(shù)模型造模方案。希望我們提供的專業(yè)且穩(wěn)定的手術(shù)模型服務(wù)可以節(jié)省您的時(shí)間和精力，讓您可以聚焦到科學(xué)創(chuàng)新性的工作上來(lái)。服務(wù)優(yōu)勢(shì)1.以實(shí)驗(yàn)“可重復(fù)”作為服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)我們以實(shí)驗(yàn)“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)技術(shù)團(tuán)隊(duì)進(jìn)行大量的手術(shù)模型操作訓(xùn)練，確保疾病模型多個(gè)批次之間數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。2.一站式服務(wù)。特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是臨床上具有代表性的一種慢性纖維化性肺。云南模式動(dòng)物模型

卵巢早衰（POF）是多種病因所致的卵巢功能衰竭。云南腦定位動(dòng)物模型構(gòu)建

    糖尿病足大鼠模型【目的】構(gòu)建糖尿病足大鼠模型；【材料】1、材料：STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉；2、試劑配制：1）檸檬酸納緩沖液配制：A液十B液=1:，PH=；A液:檸檬酸mL；B液:朽檬酸三納2）STZ液配制:55mg/kg（避光，現(xiàn)配現(xiàn)用10min內(nèi)注射)；3、糖尿病模型構(gòu)建方法：1）大鼠術(shù)前禁食12h；2）按55ug/g注射.連續(xù)3天注射，對(duì)照組注射檸檬酸緩沖液，造模組注射STZ液，注射后不禁水、禁食2-4h；3）STZ注射結(jié)束5天后空腹測(cè)血糖，血糖值高于12mmol/L選入實(shí)驗(yàn)組；【方法】方法一：細(xì)菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時(shí)，后足背側(cè)注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液，造成糖尿病肢端的動(dòng)物模型；2、后續(xù)觀察傷口情況；方法二：皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術(shù)剪做一個(gè)圓形皮膚創(chuàng)口，直徑5mm；2、后續(xù)每日觀察傷口情況，作好記錄。云南腦定位動(dòng)物模型構(gòu)建

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