四川樣本細(xì)胞培養(yǎng)基檢測(cè)

    Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來(lái)又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長(zhǎng)快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要，隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。 DMEM 培養(yǎng)基擁有多種配方，低葡萄糖濃度（1g/L）的配方，溫柔呵護(hù)對(duì)高糖敏感的細(xì)胞。四川樣本細(xì)胞培養(yǎng)基檢測(cè)

    RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國(guó)紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開(kāi)發(fā)出來(lái)的，RPMI是該研究所開(kāi)發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號(hào)。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，采用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基**初是為淋巴細(xì)胞培訓(xùn)專門設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已普遍應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和惡性**的培養(yǎng)，包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和惡性**，是采用極其普遍的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比之下其他培養(yǎng)基之所以具與眾不同的功效，是因?yàn)槠渲懈缓€原劑谷胱甘肽和高濃度的維他命。RPMI1640培養(yǎng)基包含生物素、維他命B12以及PABA，這些成份是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對(duì)普遍的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的RPMI1640改進(jìn)培養(yǎng)基。吉林醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠Ham’s F-12營(yíng)養(yǎng)混合物（Ham’s F-12 Nutrient Mixture）是由Ham以Ham’s F-10營(yíng)養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)而成的。

    Ham’sF-12營(yíng)養(yǎng)混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）Ham’sF-12營(yíng)養(yǎng)混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）是由Ham在1969年以Ham’sF-10營(yíng)養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)而成的，初用于CHO細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，在低血清含量下時(shí)，特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)，添加血清后也廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng)，如大鼠肝細(xì)胞、大鼠前列腺上皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、大鼠成肌細(xì)胞、雞胚胎細(xì)胞等。此外，Ham’sF-12與DMEM等體積混合后，得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)更為豐富，使用更為較廣。Ham’sF-12營(yíng)養(yǎng)混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必要的一種營(yíng)養(yǎng)，但其在溶液中不安定，會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對(duì)細(xì)胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞運(yùn)用其機(jī)制是：在細(xì)胞培訓(xùn)時(shí)，細(xì)胞會(huì)日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收運(yùn)用。細(xì)胞運(yùn)用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過(guò)程與流加培養(yǎng)方針相像，連續(xù)的將低濃度水準(zhǔn)的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會(huì)生成剩余的氨，更有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細(xì)胞，幾乎無(wú)須適應(yīng)，并且可以延長(zhǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間，縮減傳代次數(shù)，即節(jié)約了時(shí)間也節(jié)省了錢財(cái)。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓(xùn)的細(xì)胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長(zhǎng)的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時(shí)間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細(xì)胞培育時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非須要氨基酸的副作用，有效性推動(dòng)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來(lái)又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型）。

    1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強(qiáng)，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜，來(lái)源受限且制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。MCDB 131培養(yǎng)基不同于傳統(tǒng)培養(yǎng)基之處在于，其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤及更高濃度的氨基酸和維生素。黑龍江細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供

McCoy’s 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細(xì)胞建系，以及一些淋巴細(xì)胞和較難培養(yǎng)的細(xì)胞的培養(yǎng)。四川樣本細(xì)胞培養(yǎng)基檢測(cè)

    Grace’s昆蟲(chóng)培養(yǎng)基是由Grace改良的Wyatt培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基與昆蟲(chóng)血淋巴的化學(xué)成分更為相近，Grace使用這種培養(yǎng)基成功建立了***個(gè)昆蟲(chóng)連續(xù)細(xì)胞系。Grace’s昆蟲(chóng)培養(yǎng)基**初用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)細(xì)胞的培養(yǎng)，適當(dāng)補(bǔ)充添加劑后，Grace’s昆蟲(chóng)培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)各種昆蟲(chóng)細(xì)胞，包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲(chóng)的細(xì)胞。本產(chǎn)品含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽等多種成分，但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長(zhǎng)因子，故此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。Grace’s補(bǔ)充昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)的細(xì)胞生長(zhǎng)。Grace’s補(bǔ)充昆蟲(chóng)培養(yǎng)基目前***用于草地貪夜蛾細(xì)胞Sf9和Sf21的生長(zhǎng)。Sf9和Sf21細(xì)胞常規(guī)使用于桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)(BEVS)表達(dá)重組蛋白。本產(chǎn)品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。Grace’s補(bǔ)充昆蟲(chóng)培養(yǎng)基含有Grace’s昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基（PM152011）中不常見(jiàn)的水解乳蛋白和酵母粉，此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。 四川樣本細(xì)胞培養(yǎng)基檢測(cè)

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