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卵母細(xì)胞紡錘體對(duì)低溫環(huán)境極為敏感,冷凍過程中可能發(fā)生的冰晶形成、溶液濃縮等物理化學(xué)變化均會(huì)對(duì)紡錘體造成損傷,導(dǎo)致其形態(tài)異常、穩(wěn)定性下降。在冷凍和解凍過程中,紡錘體微管可能發(fā)生解聚和重聚,這一過程不僅影響紡錘體的形態(tài),還可能破壞其內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能,進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能。為了減輕冷凍損傷,研究者們嘗試在冷凍液中添加細(xì)胞骨架保護(hù)劑,如紫杉醇等。然而,保護(hù)劑的選擇、濃度及作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究和優(yōu)化。紡錘體微管與染色體上的動(dòng)粒結(jié)合,形成穩(wěn)定的連接。美國(guó)成熟卵母細(xì)胞紡錘體價(jià)格
紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時(shí),**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí),通常認(rèn)為,卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處,然后在3點(diǎn)處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動(dòng),或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測(cè)儀,可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道,在進(jìn)行ICSI時(shí),觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。武漢無損觀察紡錘體廠家紡錘體微管與細(xì)胞內(nèi)的其他細(xì)胞器存在復(fù)雜的相互作用。
冷凍電鏡技術(shù)(Cryo-EM)近年來在結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域取得了重大突破,也為紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角。通過將生物樣品冷凍至極低溫并在電子顯微鏡下進(jìn)行觀察和成像,冷凍電鏡能夠揭示生物大分子的高分辨率結(jié)構(gòu),包括紡錘體微管等精細(xì)結(jié)構(gòu)。這一技術(shù)不僅克服了傳統(tǒng)電鏡技術(shù)對(duì)樣品制備的嚴(yán)格要求,還能夠在接近生理狀態(tài)下觀察紡錘體的形態(tài)和功能,為無損觀察紡錘體提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。無損觀察紡錘體技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍保存的效果。通過對(duì)比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,研究者可以優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度,以及改進(jìn)冷凍程序,減少冷凍損傷,提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。
隨著科技的不斷發(fā)展,無損觀察技術(shù)將不斷得到優(yōu)化和創(chuàng)新。未來有望開發(fā)出更加便捷、高效、低成本的成像設(shè)備,進(jìn)一步降低設(shè)備成本并提高操作簡(jiǎn)便性。同時(shí),通過優(yōu)化成像算法和數(shù)據(jù)處理技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)對(duì)紡錘體形態(tài)變化的更精細(xì)、更準(zhǔn)確的評(píng)估。無損觀察紡錘體卵冷凍研究涉及生殖醫(yī)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、材料科學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。未來通過加強(qiáng)不同學(xué)科之間的交叉融合和協(xié)同創(chuàng)新,可以推動(dòng)該領(lǐng)域取得更多突破性進(jìn)展。例如,結(jié)合分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的研究成果,可以進(jìn)一步揭示紡錘體在卵母細(xì)胞發(fā)育和受精過程中的作用機(jī)制。紡錘體的形成需要多種蛋白質(zhì)的參與,包括微管相關(guān)蛋白和中心體蛋白等。
解凍后的卵母細(xì)胞在無損觀察技術(shù)的支持下,可以直接進(jìn)行紡錘體觀察,無需進(jìn)行任何形式的固定和染色處理。這一技術(shù)能夠迅速評(píng)估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量,包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo),為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考。無損觀察紡錘體技術(shù)已逐步應(yīng)用于臨床輔助生殖技術(shù)中。醫(yī)生可以在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下,通過該技術(shù)評(píng)估其質(zhì)量并選擇合適的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精和胚胎移植。這不僅提高了妊娠率和胚胎質(zhì)量,還減少了因卵母細(xì)胞質(zhì)量不佳而導(dǎo)致的移植失敗和流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)。紡錘體微管的排列和穩(wěn)定性受到細(xì)胞骨架的支撐。香港成熟卵母細(xì)胞紡錘體Oosight Basic
紡錘體微管的正極朝向細(xì)胞兩極,負(fù)極則靠近染色體。美國(guó)成熟卵母細(xì)胞紡錘體價(jià)格
紡錘體觀測(cè)儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道,成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后,精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,隨著時(shí)間的推移,卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極,進(jìn)而排出第二極體,再往后大約加精后9-16小時(shí),雌雄原核會(huì)出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對(duì)于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗,發(fā)現(xiàn)沒有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI,往往錯(cuò)過了卵子的比較好受精時(shí)間,因?yàn)闆]有受精的卵子會(huì)在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們?cè)诩泳蟮?-6小時(shí),通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。當(dāng)然,偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救,實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測(cè)儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個(gè)紡錘體,17.3%含有兩個(gè)紡錘體,并對(duì)含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI;而對(duì)照組并未用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體,只對(duì)未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn),使用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。美國(guó)成熟卵母細(xì)胞紡錘體價(jià)格