通過結(jié)果的生物學(xué)意義對結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進(jìn)行比較,其結(jié)果為:采用同一個(gè)測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動(dòng)精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精I(xiàn)VF)的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗(yàn)證CASA測定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時(shí)的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。廣州馬精子分析高準(zhǔn)確率
通過比較進(jìn)行質(zhì)量評估1.室內(nèi)比較是采用同一個(gè)標(biāo)本在同一參數(shù)下?經(jīng)CASA多次測定后?應(yīng)用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法對測得數(shù)值進(jìn)行比較。在男科實(shí)驗(yàn)室中對CASA系統(tǒng)的質(zhì)量控制通常使用影像磁帶或完全相同的凍存**標(biāo)本進(jìn)行日間比較。當(dāng)室內(nèi)比較作為結(jié)果質(zhì)量的一種評估時(shí)?計(jì)算機(jī)中數(shù)值的在線獲得是極具優(yōu)勢的。2.室間比較要求標(biāo)本向其他幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)送文獻(xiàn)中的一些報(bào)道闡述了該方面的經(jīng)驗(yàn)但是運(yùn)動(dòng)精子是不能在不受限制的條件下運(yùn)輸?shù)膶⑵渲糜谝旱羞\(yùn)送需進(jìn)一步考慮更多的因素(解凍技術(shù)、標(biāo)本的處理等)這些因素會(huì)影響活動(dòng)力參數(shù);到目前為止室間比較的研究還未見滿意報(bào)道;Jorgensen等進(jìn)行了研究嘗試克服實(shí)驗(yàn)室間運(yùn)送解凍標(biāo)本的困難其研究方式是:邀請四個(gè)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員攜帶各自的儀器到同一個(gè)地點(diǎn)以各自通常采用的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行精子評估但未見明確的結(jié)論。3.對于精子活力測定CASA系統(tǒng)的測定與直觀評估的比較有文獻(xiàn)進(jìn)行了報(bào)道但結(jié)果并不相同。認(rèn)為直觀評估揭示標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值且其差異是由CASA系統(tǒng)的錯(cuò)誤引起的該觀點(diǎn)是不正確的;無論從理論上還是實(shí)踐中CASA數(shù)值比直觀評估所獲得的數(shù)值更接近于真值;對直線前進(jìn)的精子比例而言這一點(diǎn)是非常正確的。CASA精子分析精子動(dòng)力分析全自動(dòng)精子分析儀極大提高臨床檢驗(yàn)水平,廣泛應(yīng)用于泌尿科,男性科以及計(jì)劃生育、優(yōu)生優(yōu)育研究等。
美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺(tái),進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個(gè)批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn),但是很多因素都會(huì)影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時(shí)間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計(jì)的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗(yàn)科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計(jì)數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時(shí)間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時(shí)間的延長,精子活動(dòng)力及活動(dòng)率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進(jìn)行分析。(7)檢測精子活動(dòng)力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會(huì)增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域,精子質(zhì)量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。
九、精液酸堿度(pH)檢查[正常參考值]7.2-8.0。[臨床意義]1.精液pH值<7.0,多見于少精或無精癥,常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變等。2.精液pH值>8.0,常見于急性***,如精囊炎、前列腺炎等。十、男性生育力指數(shù)測定[計(jì)算公式]I=M(N×V)/(A×106)式中I為男性生育力指數(shù);M為活動(dòng)精子百分率;N為每毫升的精子數(shù);V為精子運(yùn)動(dòng)的速度;A為畸形精子的百分率。[正常參考值]正常人生育力指數(shù)>l。[臨床意義]1.生育指數(shù)為0,表明完全無生育能力。2.生育指數(shù)為0-1之間,表明有不同程度的生育障礙。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),擺動(dòng)性(WOB)?:實(shí)際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動(dòng)值。廣州兔子精子分析VAP
IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動(dòng)識(shí)別和計(jì)算精子的各項(xiàng)參數(shù),減少了人工操作的誤差。廣州馬精子分析高準(zhǔn)確率
1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實(shí)驗(yàn)室,任何開展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法,但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動(dòng)率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運(yùn)動(dòng)精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級,第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動(dòng)、慢速前向運(yùn)動(dòng)、非前向運(yùn)動(dòng)和不活動(dòng)4個(gè)活力級別,但精子活動(dòng)率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(dòng)(PR)、非前向運(yùn)動(dòng)(NP)、不活動(dòng)(IM)3個(gè)活力級別計(jì)算。第6版手冊強(qiáng)調(diào),精子形態(tài)學(xué)評估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?!毙螒B(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個(gè)精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明;廣州馬精子分析高準(zhǔn)確率