CASA,即計算機輔助精子分析,是一種利用技術手段對精子活力、濃度和形態(tài)進行精確評估的方法。WHO第五版指南強調(diào),相比人工檢測,CASA提供更準確的數(shù)據(jù)和精子動力學參數(shù),如前向運動和超活化運動,以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學分析。但要確??煽拷Y果,操作者需注意標本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進行兩次分析,每次至少200個精子,結果通過統(tǒng)計學分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性。精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。上海瀕危物種精子分析
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準確性。CASA系統(tǒng)進行**分析應注意以下幾點:3.1標本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應于分析儀恒溫板上預溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標本密度應控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標本。南京CASA精子分析VCL電腦全自動精子采集分析儀是一款高科技醫(yī)療設備,它巧妙地融合了現(xiàn)代計算機技術和自動控制技術。
CASA系統(tǒng)進行**分析應注意以下幾點:3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)?,對亮度和對比度要求特別高,檢測時應多次試用,尋找能準確識別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準確性受**中細胞成份和非精子的顆粒物質的干擾,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質的影響[9],這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認為精子的非精子成分,如精原細胞、白細胞和非白細胞顆粒等,可人為準確記數(shù)后在可刪除雜質一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結果應間隔復查反復檢查2?3次方能得出比較正確的結果。3.4對于無精子的患者應仔細進行視野檢查注意不要將雜質誤認為精子計數(shù)在內(nèi),應將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認無精后再出報告。
測定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計數(shù)和全自動分析。1.顯微鏡計數(shù):這是傳統(tǒng)的測定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,應在實驗室中盡快進行計數(shù)。應在光學顯微鏡下將精子進行分類,這一步非常重要,因為完整的精子才能被計數(shù)。然后,將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉,通過顯微鏡觀察并計數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗和技巧,而且受到許多因素的影響,如精子的活動性、濃度、形態(tài)等。2.全自動分析:隨著科技的發(fā)展,現(xiàn)在有全自動的精子分析儀,可以快速準確地測定精子密度和總數(shù)。這種方法通過激光技術進行,可以測量大量精子,包括前向運動的精子。這些儀器通??梢蕴峁└_的結果,并且減少了人為錯誤。在進行精子計數(shù)前,男性應避免長時間禁欲,因為這可能會影響精子的數(shù)量和質量。同時,健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質量。?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實際曲線運動的時均速率。
前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為,氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分,強調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質控要求,增加了CASA檢測精子超活化運動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內(nèi)容。精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率。廣州慢速運動精子分析W.H.O 4
精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較,具有速度快、量比性好、準確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。上海瀕危物種精子分析
世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版,以滿足臨床與科研對人類精液標準化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標準操作指南,旨在提高精液分析的質量和提高不同實驗室結果的可比性。在過去40年里,該手冊進行了4次修訂與補充(1987年、1992年、1999年和2010年),內(nèi)容涉及精液檢查的標準化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質量保證等,已成為國際公認的標準,被世界各地臨床和實驗室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結果,通過循證醫(yī)學研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實驗室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實驗室、醫(yī)院和研究機構使用的標準操作手冊。該手冊在國際大會、科學會議、以及WHO合作中心、專業(yè)學會和其他學術機構的培訓項目中進行了***傳播。截止到2021年,已被3000余篇同行評議論文和評論引用。上海瀕危物種精子分析