科研數(shù)字ELISA微量

來源: 發(fā)布時間:2025-07-18

   芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個酶產(chǎn)生的熒光團限制在極小范圍內(nèi),從而能夠檢測到非常低濃度的酶標記物體積(~50fL),導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實現(xiàn)這種定位,在第二步中,將珠子加載到一個陣列為離散的微升大小的孔(圖1C)。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個孔,孔徑為μm,孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下,用橡膠密封圈密封。Rissin等人,第3頁將每個微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物(圖1D)。通過使用標準顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時間變化熒光圖像,可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球(“開啟”孔)和不與酶相關(guān)的微球(“關(guān)閉”孔);顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個免疫復(fù)合物同時檢測。通過測定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對于含有珠子的孔數(shù)。使用SiMoA,濃度是因此,我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測單個免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。芯棄疾芯片可檢測血清中 NfL 等較低豐度神經(jīng)因子,助力阿爾茨海默癥早期篩查??蒲袛?shù)字ELISA微量

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創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。

通過在離散的飛升微孔陣列中分離和檢測單個免疫復(fù)合物,實現(xiàn)數(shù)字ELISA已使在亞細胞水平上測量血清中臨床重要的蛋白質(zhì)成為可能飛摩爾濃度。我們認為,與之前報道的方法相比,數(shù)字ELISA表現(xiàn)出的不敏感性改善將轉(zhuǎn)化為診斷上的好處。例如,在本研究中測定的30個RP樣品中有9個樣品的PSA水平低于基于納米顆粒標簽的先前比較高靈敏度PSA測定的LOD17。 單分子檢測數(shù)字ELISA使用速度數(shù)字 ELISA 芯片生物相容性優(yōu)異,表面處理減少蛋白吸附,保障復(fù)雜樣本檢測穩(wěn)定性。

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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA具有超敏的優(yōu)點:

檢測方法為陣列成像。陣列成像涉及對陣列中的每個孔進行檢測以確定是否存在微球并判斷微球是否具有酶活性。為此,開發(fā)了一種圖像分析軟件,該軟件首先創(chuàng)建一個陣列的“掩?!保远x孔定位和邊界進行檢測。然后將孔掩模應(yīng)用于陣列的熒光圖像,以確定孔內(nèi)微球和酶的存在。對于陣列的熒光圖像,當進行多重檢測時,會生成微球群體或微球亞群的熒光強度直方圖。直方圖中的峰值自動識別并用于確定微球群體。

   芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學(xué)和抑制作用。我們的目標是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標記的單個蛋白質(zhì)分子。在這個單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標記復(fù)合物)與微球的比例很?。ㄍǔP∮?:1),因此含有標記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個微球上進行標記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標準檢測技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標簽,因為熒光染料由每種酶生成的產(chǎn)物擴散到一個大卵試驗體積(通常為),并進入其中需要數(shù)十萬種酶標簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號背景??贵w篩選芯片高效篩選抗體配對,5μl 樣本即可測試多種組合,縮短研發(fā)周期。

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抗體配對篩選的成本與效率優(yōu)化,抗體篩選芯片通過高密度檢測區(qū)設(shè)計與微量樣本技術(shù),大幅降低抗體開發(fā)的時間與物料成本。傳統(tǒng)方法中,49種抗體配對需多次實驗,耗時數(shù)天且消耗數(shù)百微升樣本;而芯片技術(shù)*需1小時、5μl樣本即可完成初步篩選,成本降低70%以上。其單通道多指標并行檢測能力,支持不同反應(yīng)條件(如pH、溫度)的同步測試,快速篩選出比較好配對組合。在**標志物抗體開發(fā)中,該芯片可同時評估親和力、特異性與交叉反應(yīng)性,加速診斷試劑盒的研發(fā)進程,尤其適合初創(chuàng)企業(yè)與科研機構(gòu)的高效篩選需求,推動抗體工程從試錯性實驗向精細化篩選轉(zhuǎn)型。單分子陣列化結(jié)構(gòu)使每個磁珠成為反應(yīng)單元,放大信號,降低檢測下限。單分子蛋白數(shù)字ELISA購買靈活

POCT 芯片卡片式設(shè)計占地小,全自動化操作,適用于院前急救、EICU 等緊急場景。科研數(shù)字ELISA微量

數(shù)字ELISA芯片的標準化生產(chǎn)與質(zhì)量控制,依托自研的單分子PDMS芯片產(chǎn)線,數(shù)字ELISA芯片實現(xiàn)了從材料制備到成品質(zhì)檢的全流程標準化。硅模制備精度控制在±1μm,確保磁珠捕獲結(jié)構(gòu)的一致性;PDMS預(yù)聚體真空脫氣處理消除氣泡干擾,鍵合強度>3MPa保障反應(yīng)體系密封。成品質(zhì)檢環(huán)節(jié)通過熒光顯微鏡與自動計數(shù)系統(tǒng),對磁珠捕獲率(>95%)、熒光背景值(<500RLU)進行100%全檢,良品率穩(wěn)定在98%以上。標準化生產(chǎn)流程不僅保障了芯片性能的批次間一致性,更通過SPC統(tǒng)計過程控制持續(xù)優(yōu)化工藝,為臨床大規(guī)模應(yīng)用提供了可靠的質(zhì)量保證,推動數(shù)字ELISA技術(shù)從實驗室走向產(chǎn)業(yè)化??蒲袛?shù)字ELISA微量