臨床流式細(xì)胞分析 百度云

來源: 發(fā)布時間:2023-04-20

酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)技術(shù)優(yōu)勢(1)單細(xì)胞水平,活細(xì)胞功能檢測:彌補了體液中CK半衰期短的不足,當(dāng)體液中某CK含量較低時,用ELISPOT法檢測具有較高靈敏性。(2)操作簡便經(jīng)濟,可以進行高通量篩選:既可檢測自發(fā)分泌細(xì)胞,又可檢測抗原特異性CK分泌細(xì)胞,具有較高特異性,并可觀察藥物治療反應(yīng),且使對CSF中T、B細(xì)胞研究成為可能,對神經(jīng)免疫疾病發(fā)病機制研究及臨床療效觀察均有重要價值。(3)靈敏度高:在一百萬個陰性細(xì)胞中只要有一個分泌細(xì)胞因子的陽性細(xì)胞即可被檢測出來。靈敏度比傳統(tǒng)ELISA方法高2-3個數(shù)量級。MSD作為現(xiàn)階段靈敏度較高的檢測技術(shù),常用于常規(guī)生物標(biāo)志物檢測和信號通路研究。臨床流式細(xì)胞分析 百度云

LUMINEX常見問題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開發(fā),臨床檢測等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對于同樣的抗體對,Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul,每次可以檢測多個蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測,制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息?檢測蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測目前可以達到50個左右,基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結(jié)果的特異性?檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產(chǎn)品經(jīng)過了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時,我們檢測公司也有近15年的經(jīng)驗、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。ros 信號通路LabEx 免疫組化平臺:包埋,切片,染色,多重?zé)晒饨M化,以及病理分析(HALO)。

LUMINEX常見問題及解答(二)6)客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測?Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發(fā)Luminex試劑盒的經(jīng)驗。但是,需要一系列的開發(fā)工作才能保證結(jié)果的特異性、重復(fù)性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測?可以用于基因表達,基因多態(tài)性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達水平差異有無意義?表達差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計服務(wù)。9)LUMINEX實驗和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù),檢測對象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。由此可見,兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。

LabEx生物可提供數(shù)千種檢測指標(biāo)的定制服務(wù),其中Human檢測指標(biāo)多達上千個,Mouse、Rat檢測指標(biāo)數(shù)百個多組合panel可選。研究人員可以根據(jù)檢測列表,任意選擇感興趣的指標(biāo)交給LabEx生物進行定制搭配。公司現(xiàn)有PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、流式、免疫組化等12個技術(shù)平臺。通過線下和線上的方式為超過1000個客戶提供服務(wù),年檢測樣本超過20萬,受到了廣大客戶的贊賞。LabEx繼承優(yōu)寧維的向正、向善、向上的價值觀,我們的愿景是“服務(wù)加速研究-SpeedUpResearch”,努力為廣大客戶提供專業(yè)、安全的實驗室服務(wù),成為你科研的得力助手!LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率測定。

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果,抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng),必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復(fù)不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復(fù)。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細(xì)胞通透不全,抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應(yīng)。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。本panel可檢測以下因子:Adiponectin,IL-6,Leptin,MCP-1,PAI-1 (Total),Resistin,TNF-α 種屬:Mouse。視黃酸信號通路

本panel可檢測以下因子:A2M,AGP 種屬:Rat。臨床流式細(xì)胞分析 百度云

流式多因子檢測技術(shù)(CBA)微球免疫分析系統(tǒng)CBA(CytometricBeadArray)是一個基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標(biāo)進行檢測。CBA是種結(jié)合流式細(xì)胞儀熒光檢測和微球免疫分析的應(yīng)用技術(shù),可以輕松的在短時間內(nèi),同時檢測多種蛋白,其作用原理利用熒光強度不同的微球,上面帶有可以辨認(rèn)特定蛋白的抗體(captureantibody),與樣本(例如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液等)及PE檢測抗體(detectionantibody)作用后,以流式細(xì)胞儀進行分析,根據(jù)PE熒光強度的不同用FCAPArray軟件進行分析和標(biāo)準(zhǔn)品做比對后,可進行樣本內(nèi)特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下優(yōu)點:每次檢測需25-50ul樣本;靈敏度可達0.274pg/ml時間t夬速,需3-4小時,快速上樣可同時測定30種蛋白,實驗可重復(fù)性高利用FCAPArray軟件,不論樣本數(shù)目多少,可快速分析完成分析臨床流式細(xì)胞分析 百度云

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