免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類,初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,有時(shí)淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,這同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個(gè)抗體。如果您有實(shí)驗(yàn)外包的需求,可以與我們南京英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系,我們也有做免疫組化的服務(wù)!英瀚斯生物,專業(yè)病理老師負(fù)責(zé)免疫組化外包!青海動(dòng)物組織免疫組化檢測(cè)
免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用?
定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢(shì)。相比于其他蛋白檢測(cè)方法,免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高,是定位檢測(cè)分析優(yōu)先方法,尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位;對(duì)某類**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供治療方案的選擇;近年來,隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。
內(nèi)蒙古靠譜免疫組化要多久做免疫組化意味什么?
免疫組化的抗體選擇
抗體是免疫組化實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。選擇合適的一抗需要考慮其特異性、靈敏度和適用性。特異性是指抗體只與目標(biāo)蛋白結(jié)合,而不與其他蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。靈敏度是指抗體能夠檢測(cè)低豐度的目標(biāo)蛋白。適用性是指抗體適用于免疫組化實(shí)驗(yàn),而不是其他實(shí)驗(yàn)(如Western blot)。此外,免疫組化實(shí)驗(yàn)中還需要考慮抗體的宿主物種、克隆性和濃度。免疫組化二抗的選擇則需要考慮其與一抗的匹配性,以及是否帶有顯色或熒光標(biāo)記。
免疫組化分類中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。免疫組化流程是什么樣的?
免疫組化的抗原修復(fù)
很多抗原的可視性可以通過抗原修復(fù)來提高,抗原修復(fù)可以打破福爾馬林固定時(shí)形成的蛋白質(zhì)交聯(lián),從而使被掩藏的抗原顯現(xiàn)出來。抗原修復(fù)技術(shù)包括不同時(shí)間長(zhǎng)度的加熱或者利用蛋白酶來做酶消化,例如蛋白酶K,胰蛋白酶或胃蛋白酶。加熱的方法通常會(huì)用到微波爐,高壓鍋,蒸箱或水浴。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時(shí)間。**常用的抗原修復(fù)液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復(fù):檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0將含有檸檬酸鈉或檸檬酸鹽緩沖劑的染色盤放到蒸箱或者水浴中,預(yù)熱到95-100°C。將切片浸沒于染色盤中。蓋子虛掩,孵育20-40分鐘(研究者需自己決定比較好的孵育時(shí)間)。關(guān)掉蒸箱或水浴,將染色盤置于室溫下,讓切片冷卻20分鐘。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次,每次2分鐘。開始封閉步驟。 常見的免疫組化方法有哪些??jī)?nèi)蒙古靠譜免疫組化要多久
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免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對(duì)其染色結(jié)果的判斷,進(jìn)而影響病理診斷,所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),密切配合和共同努力,病理醫(yī)生選擇抗體,設(shè)置對(duì)照,判讀結(jié)果,指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過程存在多個(gè)環(huán)節(jié),每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測(cè)結(jié)果,如抗原保存,蛋白酶消化,增強(qiáng)技術(shù)及對(duì)抗體的管理、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果。青海動(dòng)物組織免疫組化檢測(cè)