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免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用?
定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢(shì)。相比于其他蛋白檢測(cè)方法,免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高,是定位檢測(cè)分析優(yōu)先方法,尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位;對(duì)某類**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供治療方案的選擇;近年來,隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。
免疫組化結(jié)果分析是什么?四川切片免疫組化是什么
免疫組化實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)總結(jié):
?本實(shí)驗(yàn)室所用切片一般是石蠟切片。
?烘片:使蠟片水分蒸發(fā),石蠟軟化,組織切片牢固貼在玻片上;烘片至跟烘片前透明度有差異。
?抗原修復(fù)時(shí),使片子始終浸沒在修復(fù)液中,液體不能干。
?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱,濕盒放置1h,省時(shí)間和結(jié)合效果好,不要超過1h,容易過染。
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?二抗使用:兩個(gè)二抗放大信號(hào)或一個(gè)二抗;若抗體信號(hào)強(qiáng),可不用放大信號(hào),盡量增大信噪比。
?10XDAB在常溫溶解,盡可能現(xiàn)用現(xiàn)配,放于4度儲(chǔ)存時(shí)間久了效果不佳。
?復(fù)水和脫水時(shí)所用的梯度酒精不可混用,要區(qū)分開。
?加抗體和顯色液時(shí),都要將片子甩干,在半干半濕的狀態(tài)下再加,不然容易造成溶液的二次稀釋。
?整個(gè)操作過程中在顯色之前,一定不能干片。 江西動(dòng)物組織免疫組化免疫組化IHC詳細(xì)介紹!
免疫組化的應(yīng)用領(lǐng)域
免疫組化在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用。在**學(xué)中,免疫組化通常被用于**標(biāo)志物的檢測(cè),幫助確定**的類型、分級(jí)和預(yù)后。例如,免疫組化通過檢測(cè)ER、PR和HER2的表達(dá),可以指導(dǎo)乳腺*的治療方案。在神經(jīng)科學(xué)中,免疫組化用于研究神經(jīng)元的分布和功能。在免疫學(xué)中,免疫組化可以用于檢測(cè)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞在組織中的分布和水平。此外,免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。
免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片?
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是***我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,可能會(huì)破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),可能會(huì)使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時(shí),目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
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做免疫組化時(shí)如何選擇一抗?
1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一個(gè)抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中,一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等避免)。
2、應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至標(biāo)明石蠟切片或冰凍切片。
3、種屬反應(yīng)性的選擇(speciesreactivity)。這一點(diǎn)很重要,表明這種抗體可能存在種屬差別,且這種抗體適合檢測(cè)哪種種屬動(dòng)物體內(nèi)的抗原。
4、種屬來源,一般兔來源的多是多克隆抗體;而小鼠來源的多是單克隆抗體,但也有另外。根據(jù)此來源來選擇相應(yīng)的二抗。
5、生產(chǎn)廠家的選擇。
免疫組化方法步驟是什么?寧夏免疫組化外包
常見的免疫組化方法有哪些?四川切片免疫組化是什么
在臨床應(yīng)用中,免疫組化還可以進(jìn)一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對(duì)cancer進(jìn)行分類很困難。如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細(xì)胞cancer,兩者較難區(qū)別,且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,但用免疫組化檢測(cè)角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞cancer,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。四川切片免疫組化是什么