翌科生物siRNA產(chǎn)品使用說(shuō)明常規(guī)化學(xué)合成siRNA為21~23nt的雙鏈的小分子RNA,產(chǎn)品為凍干粉形式的即用型試劑。運(yùn)輸保存:產(chǎn)品以?xún)龈煞鄣男问匠剡\(yùn)輸,收到產(chǎn)品后,請(qǐng)于-20℃~-80℃保存,凍干粉可以穩(wěn)定保存2年。使用前瞬時(shí)離心,用RNase-freeH2O或滅菌ddH2O配制成20ul儲(chǔ)存液,分裝保存,避免反復(fù)凍融(不超過(guò)5次)。使用須知:1)siRNA呈輕干膜狀附在管壁上,打開(kāi)管子請(qǐng)先離心,溶解時(shí)請(qǐng)加足量RNase-freeH2O或滅菌ddH2O后蓋上管蓋,震蕩溶解。2)避免外界因素(包括酶,極端PH或者溫度條件等)導(dǎo)致產(chǎn)品降解,所有操作請(qǐng)嚴(yán)格遵循RNA操作規(guī)則。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,產(chǎn)品更好干冰上放置,使用完畢后請(qǐng)于-20℃~-80℃保存。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法為了降低細(xì)胞密度,試劑使用量,轉(zhuǎn)染效率等因素導(dǎo)致的空間差異,保證實(shí)驗(yàn)的可靠性和可重復(fù)性建議:1)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中每個(gè)轉(zhuǎn)染樣品至少設(shè)置3個(gè)復(fù)孔;2)接種細(xì)胞量盡量保持一致,細(xì)胞在空中呈平均分布。1.轉(zhuǎn)染濃度1)為獲得更佳基因阻斷效果,每種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染siRNA的量需要經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。如果您是***次轉(zhuǎn)染細(xì)胞,推薦使用幾個(gè)lipofectamineTM2000的濃度。并在20-100nM范圍內(nèi)改變siRNA的濃度,以確定更佳的阻斷效果。高濃度的siRNA可能具有細(xì)胞系依賴(lài)性。南京江寧區(qū)RNA哪家便宜?無(wú)錫RT-PCRRNA提取試劑
2014):."Broad-spectrumtherapeuticsuppressionofmetastaticmelanomathroughnuclearhormonereceptoractivation."Cell5(2014):."Pyrimidinehomeostasisisaccomplishedbydirectedoverflowmetabolism."Nature7461(2013):,公司總部位于加拿大,是一家***中外的生物技術(shù)公司,生產(chǎn)基于**技術(shù)的核酸和蛋白質(zhì)純化及富集產(chǎn)品用于研究和診斷。NorgenBiotek在2003年獲得加拿大國(guó)家研究委員會(huì)頒發(fā)的科技創(chuàng)新獎(jiǎng),是一家致力于樣品制備并獲得ISO9001(產(chǎn)品質(zhì)量)、ISO13485(產(chǎn)品可用于商業(yè)化的醫(yī)療設(shè)備,包括用于體外診斷領(lǐng)域)和ISO15189(可用于臨床檢測(cè)機(jī)分子診斷領(lǐng)域的研發(fā)能力)認(rèn)證的生物科技公司。艾美捷科技與國(guó)內(nèi)外***的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多聞名中外品牌的中國(guó)總代理或一級(jí)代理,主要包括:Abbkine、MerckMillipore、Origene、AATBioquest、CaymanChemical、Abnova、Biovision、ProSpec、HycultBiotech、Equitech-Bio、Trevigen、AlomoneLabs、Epigentek、ImmunoReagents、Jackson、SouthernBiotech、USBiological、CaissonLabs等,可以在***時(shí)間為用戶(hù)提供前沿的專(zhuān)業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)?;窗瞫iRNARNA測(cè)試比較好的公司有哪幾個(gè)?
200)總RNA中/大量提取試劑盒R6754-00Ultra-PureTotalRNAMidiKit(2)R6754-01Ultra-PureTotalRNAMidiKit(10)R6754-02Ultra-PureTotalRNAMidiKit(25)R6755-00Ultra-PureTotalRNAMaxiKit(2)R6755-01Ultra-PureTotalRNAMaxiKit(5)R6755-02Ultra-PureTotalRNAMaxiKit(20)mRNA提取試劑盒R6842-00mRNAKit(5)R6842-01mRNAKit(50)R6842-02mRNAKit(200)總DNA/RNA共提取試劑盒R6731-00totalDNA/RNAIsolationKit(5)R6731-01totalDNA/RNAIsolationKit(50)R6731-02totalDNA/RNAIsolationKit(200)植物DNA\RNA共提取試劑盒R6733-00PlantDNA\RNAKit(5)R6733-01PlantDNA\RNAKit(50)R6733-02PlantDNA\RNAKit(200)DNARNA蛋白質(zhì)共提取試劑盒R6734-00DNARNAProteinKit(5)R6734-01DNARNAProteinKit(50)R6734-02DNARNAProteinKit(200)96孔板RNA提取試劑盒R1034-00EZ-96totalRNAKit(1x96)R1034-01EZ-96totalRNAKit(4x96)R1034-02EZ-96totalRNAKit(12x96)96孔板hp總RNA提取試劑盒R6813-00EZ-96hptotalRNAKit(1x96)R6813-01EZ-96hptotalRNAKit(4x96)R6813-02EZ-96hptotalRNAKit。
應(yīng)立即用大量的水沖洗并前往醫(yī)院***。2.請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作,避免RNase污染。3.需自備氯仿、異丙醇(新開(kāi)封或提取RNA**)、75%乙醇(DEPC處理水配制)、DEPC和DEPC處理水。4.樣品用TotalRNAExtractionReagent勻漿后,如果不加入氯仿進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn),可先-70℃凍存,可保存一個(gè)月以上。,4℃可保存1周,-20℃可保存1年。,易降解,建議抽提后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。7.本產(chǎn)品*作科研用途!參考用量表1.每毫升TotalRNAExtractionReagent能夠充分裂解的比較大樣本量.【注】:過(guò)多的樣本量可能會(huì)導(dǎo)致裂解不充分,并使產(chǎn)物純度降低。操作流程1.樣品的處理1)樣品勻漿A.貼壁細(xì)胞棄去培養(yǎng)液,直接往直徑cm的培養(yǎng)板中加入1mLTotalRNAExtractionReagent,覆蓋并反復(fù)吹打裂解細(xì)胞。【注】:①依據(jù)培養(yǎng)板的面積而不是細(xì)胞的數(shù)量來(lái)決定TotalRNAExtractionReagent的所需量(每10cm2加1mL)。②加入TotalRNAExtractionReagent量不足時(shí),會(huì)導(dǎo)致DNA污染。③貼壁細(xì)胞往往不能完全從培養(yǎng)瓶(皿)脫落,這并不意味著裂解不完全。此時(shí),細(xì)胞膜實(shí)際已完全裂開(kāi),并釋放RNA,繼續(xù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)即可。B.懸浮細(xì)胞離心收集細(xì)胞沉淀,每5×106-1×107個(gè)細(xì)胞加入1mLTotalRNAExtractionReagent。南京地區(qū)有哪些RNA測(cè)試公司。
2)在30-50%細(xì)胞匯合度時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染,通?;虺聊治鲋辽?4-72h進(jìn)行。低密度轉(zhuǎn)染細(xì)胞可使細(xì)胞轉(zhuǎn)染和分析間隔更長(zhǎng),從而使由于細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)造成的細(xì)胞活性過(guò)度損壞降到更低。根據(jù)靶基因的特性,高密度轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可能更加適合條件的優(yōu)惠。3)不要在轉(zhuǎn)染時(shí)的培養(yǎng)基中加入***,因?yàn)檫@將會(huì)將降低細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率和導(dǎo)致細(xì)胞死亡。4)為了獲得更好的結(jié)果,可以使用invitrogen的Opti-MEM低血清培養(yǎng)基在形成復(fù)合物前稀釋lipofectamineTM2000和siRNA??梢允褂脽晒鈽?biāo)記的siRNA幫助優(yōu)化細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染條件。一旦確定了用來(lái)轉(zhuǎn)染的更佳條件,可以在每一次實(shí)驗(yàn)都包括熒光標(biāo)記siRNA,作為轉(zhuǎn)染效率的指示劑。本產(chǎn)品只供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床***、食品及化妝品等用途2.轉(zhuǎn)染步驟以lipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染siRNA于24孔板,轉(zhuǎn)染濃度為50nM為例,其他規(guī)格容器轉(zhuǎn)染見(jiàn)表2。1)接種細(xì)胞:貼壁細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前24h,在400ul無(wú)***培養(yǎng)基中接種個(gè)細(xì)胞,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞融合度為30-50%。(注:鋪板時(shí)要將細(xì)胞消化完全混勻,避免細(xì)胞堆積生長(zhǎng)。)懸浮細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前24h,在400ul無(wú)***培養(yǎng)基中接種個(gè)細(xì)胞,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞數(shù)量4-8X105/孔。2)轉(zhuǎn)染步驟:A.用50ulOpti-MEM稀釋siRNA(轉(zhuǎn)染細(xì)胞的終濃度為50nM)。南京六合區(qū)RNA哪家便宜?淮安siRNA
RNA該如何選擇測(cè)試器械呢?無(wú)錫RT-PCRRNA提取試劑
不過(guò),這些核糖體的基本結(jié)構(gòu)和功能一致。[2]核酶科學(xué)家在研究RNA的轉(zhuǎn)錄后加工時(shí)發(fā)現(xiàn)某些RNA有催化活性,可以催化RNA的剪接,這些由活細(xì)胞合成、起催化作用的RNA稱(chēng)為核酶。許多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反應(yīng)也具有專(zhuān)一性。[2]已經(jīng)闡明的天然核酶有錘頭狀核酶、發(fā)夾狀核酶、I型內(nèi)含子、Ⅱ型內(nèi)含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基轉(zhuǎn)移酶等。如何評(píng)價(jià)核酶的理論意義與實(shí)際意義,如何看待核酶與傳統(tǒng)意義上的酶在代謝中的地位,都有待進(jìn)一步研究。[2]1.核酶發(fā)現(xiàn)核酶更早由Cech和Altman(1989年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)獲得者)發(fā)現(xiàn)。1967年,Woese、Crick與Orgel等基于RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度提出其可能有催化活性;1982年,Cech在研究四膜蟲(chóng)rRNA前體剪接時(shí)發(fā)現(xiàn)其內(nèi)含子有自我剪接活性;1983年,Altman在研究細(xì)菌tRNA前體時(shí)發(fā)現(xiàn)核糖核酸酶P中的MRNA參與tRNA前體轉(zhuǎn)錄后加工;1982年,Kruger等建議將有催化活性的RNA命名為“ribozyme(核酶)”。 無(wú)錫RT-PCRRNA提取試劑