南通熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽應用

來源: 發(fā)布時間:2022-07-14

    而是對于所有能夠產(chǎn)生螢光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發(fā)光反應。**為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的螢光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的螢光素酶,能夠催化同一螢光素底物,而發(fā)出不同顏色的螢光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,因此它們的螢光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用。如今研究得**透徹的螢光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。[1]螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉染到細胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強大的研究手段,可以對整個動物體中的細胞群落進行分析:將不同類型的細胞(骨髓干細胞、T細胞等)標記上(即表達)螢光素酶。熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。南通熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽應用

    海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分。熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素等物質(zhì)氧化發(fā)光的一類酶的總稱。自然界中,不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶,除了螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase)之外,還有發(fā)光細菌體內(nèi)的細菌熒光素酶、發(fā)光海星的海星熒光素酶等。目前,人們對螢火蟲熒光素酶的研究**多、應用***。一則關于手機上的細菌的新聞里,**在用ATP熒光檢測儀檢測手機表面的細菌。ATP是一種在動物、植物和細菌等活細胞中都存在的能量物質(zhì),由前述的反應式可知,ATP與熒光素、熒光素酶反應發(fā)出熒光。檢測樣品中的微生物越多,ATP就越多,熒光反應的光亮就越大。徐州游離酸D-熒光素鉀鹽南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。

    可用于需要低檢測限的測定具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速,簡單且均一的生物發(fā)光測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基的使用兼容高斯熒光素酶近年來,其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,因為這些報告基因較小,并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),可通過氧氣催化腔腸素氧化,產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達后可有效地從哺乳動物細胞中分泌出來。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒使用專有的發(fā)光配方來定量細胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當該試劑與高斯熒光素酶相互作用時,產(chǎn)***光產(chǎn)物,該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點:提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍光。與螢火蟲螢光素酶類似。

    SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級純()應用:1)體外化學發(fā)光分析(invitro);2)***成像實驗(invivo);3)高靈敏度ATP分析;步驟:Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,配制成100mM的儲存液(200×,濃度30mg/ml)?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2)用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析。Protocol2:Invivoanalysis/***成像分析1)用無菌的PBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應用于整個生物技術領域,尤其是體內(nèi)***成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光(見下圖)。當熒光素過量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉染入細胞后,導入研究動物如大、小鼠體內(nèi),之后注入熒光素,通過生物發(fā)光成像技術(BLI)來檢測光強度變化。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽測試價格。

    螢火蟲熒光素酶(Luciferase)是一種常用的信號分子,可以用來標記腫瘤細胞.一.細胞方法將帶有熒光素luc轉酶報告基因的真核表達重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7,利用G418篩選,獲得穩(wěn)染人乳腺哎細胞株MCF-7-luc,并在穩(wěn)定表達熒光素酶基因的細胞克隆MCF-7體外評價其發(fā)光能力。通過建立裸鼠移植瘤模型,利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長及轉移情況,為下一步監(jiān)測裸鼠移植瘤對藥物作用的變化情從而為分析藥物對腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定:37℃細胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml設置6個濃度梯度。在細胞接種24h后,加入6孔板中,每個濃度設2個孔在10~14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細胞生長情況,死亡更低的G418濃度,即為篩選質(zhì)粒轉染克隆MCF-7細胞的濃度。1)細胞轉染取對數(shù)生長期的MCF-7細胞,將細胞接種于6孔板內(nèi)待細胞融合度達到80%~90%孔培養(yǎng)板中,TM即可轉染。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進行轉染。在250μl無血清、無雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無血清、無雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000,室溫培育5min。將上述2種稀釋液混勻。D-熒光素有時候也叫游離酸。鎮(zhèn)江熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

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    酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級:BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(oC):3205.沸點(oC,常壓):未確定6.沸點(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,帶有強的綠色熒光,水溶性好。南通熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽應用