海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產生具有強光的產物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分。熒光素酶是生物體內催化熒光素等物質氧化發(fā)光的一類酶的總稱。自然界中,不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶,除了螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase)之外,還有發(fā)光細菌體內的細菌熒光素酶、發(fā)光海星的海星熒光素酶等。目前,人們對螢火蟲熒光素酶的研究**多、應用***。一則關于手機上的細菌的新聞里,**在用ATP熒光檢測儀檢測手機表面的細菌。ATP是一種在動物、植物和細菌等活細胞中都存在的能量物質,由前述的反應式可知,ATP與熒光素、熒光素酶反應發(fā)出熒光。檢測樣品中的微生物越多,ATP就越多,熒光反應的光亮就越大。南京翌科生物科技有限公司的D-熒光素鉀鹽測試怎么樣?揚州螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽供應商
luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyrali')。應用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。熒光增白劑ob-1價格D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。
可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達。熒光素酶報告基因有許多優(yōu)點:①非放射性;②比CAT及其他報告基因速度快;③比CAT靈敏100倍;④熒光素酶在哺乳細胞中的半衰期為3小時,在植物中的半衰期為3.5小時。由于半衰期短,故啟動子的改變會即時導致熒光素酶活性的改變,而熒光素酶不會積累。相反,CAT在哺乳細胞中的半衰期為50小時。熒光素酶濃度在10—16mol/L(10pS/L)到10-8mol/L(1mg/L)范圍內,熒光信號強度與酶濃度成正比。在理想條件下,可檢測到l0-20mol/L的熒光素酶。檢測步驟:1.用生物信息學方法分析并預測啟動子區(qū)可能的轉錄因子結合位點。2.設計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段,將此片段插入到熒光素酶報告基因質粒(pGL3-basic)中。3.篩選陽性克隆,測序。擴增克隆并提純質粒備用。4.擴增轉錄因子質粒,提純備用。同時準備相應的空載質粒對照,提純備用。5.培養(yǎng)293(或其它目的細胞),并接種于24孔板中,生長10-24小時(80%匯合度)。6.將報告基因質粒與轉錄因子表達質粒共轉染細胞。7.提取蛋白并用于熒光素酶檢測。8.加入底物,測定熒光素酶的活性。9.計算相對熒光強度,并與空載對照比較。
請穿實驗服并戴一次性手套操作。8)本產品只作科研用途!D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下,D-熒光素鉀被氧化,產生藍綠色的光(560nm),當?shù)孜镞^量時,產生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、哺乳動物細胞的常用報告基因。由于沒有背景干擾,因此可以很容易地檢測出低至。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,如螢火蟲。在ATP存在下,螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光?;瘜W研究中可用于熒光素酶的基板。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。做D-熒光素鉀鹽測試工作液是先用現(xiàn)配。
GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲,游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素活題成像用D-luciferin,potassiumsalt熒光素鉀鹽介紹一、活題成像技術簡介活題生物發(fā)光成像技術能夠讓研究人員直接快速的測量各種哎癥模型中腫大的瘤的生長、轉移以及對藥物的反應。在藥效學評價方面,熒光素酶哎癥模型可用于哎癥體內用藥在整體動物水平上進行長期療效跟蹤觀察。利用無創(chuàng)傷活題成像對哎細胞生長的檢測,可對哎癥治的好之前和過程中的哎細胞的變化進行實時觀測和評估。熒光素酶的發(fā)光是生物發(fā)光,不需要激發(fā)光,但需要底物熒光素(D-Luciferin)。熒光素酶的底物熒光素,約280道爾頓。熒光素的水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透細胞膜和血腦屏障。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進入小鼠體內的,約一分鐘就可以擴散到小鼠全身。熒光素。D-熒光素鉀鹽長期保存是有效期一年。fam熒光基團
D-熒光素鉀鹽的活題成像技術。揚州螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽供應商
在食品衛(wèi)生領域由于ATP生物發(fā)光技術無需培養(yǎng)過程,操作簡便、靈敏度高,數(shù)分鐘內可得到結果,具有其它微生物檢測方法無法比擬的優(yōu)勢,是目前檢測微生物更快的方法。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一。在螢火蟲和幾種其它甲蟲中發(fā)現(xiàn)了螢火蟲熒光酶/熒光素。通過中間體dioxetanone介導作用,熒光素酶氧化ATPji活的熒光素。螢火蟲熒光素酶在ATP的輔助下氧化熒光素產生熒光。這個反應發(fā)生的幾秒內在560nm處的化學熒光達到更高峰,當熒光素和ATP都超量存在的條件下,發(fā)射光與熒光素酶的活性成比例關系。螢火蟲熒光素酶很早以前就用于與抗體結合形成偶聯(lián)物,作為免疫分析中用熒光素作為底物進行檢測的標簽。與HRP和堿性磷酸酶相比,熒光素酶不耐化學修飾。這個酶的一個特殊的優(yōu)點是,除了高靈敏度外,在哺乳動物組織中內源性熒光素酶的活性很低。熒光素酶另一個重要的作用是用于衛(wèi)生監(jiān)測。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測污染,因為產生熒光所需的ATP存在于所以活ti生物中。這種類型的ATP生物熒光特性足以保證對食品表面的檢測,無論是在加工制作工程中設備的污染還是產品的污染都能檢出。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物。揚州螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽供應商