熒光素鈉[1],橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。基本信息藥品名稱熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來源(分子式)與標(biāo)準(zhǔn)本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽。按干燥品計(jì)算,含C20H10Na2O5不得少于。類別診斷用藥。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存。制劑熒光素鈉注射液2化學(xué)性質(zhì)編輯中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱:FluoresceindisodiumsaltCAS號(hào):518-47-8[2]熒光素鈉分子式:C20H10Na2O5分子量:等級(jí):BSMDL號(hào):MFCD00167039Beilstein號(hào):3833041EC號(hào):208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末;無臭,幾乎無味;有引濕性。本品在水中易溶,在乙醇中略溶。橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。4檢查資料編輯氯化物取本品,分取溶液10ml,依法檢查(附錄ⅧA),與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液制成的對(duì)照液比較,不得更濃()。硫酸鹽取上述氯化物項(xiàng)下剩余的溶液25ml,依法檢查。D-熒光素鉀鹽使用的注意事項(xiàng)。熒光素鹽
每孔加入100μl養(yǎng)24h后,Luciferin使其終濃度為150μg/ml,PBS,再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測(cè),分析發(fā)光強(qiáng)度與細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性。4)細(xì)胞生長曲線繪制MCF7-luc細(xì)胞和作為對(duì)照取表達(dá)熒光素酶的MCF-7細(xì)胞,接種于24孔板,接種密度為2×104/孔。細(xì)胞接種后1~7d,每天胰蛋白酶消化其中3孔細(xì)胞,用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定細(xì)胞數(shù)。以細(xì)胞生長天數(shù)為橫坐標(biāo),細(xì)胞數(shù)目為縱坐標(biāo),分別繪制兩種細(xì)胞生長曲線。二.動(dòng)物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠,4~5周齡,體重(15±2)g,雌雄各3只。取對(duì)數(shù)生長期的MCF-7用PBS重懸為2.5×10/ml懸液,每只裸鼠左右背側(cè)近腋部皮下接種100μl,共接種6只。接種后第5d采用德國BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度。以后每5d觀測(cè)一連續(xù)觀測(cè)30d。觀測(cè)前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉(計(jì)量為:35mg/kg體重),按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin(invivograde),10min后,進(jìn)行活題成像觀察皮下腫大的瘤的生長情況,定量分析各時(shí)間點(diǎn)的熒光值。繪制腫大的瘤皮下生長曲線.MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學(xué)觀察MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下接種后25d,脫頸處死小鼠,取腫大的瘤組織,制成石蠟切片,切片厚度為3μm。上海熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期做D-熒光素鉀鹽測(cè)試品牌有哪些?
可運(yùn)用熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)分析其相對(duì)活性。c.驗(yàn)證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用,將該序列(通常為啟動(dòng)子區(qū)域)插入報(bào)告基因載體,同時(shí)在實(shí)驗(yàn)細(xì)胞***轉(zhuǎn)過表達(dá)該轉(zhuǎn)錄因子,可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號(hào)通路是否***,將該信號(hào)通路的下游響應(yīng)原件序列構(gòu)建入報(bào)告基因載體,在不同上游信號(hào)條件下,熒光素酶活性**了通路的下游響應(yīng)。例如在GPCR研究中,將cAMPresponseelement(CRE)載入報(bào)告基因載體,構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株后,可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選。又如,將HIF1α的響應(yīng)原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報(bào)告載體構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,可以用于低氧相關(guān)通路的研究。e.驗(yàn)證microRNA的靶序列,將待測(cè)的3’UTR序列插入報(bào)告基因載體,再共轉(zhuǎn)入該microRNA,如果熒光素酶活性下降,則提示為其靶序列。Q:在[信諾金達(dá)]做熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè),需要提供什么?實(shí)驗(yàn)結(jié)果包括哪些?您需要提供:1.基因序列或模板,需提供詳細(xì)的轉(zhuǎn)錄因子、目的基因或microRNA信息;2.實(shí)驗(yàn)細(xì)胞,[信諾金達(dá)]默認(rèn)為使用293T細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,[信諾金達(dá)]會(huì)為您提供實(shí)驗(yàn)流程及完整報(bào)告一份,包括實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)、圖片、分析結(jié)果等。
SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級(jí)純()應(yīng)用:1)體外化學(xué)發(fā)光分析(invitro);2)***成像實(shí)驗(yàn)(invivo);3)高靈敏度ATP分析;步驟:Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測(cè)1)用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,配制成100mM的儲(chǔ)存液(200×,濃度30mg/ml)。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存。2)用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲(chǔ)存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析。Protocol2:Invivoanalysis/***成像分析1)用無菌的PBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光(見下圖)。當(dāng)熒光素過量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,導(dǎo)入研究動(dòng)物如大、小鼠體內(nèi),之后注入熒光素,通過生物發(fā)光成像技術(shù)(BLI)來檢測(cè)光強(qiáng)度變化。D-熒光素鉀鹽測(cè)試需要哪些必備條件?
而是對(duì)于所有能夠產(chǎn)生螢光的底物和其對(duì)應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。**為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的螢光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的螢光素酶,能夠催化同一螢光素底物,而發(fā)出不同顏色的螢光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,因此它們的螢光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。如今研究得**透徹的螢光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。[1]螢光素酶可以在實(shí)驗(yàn)室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實(shí)驗(yàn)。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段,可以對(duì)整個(gè)動(dòng)物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析:將不同類型的細(xì)胞(骨髓干細(xì)胞、T細(xì)胞等)標(biāo)記上(即表達(dá))螢光素酶。D-熒光素鉀鹽應(yīng)立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。揚(yáng)州熒光素D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存
D-熒光素鉀鹽適用于哪些領(lǐng)域?熒光素鹽
短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測(cè)1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲(chǔ)存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲(chǔ)存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)聯(lián)系作者獲得授權(quán),非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。高斯熒光素酶近年來,其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,因?yàn)檫@些報(bào)告基因較小,并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),可通過氧氣催化腔腸素氧化,產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分泌出來。Amplite?高斯熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(#AAT-12530)使用專有的發(fā)光配方來定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時(shí),產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物,該發(fā)光產(chǎn)物提供強(qiáng)發(fā)光。Amplite高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒特點(diǎn):提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度。熒光素鹽
南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái)。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測(cè)試劑、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子、細(xì)胞、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅(jiān)持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國各級(jí)高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠實(shí)可信的企業(yè)。翌科生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)В瑸榭蛻籼峁?**的外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測(cè)試劑,轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念,影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。翌科生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)市場,以敏銳的市場洞察力,實(shí)現(xiàn)與客戶的成長共贏。