并實現了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展，現在已經實現了“加樣-讀數”的ATP檢測方法。ATP是細胞健康的重要指標，這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力，尤其是在高通量應用中。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外，還可以檢測底物（luciferin）濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產生反應的保護基團偶聯，能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數”檢測，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立，一種改進的luciferin面世，能更好地用于典型的報告基因檢測應用。這種新的底物——fluoroluciferin，是新型底物開發(fā)的一個早期實例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經驗，研究人員從蝦的螢光素酶改造設計出一種新型螢光素酶報告基因，即NanoLuc?螢光素酶。D-熒光素鉀鹽應立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融。熒光素鉀鹽使用說明
具體實驗流程：注：該操作流程通常用來檢測轉染了螢火蟲熒光素酶基因的真核細胞中熒光素酶表達的活性，不適用于對細菌熒光素酶進行檢測。1．實驗***天，消化并接種細胞（根據具體實驗選擇合適的細胞）于35mm細胞培養(yǎng)皿，置于5％CO2、飽和濕度的37℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)過夜。2．等細胞密度達到70％時用Luciferase報告基因質粒、LacZ的表達質粒及其它質粒（根據具體實驗確定）共轉染細胞（根據具體實驗選擇轉染方法，如磷酸鈣沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可）。3．轉染24－36h后，吸取培養(yǎng)液，用預冷的PBS（無鈣和鎂離子）洗滌細胞。注：熒光酶的酶促反應會被痕量的鈣所抑制，故用磷酸鈣轉染的細胞在收集細胞前應充分洗滌除去含鈣介質。4．在每個培養(yǎng)皿中加入350μl預冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解細胞。5．在細胞裂解期間，準備足量的ml微量離心管，將ATPbuffer與luciferinbuffer以1：，每管100μl。6．依次取等體積的細胞裂解液（100μl）至步驟5中的離心管中，迅速混勻，在發(fā)光儀（Luminometer）上讀取吸光值。注：發(fā)光反應會迅速衰減，將細胞裂解液加入反應液后5s內必須讀取吸光值。7．確保以相同操作手法讀取全部樣品吸光值后。鹽城螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽保質期D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。
D-熒光素鉀鹽是一種化學品。中文別名:(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽英文別名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt產品描述D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍應用于整個生物技術領域，特別是體內活題成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，熒光素底物能夠被氧化發(fā)光。當熒光素過量時，產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的慢病毒轉染入細胞后構建穩(wěn)定表達細胞株，構建原位腫大的瘤模型，之后注入熒光素底物，通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或進行藥物藥效評價等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。注：在抗腫大的瘤藥物藥效評價試驗中，由于生物自發(fā)光檢測需要根據熒光素表達標定腫大的瘤大小，受腫大的瘤生長所發(fā)生的腫大的瘤內部壞死影響，生物自發(fā)光并不能很覆蓋面廣的評價腫大的瘤生長，在抗腫大的瘤藥效評價有較高要求的實驗中，建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長。D-熒光素也常用于體外研究。
從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的***功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級純（）應用：1）活細胞、組織或生物體內luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內/體外表達的成像分析；2）***用于報告基因分析，免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析；Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1）配制成100mM的儲存液（200×，濃度30mg/ml）?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液，配制工作液(終濃度150μg/mL)。3）去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。4）圖像分析前立即向細胞內添加1×熒光素工作液，然后進行圖像分析（或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號）。D-熒光素鉀鹽注：螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶、螢光素鉀鹽、螢光素鉀鹽鹽也經常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶、熒光素鉀鹽、熒光素鈉鹽。Protocol2：Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1）用無菌的DPBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL)，。一旦使用，保持冰冷且避光。做D-熒光素鉀鹽測試找哪家公司？
熒光素鈉[1]，橙紅色粉末，無氣味，有吸濕性；易溶于水，溶液呈黃紅色，并帶極強的黃綠色熒光，酸化后消失，中和或堿化后又出現，微溶于乙醇；比較大吸收波長(水)?；拘畔⑺幤访Q熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來源(分子式)與標準本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽。按干燥品計算，含C20H10Na2O5不得少于。類別診斷用藥。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存。制劑熒光素鈉注射液2化學性質編輯中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱：FluoresceindisodiumsaltCAS號：518-47-8[2]熒光素鈉分子式：C20H10Na2O5分子量：等級：BSMDL號：MFCD00167039Beilstein號：3833041EC號：208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末；無臭，幾乎無味；有引濕性。本品在水中易溶，在乙醇中略溶。橙紅色粉末，無氣味，有吸濕性；易溶于水，溶液呈黃紅色，并帶極強的黃綠色熒光，酸化后消失，中和或堿化后又出現，微溶于乙醇；比較大吸收波長(水)。4檢查資料編輯氯化物取本品，分取溶液10ml，依法檢查（附錄ⅧA），與標準氯化鈉溶液制成的對照液比較，不得更濃（）。硫酸鹽取上述氯化物項下剩余的溶液25ml，依法檢查。D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司？蟲熒光素鉀鹽
D-熒光素鉀鹽測試方法是體外生物發(fā)光檢測。熒光素鉀鹽使用說明
請穿實驗服并戴一次性手套操作。8）本產品只作科研用途！D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物，存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下，D-熒光素鉀被氧化，產生藍綠色的光(560nm)，當底物過量時，產生的Chemicalbook光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、哺乳動物細胞的常用報告基因。由于沒有背景干擾，因此可以很容易地檢測出低至。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物，如螢火蟲。在ATP存在下，螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光?；瘜W研究中可用于熒光素酶的基板。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。熒光素鉀鹽使用說明
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