用移液器反復(fù)吹打。【注】:加入TotalRNAExtractionReagent前應(yīng)避免洗滌細(xì)胞,否則會(huì)增加mRNA降解的可能性。裂解某些酵母和細(xì)菌可能需要使用勻漿器。C.動(dòng)、植物組織取-70℃凍存動(dòng)物組織在液氮中充分研磨,按照表1加入適當(dāng)量TotalRNAExtractionReagent混勻?;蛉⌒迈r動(dòng)植物組織盡量剪碎,加入適當(dāng)量TotalRNAExtractionReagent,勻漿儀進(jìn)行勻漿處理?!咀ⅰ浚簶悠敷w積不要超過(guò)加入TotalRNAExtractionReagent體積的10%。2)將勻漿樣品劇烈震蕩后在室溫條件下放置5分鐘以使**白體完全解離。3)(可選)4℃,12000g離心10min,取上清。【注】:離心可去除樣品中較多蛋白質(zhì)、脂肪、多糖或肌肉,植物的塊莖結(jié)節(jié)等。離心后的沉淀中包含有細(xì)胞外膜、多糖以及高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織樣品時(shí),上層是大量油脂應(yīng)盡量去除,取澄清的勻漿液進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.總RNA提取1)向上述裂解液中加入1/5體積氯仿(如每1mLTotalRNAExtractionReagent加入mL氯仿)。蓋緊離心管蓋,劇烈震蕩15sec,室溫靜置2-3min。2)4℃,12000g離心10-15min?!咀ⅰ浚孩匐x心后混合物可分3層:上層無(wú)色水樣層,中間層,下層紅色有機(jī)苯酚氯仿層。RNA存在于水樣層中。南京高淳區(qū)RNA哪家便宜?tsRNA提取試劑盒
RNAlaterEDTA、肝素、枸櫞酸Tempus?或PaxGene管Tempus?或PaxGene管EDTA,Heparin,Citrate,RNAlater包含穩(wěn)定劑RNAlater分離方法高純度有機(jī)提取物(需要乙醇沉淀)快速、簡(jiǎn)便的硅膠柱可擴(kuò)展的、使用磁珠的靈活格式直接溶解,無(wú)需凈化高度純化及便利性;包括有機(jī)物萃取及硅膠柱(無(wú)需沉淀)準(zhǔn)備時(shí)間1小時(shí)20分鐘2小時(shí)內(nèi)的12管961小時(shí)內(nèi)的樣本30分鐘高通量兼容立即訂購(gòu)立即訂購(gòu)立即訂購(gòu)立即訂購(gòu)立即訂購(gòu)如需了解更多關(guān)于血液工作的信息,請(qǐng)查看我們的技術(shù)文章:介紹LeukoLOCK?TotalRNA分離系統(tǒng)的一個(gè)視頻指南補(bǔ)充方案針對(duì)白血細(xì)胞收集的血液分離方案使用RiboPure?-血液試劑盒的小RNAs分離實(shí)驗(yàn)室提示血液樣本分離是否影響mRNA表達(dá)水平?技術(shù)說(shuō)明文章血樣工作的方法與技巧從血液樣本中提取MicroRNA-技術(shù)手冊(cè)13(1)來(lái)自哺乳動(dòng)物、植物和病毒樣本的高通量RNA恢復(fù)-技術(shù)說(shuō)明13(1)針對(duì)陣列分析及其他提升RNA分離-技術(shù)說(shuō)明10(3)改進(jìn)的小鼠血液樣本基因表達(dá)譜-技術(shù)說(shuō)明13(4)來(lái)自血液樣本的基因表達(dá)譜的改進(jìn)方法-技術(shù)說(shuō)明13(3)使用全血RNA樣本提升芯片的靈敏度-技術(shù)說(shuō)明12(3)從一種新型過(guò)濾系統(tǒng)捕獲到的白血細(xì)胞中分離RNA-技術(shù)說(shuō)明12。RNA提取試劑做RNA測(cè)試會(huì)買保險(xiǎn)嗎?
輕輕吹3-5次混勻。B.輕輕混勻轉(zhuǎn)染試劑,用50ulOpti-MEM稀釋lipofectamineTM2000,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置5min。C.混合轉(zhuǎn)染試劑和siRNA稀釋液,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置20min。D.轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入到24孔細(xì)胞板中,100ul/孔,前后輕搖細(xì)胞板混合均勻。E.細(xì)胞板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48h。轉(zhuǎn)染4-6h后可更換新鮮培養(yǎng)基。3)效果檢測(cè):轉(zhuǎn)染完成后24-72h均可進(jìn)行siRNA沉默效果檢測(cè),更佳檢測(cè)時(shí)間與細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染試劑,檢測(cè)目的等相關(guān)。1)RNA水平的檢測(cè):mRNA是檢測(cè)siRNA沉默效率的更佳指標(biāo),siRNA轉(zhuǎn)染后24-72h即可檢測(cè)到靶基因mRNA表達(dá)明顯降低,檢測(cè)方法是RealtimePCR。2)蛋白水平的檢測(cè):檢測(cè)方法是Westernblot。3)功能篩選:應(yīng)用EdU細(xì)胞增殖、EdUTP細(xì)胞凋亡等方法進(jìn)行細(xì)胞功能篩選。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)修飾方法:由于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)siRNA穩(wěn)定性的要求較高,盡管未修飾的siRNA也可以進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),但是以CHol,OMe,PS修飾的siRNA效果較好。給***法:局部給藥:更直接的導(dǎo)入方式,siRNA的導(dǎo)入效率高,用量少。siRNA能很快被吸收。適用于淺表***和組織,包括眼,肌肉和皮下組織等。2表2:使用lipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染siRNA產(chǎn)品參考用量細(xì)胞培養(yǎng)容器表面積。
總RNA(含microRNA)提取試劑盒:各種類型RNA提取不再愁發(fā)布者:艾美捷科技發(fā)布時(shí)間:2018-06-26分享按鈕RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過(guò)程中的橋梁。隨著研究的不斷深入,mRNA、IncRNA、SmallRNA、以及microRNA的神秘面紗被慢慢揭開。特別是現(xiàn)今流行的單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)(RNA-seq)的興起,研究者對(duì)RNA提取的質(zhì)量要求變得更加嚴(yán)苛。市場(chǎng)上有很多名義上是總RNA提取的試劑盒,但是實(shí)際上很難提取到全部的RNA,特別是小分子RNA基本上無(wú)法提取。這對(duì)于研究者來(lái)說(shuō)是非常大的損失。為此,艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商,為您推薦NorgenBiotek品牌的質(zhì)量總RNA提取試劑盒,可以完整的提取各種類型的RNA:mRNA,lncRNA,smallRNA,microRNA(miRNA)等;提取后的總RNA可直接用于下游應(yīng)用:qRT-PCR,Northernblots,microarrays,NGS,miRNAprofiling,biomarkerdiscovery,Primerextension,RNaseprotection。RNA必須要公司與公司合作嗎?
12x96)1440096孔板HP總RNA提取試劑盒R6813-00EZ-96hptotalRNAKit(1x96)2200R6813-01EZ-96hptotalRNAKit(4x96)6000R6813-02EZ-96hptotalRNAKit(12x96)1600096孔組織總RNA提取試劑盒:一次高通量地從動(dòng)物組織或固定樣品中提取96個(gè)樣品的RNAR1088-01TissueRNAKit(2x96)3640R1088-02TissueRNAKit(8x96)1120096孔板總RNA提取試劑盒IIR6935-00EZ-96totalRNAKitII(1x96)2100R6935-01EZ-96totalRNAKitII(4x96)5800R6935-02EZ-96totalRNAKitII(12x96)1500096孔植物總RNA提取試劑盒:一次高通量地從新鮮植物組織中提取96個(gè)樣品的總RNAR1027-01PlantRNAKit(2x96)2700R1027-02PlantRNAKit(8x96)990096孔板病毒總RNA純化試劑盒:R1074-00EZ96ViralRNAKit(1x96)2000R1074-01EZ96ViralRNAKit(4x96)5600R1074-02EZ96ViralRNAKit(12x96)1440096孔板石蠟包埋組織RNA提取試劑盒R6953-00EZ-96FFPERNAKit(1x96)3800R6953-01EZ-96FFPERNAKit(4x96)11560R6953-02EZ-96FFPERNAKit(12x96)3200096孔板DNA/RNA蛋白質(zhì)共提取試劑盒R6732-00EZ-96DNARNAKit(1x96)3480R6732-01EZ-96DNARNAKit(4x96)10560R6732-02EZ-96DNARNAKit。南京翌科生物科技有限公司RNA測(cè)試價(jià)格。哪家做RNA提取試劑
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用于各種植物、動(dòng)物、微生物的RNA提取,在每個(gè)試劑盒里都有一份說(shuō)明使用說(shuō)明書。實(shí)驗(yàn)者只需要按照說(shuō)明書上的步驟操作即可。使用時(shí)無(wú)需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學(xué)后實(shí)驗(yàn)。但較好的試劑盒價(jià)格比較貴,在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來(lái)定奪試劑盒的使用。中文名RNA試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域分子生物學(xué)作用提取細(xì)胞內(nèi)總RNA目錄1試劑組成2操作步驟3注意事項(xiàng)4替代方法RNA試劑盒試劑組成編輯(以離心柱型為例):一般包括:成分?jǐn)?shù)量?jī)?chǔ)藏溫度有效期裂解液100ml2-8℃一年漂洗液30mlRT一年洗柱液100mlRT一年RNasefreeddH2O30mlRT一年RNasefree吸附柱100個(gè)RT一年RNasefree收集管(2ml)100個(gè)RT一年此外,還配有一份試劑盒使用說(shuō)明書,根據(jù)不同的生產(chǎn)商,可能還配有不同的試劑,如:DNA酶、溶菌酶等。RNA試劑盒操作步驟編輯1.樣品處理a.植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混勻。b.動(dòng)物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。c.貼壁細(xì)胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細(xì)胞,每106細(xì)胞加1ml裂解液。用取樣器吹打混勻。d.細(xì)胞懸液:離心收集細(xì)胞。tsRNA提取試劑盒
南京翌科生物科技有限公司位于仙林街道緯地路9號(hào)江蘇生命科技園F7棟301-3室。公司業(yè)務(wù)涵蓋外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測(cè)試劑,轉(zhuǎn)染試劑等,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證。公司從事商務(wù)服務(wù)多年,有著創(chuàng)新的設(shè)計(jì)、強(qiáng)大的技術(shù),還有一批專業(yè)化的隊(duì)伍,確保為客戶提供良好的產(chǎn)品及服務(wù)。翌科生物立足于全國(guó)市場(chǎng),依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力,融合前沿的技術(shù)理念,飛快響應(yīng)客戶的變化需求。