注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號115144-35-9為準。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。4)為避免反復(fù)凍融,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,如有條件,可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。5)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6)在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測。7)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途!光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。連云港熒光素D-熒光素鉀鹽公司
更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。免疫熒光法免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當(dāng)與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時,在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位,檢測出抗原或抗體。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素(fluoreceinisothiocyante,F(xiàn)ITC),為黃色、橙黃色或褐黃色結(jié)晶粉末,有兩種異構(gòu)體,易溶于水和酒精等溶劑。分子量為389,更大吸收光譜為490~495,更大發(fā)射光譜為520~530urn,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,是更常用的標記抗體的熒光素。②四甲基異氰酸羅達明。水楊基熒光酮D-熒光素鉀鹽適用于哪些領(lǐng)域?
螢火蟲熒光素酶(Luciferase)是一種常用的信號分子,可以用來標記腫瘤細胞.一.細胞方法將帶有熒光素luc轉(zhuǎn)酶報告基因的真核表達重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7,利用G418篩選,獲得穩(wěn)染人乳腺哎細胞株MCF-7-luc,并在穩(wěn)定表達熒光素酶基因的細胞克隆MCF-7體外評價其發(fā)光能力。通過建立裸鼠移植瘤模型,利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長及轉(zhuǎn)移情況,為下一步監(jiān)測裸鼠移植瘤對藥物作用的變化情從而為分析藥物對腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定:37℃細胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml設(shè)置6個濃度梯度。在細胞接種24h后,加入6孔板中,每個濃度設(shè)2個孔在10~14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細胞生長情況,死亡更低的G418濃度,即為篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染克隆MCF-7細胞的濃度。1)細胞轉(zhuǎn)染取對數(shù)生長期的MCF-7細胞,將細胞接種于6孔板內(nèi)待細胞融合度達到80%~90%孔培養(yǎng)板中,TM即可轉(zhuǎn)染。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進行轉(zhuǎn)染。在250μl無血清、無雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無血清、無雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000,室溫培育5min。將上述2種稀釋液混勻。
tetrametrylrhodarnineisothiocyante,TRITC)是一種紫紅色粉末,較穩(wěn)定,是羅達明(rhodamine)的衍生物。更大吸收光譜550urn,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對比鮮明,常用于雙標記染色。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,免疫熒光法可分為以下三種。1.直接法用熒光素標記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,以檢查出相應(yīng)的抗原成分。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,洗去未結(jié)合的抗體,再用熒光素標記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,所以,此法較直接法靈敏。3.補體法用特異性的抗體和補體的混合液與標本上的抗原反應(yīng),補體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補體的熒光抗體與之相結(jié)合,就形成了抗原一抗體一補體一抗補體熒光抗體的復(fù)合物。熒光顯微鏡下所見到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補體法具有敏感性強的優(yōu)勢,同時適用于各種不同種屬來源的特異性抗體的標記顯示,在各種不同種屬動物抗體的檢測上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些?
從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的***功效等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級純()應(yīng)用:1)活細胞、組織或生物體內(nèi)luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達的成像分析;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析;Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)配制成100mM的儲存液(200×,濃度30mg/ml)?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,配制工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。4)圖像分析前立即向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析(或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號)。D-熒光素鉀鹽注:螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶、螢光素鉀鹽、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶、熒光素鉀鹽、熒光素鈉鹽。Protocol2:Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-熒光素鉀鹽測試需要哪些必備條件?水楊基熒光酮
D-熒光素也常用于身體的外部研究。連云港熒光素D-熒光素鉀鹽公司
而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。熒光素酶報告基因(Luc)是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類酶,哺乳細胞無內(nèi)源性熒光素酶。更常用的熒光素酶有細菌熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和Renilla熒光素酶。細菌熒光素酶對熱敏感,因此在哺乳細胞的應(yīng)用中受到限制。螢火蟲熒光素酶靈敏度高,檢測線性范圍寬達7~8個數(shù)量級,是更常用于哺乳細胞的報道基因,用熒光比色計即可檢測酶活性,因而適用于高通量篩選。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲熒光素酶的應(yīng)用,無需裂解細胞即可檢測酶活性。Renilla熒光素酶催化腸腔(coelenterazine)氧化,產(chǎn)物可透過生物膜,可能是更適用于活細胞的報告分子。將熒光素酶報告基因載體轉(zhuǎn)染到細胞中。連云港熒光素D-熒光素鉀鹽公司
南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子、細胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。翌科生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物不斷開拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺,以應(yīng)用為重點,以服務(wù)為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價值,提供更優(yōu)服務(wù)。翌科生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時代,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信。