但是上一次底物的殘留曲線可以知道,可以控制對下一次觀察結果的影響。儲存與運輸一般放在-20℃的冰箱即可,半年以上不使用放在-80℃的冰箱,溶解配制后放在4℃冰箱,短期運輸放在4℃環(huán)境。建議現(xiàn)用現(xiàn)配,D熒光素鉀鹽在液體中容易降解。應用領域腫大的瘤,干細胞,藥物開發(fā),基因治的好,轉基因小鼠,免疫學等等。英文名字firefly.中文名稱熒光素酶,重組熒光素貨號AAT-12500規(guī)格¥1430/1mL背景資料:熒光素酶是來自北美螢火蟲(Photinuspyralis)中熒光素酶基因的克隆和重組表達,它為實驗研究或者用生物熒光試劑制備試劑盒檢測ATP或者熒光素底物提供了可信度和可靠性。這種重組酶可以克服由天然資源純化獲得熒光素酶時受季節(jié)和地方區(qū)域變化的影響。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。產(chǎn)品形式提供的熒光素酶*重組熒光素*產(chǎn)品為溶液形式。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權歸作者所有。商業(yè)轉載請聯(lián)系作者獲得授權,非商業(yè)轉載請注明出處。南京D-熒光素鉀鹽測試公司有哪幾家。間接免疫熒光試劑盒
2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(環(huán)已胺)鹽PEP病毒保存液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結合物吖啶酯-T3結合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結合物吖啶磺酰胺鹽-T3結合物生物素-T4結合物化學發(fā)光分析試劑及標記物生物素-T3結合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲,游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素運輸和保存冰袋運輸;-20℃干燥避光保存;有效期一年。使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鈉鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用。常州熒光素酶D-熒光素鉀鹽保質期光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性。
可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。c.驗證特定轉錄因子同其調(diào)控序列的作用,將該序列(通常為啟動子區(qū)域)插入報告基因載體,同時在實驗細胞***轉過表達該轉錄因子,可分析轉錄因子過表達是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否***,將該信號通路的下游響應原件序列構建入報告基因載體,在不同上游信號條件下,熒光素酶活性**了通路的下游響應。例如在GPCR研究中,將cAMPresponseelement(CRE)載入報告基因載體,構建穩(wěn)定表達細胞株后,可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選。又如,將HIF1α的響應原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報告載體構建穩(wěn)轉細胞株,可以用于低氧相關通路的研究。e.驗證microRNA的靶序列,將待測的3’UTR序列插入報告基因載體,再共轉入該microRNA,如果熒光素酶活性下降,則提示為其靶序列。Q:在[信諾金達]做熒光素酶報告基因檢測,需要提供什么?實驗結果包括哪些?您需要提供:1.基因序列或模板,需提供詳細的轉錄因子、目的基因或microRNA信息;2.實驗細胞,[信諾金達]默認為使用293T細胞,實驗結束后,[信諾金達]會為您提供實驗流程及完整報告一份,包括實驗原始數(shù)據(jù)、圖片、分析結果等。
這是一種小分子(19kDa)單體酶,具有獨特的底物,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著***的應用前景,為進一步的技術開發(fā)奠定了基礎。[1]2015NanoBRET?技術NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質標簽的理想特征。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉移(BRET)的供體。一項針對各種能量受體熒光基團的深入研究發(fā)現(xiàn),紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關的一些挑戰(zhàn)。可將這些熒光基團添加到蛋白質配基等分子中以測量靶蛋白的結合,或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進行活細胞中蛋白質:蛋白質相互作用的檢測。[1]2016NanoBiT?技術隨著NanoLuc?的誕生,Promega的科學家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng),即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?。該系統(tǒng)由兩部分組成:11個氨基酸的小標簽和一個更大,更精細的NanoLuc?亞基,LgBiT。這兩部分結構互補結合,重組為一個明亮的螢光素酶。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低,從而可以進行蛋白質相互作用的測定;也可以和HiBiT一樣高,從而允許自我組裝。[1]2017HiBiT?技術基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究。D-熒光素鉀鹽測試怎么樣?
常見的熒光素酶有兩種,分別是螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase,編碼基因是luc)和海腎熒光素酶(Renillaluciferase,編碼基因是Rluc),前者的底物是D-Luciferin,后者的底物是Coelenterazine。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,底物被氧化發(fā)光(不同底物光的顏色和波長不同),當?shù)孜镞^量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性。***成像技術(opticalinvivoimaging)目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術,生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物(D-Luciferin或Coelenterazine)化學發(fā)光的原理,將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內(nèi),與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應,利用光學系統(tǒng)檢測光強度,間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位。這項技術已被廣泛應用于多個領域常用的有**或疾病動物模型的建立,并可用于病毒學研究、siRNA研究、干細胞研究、蛋白質相互作用研究等。以下主要介紹D-Luciferin(D熒光素)的分類:D-Luciferin:有三種,分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素。D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種?宿遷熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長
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包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液??扇苡诩状己虳MSO;后者能夠易溶于水或緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應用上都沒有實質性的差別。產(chǎn)品性質運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸;短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。2.活題成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。3)腹腔注射(.)。間接免疫熒光試劑盒
南京翌科生物科技有限公司主要經(jīng)營范圍是商務服務,擁有一支專業(yè)技術團隊和良好的市場口碑。公司業(yè)務涵蓋外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉染試劑等,價格合理,品質有保證。公司將不斷增強企業(yè)重點競爭力,努力學習行業(yè)知識,遵守行業(yè)規(guī)范,植根于商務服務行業(yè)的發(fā)展。翌科生物立足于全國市場,依托強大的研發(fā)實力,融合前沿的技術理念,飛快響應客戶的變化需求。