研究所比較好的外泌體靠譜

來源: 發(fā)布時間:2022-02-09

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,耗時,量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。五是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度比較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法比較新數據,表明PS法可提取相當高純度的外泌體外泌體提取找哪個公司做?比較好?研究所比較好的外泌體靠譜

外泌體提取試劑盒 (細胞培液)本說明書適用于翌科生物公司外泌體提取試劑盒系列產品(針對細胞培液)。

樣品準備1.新鮮的細胞培液樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于室溫解凍后置于冰上待用。2.將細胞培液樣品渦旋混勻,根據實驗需求取適量體積轉移至離心管中,4℃,1000×g離心10min,棄沉淀,并將上清轉移至新的離心管中。

外泌體分離1.轉移樣本至新管,加入與細胞培夜等體積的ExosomeIsolationReagent;2.渦旋混勻,此步后溶液將變混濁。3.放入4℃冰箱靜置過夜;4.4℃,3220g離心60min,棄上清,外泌體沉淀存留在離心管底部;5.用適量PBS重懸外泌體沉淀,存放于4℃(不超過1周)或-20℃/-80℃(長時間保存)。

注意事項1、使用前需將ExosomeIsolationKit充分混勻。2、細胞培液樣品建議用0.22μm濾器過濾后再進行外泌體提取操作。3、操作過程需佩戴一次性手套操作,盡量在超凈臺內或潔凈的環(huán)境進行。 上海專業(yè)做外泌體實驗翌科生物做外泌體檢測服務怎么樣?誰知道?

外泌體的產生過程為:細胞膜內陷,形成內體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細胞的多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中發(fā)現了有膜結構的小囊泡,并命名為exosome。對于外泌體的作用,當時推測為細胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現類似于B淋巴細胞的免疫細胞也會分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應CD4+細胞的抗**反應。2007年HValadi等進一步發(fā)現細胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質。隨著有關外泌體研究越來越多,研究者發(fā)現它普遍參與了機體免疫應答、抗原呈遞、細胞分化、**生長于侵襲等各種生物過程中。

外泌體研究界比較家喻戶曉的就是大牛TheryC了,想當年一篇外泌體超速離心提取方法的文章已經是成為了眾多外泌體研究者的“圣經”了(IsolationandCharacterizationofExosomesfromCellCultureSupernatantsandBiologicalFluids,2006)。據不完全統(tǒng)計,大牛TheryC實驗室已發(fā)表外泌體相關paper四五十篇,其中大多數為綜述性文章,實驗性文章有約12篇。英瀚斯生物,多年從事科研課題實驗服務工作,經常設計外泌體相關實驗檢測項目,各類外泌體測序、檢測、電鏡等翌科生物代做實驗,外泌體檢測服務,實驗樣本檢測。

外泌體在國家自然科學基金立項集中的領域還是**學,近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在**的形成,耐藥性,檢測等方面有關。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現外泌體轉運p-STAT3可促進結直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細胞外囊泡相關的miRNA作為子宮內膜ai分子標志物的可能性。此外,在神經系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學及其他領域也有不少外泌體相關項目中標。做外泌體檢測的公司有哪些?研究所推薦的外泌體實驗

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