全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠?qū)?50 nm的外泌體進(jìn)行全方面的表征,無(wú)論是粒徑尺寸、粒徑分布還是外泌體的亞型均可在一次測(cè)試中得到。并且所用來(lái)測(cè)試的樣本無(wú)需進(jìn)行純化,避免因純化帶來(lái)的樣本偏差。分析不同大小和不同尺度的外泌體亞群,在CD171過(guò)表達(dá)系統(tǒng)中,100 nm以上的外泌體只表達(dá)了CD171。通過(guò)抗體捕獲的模式,全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠量化含有不同標(biāo)記物的外泌體亞群,并對(duì)不同種群的外泌體進(jìn)行特異性計(jì)數(shù)和分析。整個(gè)過(guò)程無(wú)需純化,并且線性范圍可跨越3個(gè)數(shù)量級(jí)。外泌體作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。遼寧細(xì)胞上清外泌體鑒定
理論上,所有促進(jìn)肺病細(xì)胞分泌外泌體的機(jī)制都可以被用來(lái)作為肺病醫(yī)治的潛在靶點(diǎn),但目前關(guān)于其可行性的研究還比較少。有研究表明,種瘤來(lái)源的外泌體對(duì)種瘤免疫的調(diào)控具有一定的影響作用,包括免疫壓制和免疫開啟兩個(gè)方面。Romagnoli等研究發(fā)現(xiàn),肺病細(xì)胞可以刺激樹突狀細(xì)胞等抗原提呈細(xì)胞產(chǎn)生攜帶特異抗原的外泌體,這些外泌體可以遷移到區(qū)域淋巴結(jié),進(jìn)而開啟CD4+T與CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生抗種瘤免疫反應(yīng),進(jìn)而壓制種瘤生長(zhǎng)。Besse等研究發(fā)現(xiàn),在晚期NSCLC患者中,裝載有IFN-γ,MHC I和MHCⅡ限制抗原的樹突狀細(xì)胞外泌體增強(qiáng)了NK細(xì)胞的抗種瘤免疫功能,研究證實(shí)外泌體參與相關(guān)種瘤生理病理過(guò)程,在NSCLC免疫醫(yī)治中有著重要的臨床應(yīng)用價(jià)值,為NSCLC的醫(yī)治打開了新的視野。江蘇血漿外泌體粒徑檢測(cè)在過(guò)去幾年中,有幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室報(bào)道了各種細(xì)胞類型的外泌體分泌,并討論了其潛在的生物學(xué)功能。
外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。同時(shí),外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)種瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)有哪些?l exoRBase數(shù)據(jù)庫(kù)收集和描述人類血液外泌體中所有長(zhǎng)的RNA,包括circRNA、lncRNA和mRNA。l EVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫(kù)匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。l ExoCarta數(shù)據(jù)庫(kù)主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個(gè)物種的286個(gè)研究結(jié)果,涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。
外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不只是是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止目前已經(jīng)通過(guò)286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。外泌體主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。
外泌體早見于1981年,EG Trams 等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為 exosome。對(duì)于外泌體的作用,當(dāng)時(shí)推測(cè)為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年G Raposo 等發(fā)現(xiàn)類似于B 淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體(antigen presenting vesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+ 細(xì)胞的抗種瘤反應(yīng)。2007 年H Valadi 等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過(guò)外泌體中RNA 交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來(lái)越多,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、種瘤生長(zhǎng)于侵襲等各種生物過(guò)程中。在凝血過(guò)程中血小板會(huì)分泌大量的外泌體,有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來(lái)自額外的分泌。山東外泌體提取
外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。遼寧細(xì)胞上清外泌體鑒定
建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫(kù)也可作為規(guī)避混亂的方法之一。一方面,隨著EV研究倍受世界矚目,各國(guó)啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。美國(guó)啟動(dòng)NIH戰(zhàn)略性大型項(xiàng)目(Extracellular RNA Communication),國(guó)際厲害性學(xué)會(huì)——Gordon和Keystone Symposia也從2016開始成立會(huì)議小組。受到歐洲藥物研究開發(fā)公司“創(chuàng)新藥物倡議組織(IMI)”的支持推進(jìn)的CANCER-ID項(xiàng)目,也包含EV研究在內(nèi)。2017年日本選定了EV研究為文部科學(xué)省研究開發(fā)戰(zhàn)略的目標(biāo)之一,期待會(huì)加速今后的研究發(fā)展。無(wú)論如何,今后EV研究的根本就是必須有強(qiáng)有力的研究方法和技術(shù),而PS親和法有望成為其中之一。遼寧細(xì)胞上清外泌體鑒定