理論上，所有促進(jìn)肺病細(xì)胞分泌外泌體的機(jī)制都可以被用來(lái)作為肺病醫(yī)治的潛在靶點(diǎn)，但目前關(guān)于其可行性的研究還比較少。有研究表明，種瘤來(lái)源的外泌體對(duì)種瘤免疫的調(diào)控具有一定的影響作用，包括免疫壓制和免疫開(kāi)啟兩個(gè)方面。Romagnoli等研究發(fā)現(xiàn)，肺病細(xì)胞可以刺激樹(shù)突狀細(xì)胞等抗原提呈細(xì)胞產(chǎn)生攜帶特異抗原的外泌體，這些外泌體可以遷移到區(qū)域淋巴結(jié)，進(jìn)而開(kāi)啟CD4+T與CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生抗種瘤免疫反應(yīng)，進(jìn)而壓制種瘤生長(zhǎng)。Besse等研究發(fā)現(xiàn)，在晚期NSCLC患者中，裝載有IFN-γ，MHC I和MHCⅡ限制抗原的樹(shù)突狀細(xì)胞外泌體增強(qiáng)了NK細(xì)胞的抗種瘤免疫功能，研究證實(shí)外泌體參與相關(guān)種瘤生理病理過(guò)程，在NSCLC免疫醫(yī)治中有著重要的臨床應(yīng)用價(jià)值，為NSCLC的醫(yī)治打開(kāi)了新的視野。關(guān)于外泌體相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，關(guān)于需要改進(jìn)的課題存在很多。吉林外泌體lncRNA芯片
近年來(lái)，高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究，這為我們揭示了更多具有生物標(biāo)志物價(jià)值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對(duì)照者血漿外泌體中的蛋白表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達(dá)不只能區(qū)分種瘤與正常組織，同時(shí)也能區(qū)分各種肺病的組織亞型。此外，聯(lián)合應(yīng)用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達(dá)到0.74。Clark等采用納升液聯(lián)用技術(shù)（nano-ESI-LC-MS/MS）分析了來(lái)自正常支氣管上皮細(xì)胞系和兩個(gè)攜帶NSCLC細(xì)胞系的外泌體的蛋白表達(dá)譜，從中篩選出如細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達(dá)的蛋白，同時(shí)檢測(cè)分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性。上海植物外泌體粒徑檢測(cè)提取的外泌體的鑒定方式主要是通過(guò)形態(tài)學(xué)（電子顯微鏡技術(shù)）、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實(shí)現(xiàn)的。
全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠?qū)?50 nm的外泌體進(jìn)行全方面的表征，無(wú)論是粒徑尺寸、粒徑分布還是外泌體的亞型均可在一次測(cè)試中得到。并且所用來(lái)測(cè)試的樣本無(wú)需進(jìn)行純化，避免因純化帶來(lái)的樣本偏差。分析不同大小和不同尺度的外泌體亞群，在CD171過(guò)表達(dá)系統(tǒng)中，100 nm以上的外泌體只表達(dá)了CD171。通過(guò)抗體捕獲的模式，全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠量化含有不同標(biāo)記物的外泌體亞群，并對(duì)不同種群的外泌體進(jìn)行特異性計(jì)數(shù)和分析。整個(gè)過(guò)程無(wú)需純化，并且線(xiàn)性范圍可跨越3個(gè)數(shù)量級(jí)。
當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后，其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對(duì)其生物來(lái)源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號(hào)的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型，其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、種瘤侵襲等方方面面。有研究表明種瘤來(lái)源的外泌體參與到種瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進(jìn)了種瘤的生長(zhǎng)與侵襲。神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。
全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠在單個(gè)外泌體樣本上檢測(cè)多達(dá)4種標(biāo)記物，并同時(shí)提供外泌體的其它表征數(shù)據(jù)諸如計(jì)數(shù)、顆粒尺寸統(tǒng)計(jì)等。建議在表征外泌體和外囊泡時(shí)，應(yīng)當(dāng)同時(shí)測(cè)量表面和載體蛋白。使用ExoView芯片可穿透外泌體，探測(cè)膜內(nèi)蛋白和載體。并且單次可定量3種表面、管腔蛋白。全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)只測(cè)量含有靶標(biāo)抗原的特定細(xì)胞外泌體群體。只需35 μL的稀釋樣品，即可直接獲得外泌體的表型、粒徑和計(jì)數(shù)信息。并且無(wú)需擔(dān)心污染物對(duì)測(cè)試的影響?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體，但不能提取完整外泌體。安徽外泌體lncRNA芯片
通過(guò)臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測(cè)腫細(xì)胞轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標(biāo)。吉林外泌體lncRNA芯片
l 納米顆粒追隨分析法：簡(jiǎn)稱(chēng)NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測(cè)速度快，檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息。l Western blot分子標(biāo)志物檢測(cè)：外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；細(xì)胞質(zhì)蛋白，如肌動(dòng)蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；參與生物功能的分子，如凋亡轉(zhuǎn)接基因2互作蛋白X（ALIX）、種瘤易感基因101蛋白（TSG101）、熱休克蛋白（HSP70、HSP90），以及細(xì)胞分泌的特異性蛋白。外泌體內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)和核酸，可以運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊。不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病醫(yī)治。吉林外泌體lncRNA芯片