廣州腹水外泌體

來源: 發(fā)布時間:2021-08-30

當外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、種瘤侵襲等方方面面。有研究表明種瘤來源的外泌體參與到種瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了種瘤的生長與侵襲。細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式。廣州腹水外泌體

近年來眾多文獻報道,肺病細胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進肺病的發(fā)發(fā)展,是早期診斷肺病的有效途徑。有研究發(fā)現(xiàn),NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%,因而認為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標志物。Park等通過Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),進一步的Western blotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號傳導途徑以促進種瘤的發(fā)發(fā)展,因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學標記物。唾液外泌體芯片隨著今后的研究發(fā)展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用。

隨著外泌體的功能逐漸被發(fā)現(xiàn),近年來,應用這些功能的醫(yī)治法也在被開發(fā)出來。例如,血液中的成纖維細胞所釋放的外泌體,可以促進角質(zhì)形成細胞的移動和增殖以及血管新生來促進傷口愈合。有報導指出,外泌體內(nèi)miRNA參與促進血管新生、抗癥性和促進膠原蛋白沉淀等一系列過程。從癥狀患者樹突狀細胞釋放的外泌體中,含有各種癥狀細胞來源的蛋白質(zhì),可以強化殺傷性T細胞對癥狀細胞的特異性反應。利用此功能的抗種瘤免疫療法,目前正處于初期臨床研究階段。

全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)能夠?qū)?50 nm的外泌體進行全方面的表征,無論是粒徑尺寸、粒徑分布還是外泌體的亞型均可在一次測試中得到。并且所用來測試的樣本無需進行純化,避免因純化帶來的樣本偏差。分析不同大小和不同尺度的外泌體亞群,在CD171過表達系統(tǒng)中,100 nm以上的外泌體只表達了CD171。通過抗體捕獲的模式,全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)能夠量化含有不同標記物的外泌體亞群,并對不同種群的外泌體進行特異性計數(shù)和分析。整個過程無需純化,并且線性范圍可跨越3個數(shù)量級。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細胞具有交換信息的功能。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式:一是超速離心法,這是目前外泌體提取常用的方法 。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊, 由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 。二是過濾離心, 這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性 ,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法, 用此種方法分離到 的外泌體純度 高,但是前期準備工作繁雜,耗時,量少。度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高。遼寧細胞上清外泌體染色

干細胞外泌體攝取流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法。廣州腹水外泌體

外泌體作為藥物遞送載體較以往的合成系統(tǒng)具有多方面的優(yōu)勢,比如:人工遞送載體具有更低的免疫原性,其含有的磷脂雙分子層可與靶細胞細胞膜融合,從而避廉價核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬作用。Srivastava等開發(fā)了一種基于外泌體-金奈米粒子(Exo-GNP)的藥物遞送系統(tǒng)—“nanosomes”用于肺病的醫(yī)治,研究表明該系統(tǒng)與單用多柔比星醫(yī)治相比,前者的多柔比星釋放量增加、攝取率提高、化療毒性降低且化療效果增強。此外,還有研究發(fā)現(xiàn),使用外泌體運載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細胞對PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。廣州腹水外泌體