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實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀(qPCR 儀)憑借其能夠在 PCR 擴(kuò)增過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光信號(hào)變化,從而實(shí)現(xiàn)對目的基因精細(xì)定量的特點(diǎn),在多個(gè)領(lǐng)域都有較廣且重要的應(yīng)用。qPCR的高靈敏度使其能對微量生物樣本(如血液、毛發(fā)、唾液、精斑等)進(jìn)行檢測,在個(gè)體識(shí)別、親子鑒定等方面發(fā)揮重要作用。個(gè)體識(shí)別:通過擴(kuò)增樣本中特異性的短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)并定量分析,與已知樣本比對,實(shí)現(xiàn)個(gè)體的精細(xì)識(shí)別,廣泛應(yīng)用于刑事案件偵破和災(zāi)難事故中的身份確認(rèn)。親子鑒定:基于親代與子代基因序列的遺傳規(guī)律,通過定量分析特定基因標(biāo)記的匹配程度,確定親子關(guān)系,結(jié)果準(zhǔn)確性可達(dá)99.99%以上。光學(xué)系統(tǒng)可以確保高靈敏度和高特異性,適用于各種基因表達(dá)分析、病原體檢測和 SNP 分型等應(yīng)用。定性基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家供應(yīng)
性能指標(biāo)溫度控制準(zhǔn)確性:指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的一致性,直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,一般要求溫度準(zhǔn)確性在±0.1℃-±0.2℃之間。均勻性:指樣品孔間的溫度差異,關(guān)系到不同樣品孔進(jìn)行反應(yīng)結(jié)果的一致性,良好的溫度均勻性可使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具重復(fù)性,通常溫度均勻性應(yīng)在±0.2℃-±0.5℃范圍內(nèi)。升降溫速度:更快的升降溫速度可以縮短反應(yīng)時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率,同時(shí)減少非特異性結(jié)合的機(jī)會(huì),一般PCR儀的升降溫速率在3℃/s-6℃/s左右。模塊規(guī)格:常見的有96孔、48孔、32孔等,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的模塊規(guī)格。此外,一些PCR儀還兼容0.2ml、0.5ml管以及96標(biāo)準(zhǔn)微孔板等不同類型的反應(yīng)容器。程序設(shè)置:包括可記憶程序數(shù)目、比較大程序段數(shù)、比較大溫階步數(shù)、比較大循環(huán)次數(shù)、比較大保溫時(shí)間等。豐富的程序設(shè)置功能可以滿足不同實(shí)驗(yàn)的需求。定量基因擴(kuò)增儀PCR儀要多少錢柏恒RePure系列PCR儀在擴(kuò)增效果方面表現(xiàn)優(yōu)異,具有高靈敏度和穩(wěn)定性,能夠?qū)崿F(xiàn)快速、高效的DNA擴(kuò)增。
反應(yīng)體系配制與加樣體系配制:按比例在離心管中混合各組分(先加非模板試劑,***加模板,避免污染),輕輕混勻(勿劇烈震蕩),短暫離心(1000-2000 rpm,10-20 秒)使液體沉底。示例(20μL 體系):qPCR Mix 10μL + 上游引物(10μM)0.8μL + 下游引物(10μM)0.8μL + 模板 2μL + 無菌水 6.4μL(探針法需額外加探針)。加樣:將配制好的體系逐一加入 96 孔板的對應(yīng)孔中,避免產(chǎn)生氣泡(若有氣泡,用吸頭刺破)。加樣后用封板膜密封(確保無褶皺、無漏液),短暫離心(500-1000 rpm,30 秒),使液體聚集在孔底,避免掛壁。
農(nóng)業(yè)與種業(yè):精細(xì)育種與作物保護(hù):1. 轉(zhuǎn)基因作物檢測場景:檢測作物中是否含外源基因(如抗蟲 Bt 基因、抗除草劑 EPSPS 基因),用于監(jiān)管合規(guī)性篩查(如進(jìn)出口農(nóng)產(chǎn)品檢測)。技術(shù)價(jià)值:通過 PCR 擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因載體的啟動(dòng)子(如 CaMV 35S)、終止子(如 NOS)或目的基因,區(qū)分轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因品種。設(shè)備需求:便攜式 PCR 儀(田間快速檢測)+ 常規(guī)實(shí)驗(yàn)室高通量機(jī)型(批量樣本篩查)。2. 作物品種鑒定與抗病育種場景:種子純度檢測(如水稻品種 SSR 標(biāo)記分析)、抗病基因篩選(如小麥抗銹病基因 Lr34 的分子標(biāo)記輔助育種)。技術(shù)價(jià)值:利用 PCR 擴(kuò)增特異性分子標(biāo)記(如 SSR、SNP),快速鑒定品種真實(shí)性或篩選抗病株系,替代傳統(tǒng)表型鑒定的長周期(如育種周期從 5 年縮短至 2 年)。RePure-(D)B通過梯度功能優(yōu)化PCR反應(yīng)條件,可以將實(shí)驗(yàn)過程簡化,縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率。
篩選轉(zhuǎn)基因作物:在食品生產(chǎn)中,許多原料來自轉(zhuǎn)基因作物。PCR 儀可對食品中的植物成分進(jìn)行檢測,通過擴(kuò)增特定的轉(zhuǎn)基因元件,如啟動(dòng)子、終止子、目的基因等,判斷食品是否含有轉(zhuǎn)基因成分。例如,檢測轉(zhuǎn)基因大豆中的 CP4-EPSPS 基因,確定大豆制品是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,為消費(fèi)者提供知情權(quán)和選擇權(quán)。監(jiān)控轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)識(shí):PCR 技術(shù)能夠準(zhǔn)確檢測食品中的微量轉(zhuǎn)基因成分,有助于監(jiān)管部門對市場上的食品進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控,確保轉(zhuǎn)基因食品按照相關(guān)法規(guī)進(jìn)行正確標(biāo)識(shí),防止誤導(dǎo)消費(fèi)者。RePure-(D)B梯度功能的應(yīng)用為實(shí)驗(yàn)提供了更多可能性和選擇,使實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)更加靈活多樣。南京定量基因擴(kuò)增儀PCR儀一般多少錢
柏恒RePure系列PCR儀進(jìn)行PCR擴(kuò)增,能夠獲得高質(zhì)量的擴(kuò)增產(chǎn)物,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。定性基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家供應(yīng)
放入 PCR 儀:將配置好的反應(yīng)管放入基因擴(kuò)增儀 PCR 儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。設(shè)置擴(kuò)增程序:一般包括預(yù)變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預(yù)變性步驟通常在 94℃-95℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時(shí)間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據(jù)引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時(shí)間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結(jié)合;延伸溫度通常為 72℃,時(shí)間根據(jù)擴(kuò)增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,確保所有擴(kuò)增產(chǎn)物延伸完整。循環(huán)次數(shù)一般為 30-40 次。定性基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家供應(yīng)