96 孔 PCR 儀是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的儀器,通過 96 孔反應(yīng)板實現(xiàn)一次性處理 96 個樣本的基因擴(kuò)增,適用于高通量檢測場景。其設(shè)計**是通過精確控溫(加熱、冷卻、恒溫)實現(xiàn) DNA 的變性、退火、延伸循環(huán),廣泛應(yīng)用于科研、臨床、農(nóng)業(yè)、司法等領(lǐng)域。臨床與醫(yī)學(xué)檢測大規(guī)模病原體篩查應(yīng)用:、流感病毒、HPV 等傳染病的批量檢測(如醫(yī)院檢驗科、疾控中心)。案例:**期間,96 孔 PCR 儀配合自動化移液工作站,單日可完成數(shù)千份樣本的核酸提取與擴(kuò)增。遺傳疾病批量診斷應(yīng)用:同時檢測多個樣本的致病基因突變(如地中海貧血、脊髓性肌萎縮癥)。RePure-(D)B梯度功能的應(yīng)用可有效減少實驗中的試錯次數(shù),節(jié)省實驗時間。江蘇單槽基因擴(kuò)增儀PCR儀微量檢測
反應(yīng)體系配制與加樣體系配制:按比例在離心管中混合各組分(先加非模板試劑,***加模板,避免污染),輕輕混勻(勿劇烈震蕩),短暫離心(1000-2000 rpm,10-20 秒)使液體沉底。示例(20μL 體系):qPCR Mix 10μL + 上游引物(10μM)0.8μL + 下游引物(10μM)0.8μL + 模板 2μL + 無菌水 6.4μL(探針法需額外加探針)。加樣:將配制好的體系逐一加入 96 孔板的對應(yīng)孔中,避免產(chǎn)生氣泡(若有氣泡,用吸頭刺破)。加樣后用封板膜密封(確保無褶皺、無漏液),短暫離心(500-1000 rpm,30 秒),使液體聚集在孔底,避免掛壁。南京定量基因擴(kuò)增儀PCR儀品牌RePure-T的梯度溫控技術(shù)能夠在各個樣本槽之間精確地設(shè)置不同的溫度。
瓊脂糖凝膠電泳檢測:PCR 擴(kuò)增結(jié)束后,取適量的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。在電場作用下,DNA 根據(jù)大小在凝膠中遷移,經(jīng)過染色后,在紫外燈下觀察是否出現(xiàn)特異性條帶。若出現(xiàn)與預(yù)期大小相符的條帶,則初步判斷為轉(zhuǎn)基因成分陽性;若未出現(xiàn)條帶,則為陰性。熒光定量 PCR 分析:若采用熒光定量 PCR 技術(shù),可根據(jù)熒光信號的變化實時監(jiān)測 PCR 擴(kuò)增過程。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或相對定量法,計算出樣本中轉(zhuǎn)基因成分的含量。一般以 Ct 值(循環(huán)閾值)來表示熒光信號達(dá)到設(shè)定閾值時的 PCR 循環(huán)數(shù),Ct 值與模板 DNA 的起始量呈負(fù)相關(guān),通過與標(biāo)準(zhǔn)品的 Ct 值比較,可得出樣本中轉(zhuǎn)基因成分的相對含量。測序驗證:對于瓊脂糖凝膠電泳檢測為陽性的樣本,為進(jìn)一步確認(rèn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,可將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序。將測序結(jié)果與已知的轉(zhuǎn)基因序列進(jìn)行比對,若序列一致,則可確定樣本中含有相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因成分。
定性基因擴(kuò)增儀(PCR 儀)是分子生物學(xué)領(lǐng)域用于實現(xiàn)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的設(shè)備,其通過精確控制溫度循環(huán),使 DN段在體外實現(xiàn)指數(shù)級擴(kuò)增,為基因檢測、疾病診斷、科研等提供關(guān)鍵技術(shù)支持。PCR的原理是利用DNA的熱變性、復(fù)性及延伸特性,通過循環(huán)控溫實現(xiàn)DNA擴(kuò)增,具體過程如下:變性階段:將反應(yīng)體系加熱至94-96℃,使雙鏈DNA解旋為單鏈。退火階段:降溫至50-65℃,讓引物與單鏈DNA的特定區(qū)域互補(bǔ)結(jié)合。延伸階段:升溫至72℃左右,DNA聚合酶以引物為起點,沿模板鏈合成新的DNA鏈。循環(huán)重復(fù):上述三步為一個循環(huán),通常進(jìn)行25-40次,使目標(biāo)DNA片段以2?的倍數(shù)擴(kuò)增(n為循環(huán)數(shù))。RePure-(D)B在同一次實驗中測試多個不同溫度下的反應(yīng)效果,提高實驗的成功率。
微量檢測:PCR 儀具有強(qiáng)大的信號放大能力,能夠?qū)颖局袠O其微量的轉(zhuǎn)基因 DNA 模板進(jìn)行大量擴(kuò)增。即使樣本中*含有少量的轉(zhuǎn)基因成分,經(jīng)過多輪的 PCR 循環(huán),也能使目標(biāo)基因片段的數(shù)量呈指數(shù)級增長,達(dá)到可檢測的水平。通??梢詸z測到樣本中低至 pg 級甚至 fg 級的轉(zhuǎn)基因 DNA,能夠滿足對各種復(fù)雜基質(zhì)中微量轉(zhuǎn)基因成分的檢測需求。早期監(jiān)測:這種高靈敏度使得 PCR 儀能夠在轉(zhuǎn)基因成分含量極低的早期階段就進(jìn)行有效檢測,對于及時發(fā)現(xiàn)和監(jiān)控轉(zhuǎn)基因生物的擴(kuò)散、污染等情況具有重要意義,有助于采取相應(yīng)的措施進(jìn)行防控和管理。Q9604的應(yīng)用領(lǐng)域也在不斷擴(kuò)展,包括遺傳病檢測和疫苗研發(fā)等,展現(xiàn)出廣闊的前景。QPCR基因擴(kuò)增儀PCR儀要多少錢
RePure-T非常適合需要調(diào)節(jié)多個樣本和多個溫度設(shè)置的研究,例如基因擴(kuò)增、變異檢測和生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)等領(lǐng)域。江蘇單槽基因擴(kuò)增儀PCR儀微量檢測
篩選轉(zhuǎn)基因作物:在食品生產(chǎn)中,許多原料來自轉(zhuǎn)基因作物。PCR 儀可對食品中的植物成分進(jìn)行檢測,通過擴(kuò)增特定的轉(zhuǎn)基因元件,如啟動子、終止子、目的基因等,判斷食品是否含有轉(zhuǎn)基因成分。例如,檢測轉(zhuǎn)基因大豆中的 CP4-EPSPS 基因,確定大豆制品是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,為消費者提供知情權(quán)和選擇權(quán)。監(jiān)控轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)識:PCR 技術(shù)能夠準(zhǔn)確檢測食品中的微量轉(zhuǎn)基因成分,有助于監(jiān)管部門對市場上的食品進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控,確保轉(zhuǎn)基因食品按照相關(guān)法規(guī)進(jìn)行正確標(biāo)識,防止誤導(dǎo)消費者。江蘇單槽基因擴(kuò)增儀PCR儀微量檢測