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ELISA,即酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay),其試劑盒基于抗原-抗體特異性結(jié)合的原理。在試劑盒中,首先將已知的抗原或抗體固定在微孔板的表面。如果檢測樣本中含有相應(yīng)的抗體或抗原,就會與之特異性結(jié)合。然后加入酶標記的二抗或抗原,這種酶標記物能夠與之前結(jié)合的物質(zhì)再次特異性結(jié)合。加入底物,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顏色反應(yīng)或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)等可檢測的信號變化。通過檢測信號的強度,可以定量或定性地分析樣本中的目標物質(zhì)。例如在檢測某種疾病相關(guān)蛋白時,樣本中的蛋白與微孔板上固定的抗體結(jié)合,后續(xù)的反應(yīng)步驟逐步放大信號,從而實現(xiàn)對低濃度蛋白的精確檢測。上海伊麗薩生物科技,進口ELISA試劑盒代理的實力之選。遼寧有什么ELISA試劑盒器材
ELISA試劑盒中的封閉液是為了減少非特異性結(jié)合而使用的。在將抗原或抗體包被在微孔板后,微孔板表面可能還存在一些未被包被的活性位點。如果不進行封閉,在加入樣本或其他試劑時,這些位點可能會與樣本中的其他物質(zhì)非特異性結(jié)合,從而干擾檢測結(jié)果。封閉液通常含有一些蛋白質(zhì),如牛血清白蛋白(BSA)或脫脂奶粉等。這些蛋白質(zhì)可以與微孔板上的未被包被的活性位點結(jié)合,從而封閉這些位點,減少非特異性結(jié)合的可能性。正確使用封閉液并選擇合適的封閉時間和濃度,對于提高ELISA試劑盒檢測的特異性和準確性非常重要。上海專業(yè)ELISA試劑盒電話多少進口ELISA試劑盒的代理,上海伊麗薩生物科技等你來。
操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
在內(nèi)分泌疾病的臨床診斷中,ELISA試劑盒是一種有效的檢測手段。例如在甲狀腺疾病的檢測方面,它可以用于檢測甲狀腺如促甲狀腺(TSH)、甲狀腺素(T4)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)以及甲狀腺自身抗體如甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)和甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)等。通過檢測這些指標,可以診斷甲狀腺功能亢進、甲狀腺功能減退等疾病,并了解甲狀腺自身免疫狀態(tài)。在糖尿病的檢測中,ELISA試劑盒也可用于檢測胰島素、C-肽等相關(guān)指標,有助于評估胰島功能和糖尿病的病情。深圳Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。
ELISA試劑盒在農(nóng)藥殘留檢測中也扮演著重要角色。以有機磷農(nóng)藥殘留檢測為例,由于有機磷農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中普遍使用,其殘留可能會污染農(nóng)產(chǎn)品。ELISA試劑盒的微孔板可以固定有針對有機磷農(nóng)藥的特異性抗體。當農(nóng)產(chǎn)品樣本中的有機磷農(nóng)藥殘留與抗體結(jié)合后,再經(jīng)過酶標記和底物反應(yīng),就能夠檢測出農(nóng)藥殘留量。這種檢測方法具有快速、簡便、成本相對較低等優(yōu)點,能夠在農(nóng)產(chǎn)品進入市場前對其進行大規(guī)模篩查,保障農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全,減少因農(nóng)藥殘留對人體健康的潛在威脅。進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理,科研人員的福音。南京Novateinbio ELISA試劑盒科學(xué)應(yīng)用
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在土壤污染檢測中,ELISA試劑盒也能發(fā)揮作用。土壤中可能存在多種污染物,包括有機污染物如多氯聯(lián)苯(PCB)和重金屬等。ELISA試劑盒可以通過檢測土壤提取物中的目標污染物來評估土壤污染狀況。例如,對于多氯聯(lián)苯,它是一種持久性有機污染物,ELISA試劑盒利用特異性抗體識別土壤提取物中的多氯聯(lián)苯。對于重金屬污染,雖然直接檢測重金屬離子有一定難度,但可以檢測重金屬離子與土壤中生物分子結(jié)合形成的復(fù)合物。這種檢測方法有助于快速了解土壤污染的大致情況,為進一步的詳細分析和土壤修復(fù)工作提供初步的依據(jù)。遼寧有什么ELISA試劑盒器材